铜绿假单胞菌VIM-2型金属β-内酰胺酶基因的克隆及原核表达重组质粒的构建

朱家馨; 陈瑞; 周宇麒; 黄静; 张天托; 江丽芳

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目的扩增铜绿假单胞菌VIM-2型金属β-内酰胺酶基因,导入载体pMD18-T和pGEX-4T-1构建重组质粒pMD18-T/VIM-2和pGEX-4T-1/VIM-2。方法采用PCR技术从铜绿假单胞菌扩增VIM-2基因,先将其亚克隆入pMD18-T载体后测定核苷酸序列。再将VIM-2基因克隆至表达载体pGEX-4T-1,并转化大肠埃希菌JM109。用限制性酶切分析、PCR、序列分析等进行重组质粒鉴定。结果扩增出801 bp的VIM-2基因,构建重组质粒pMD18-T/VIM-2和pGEX-4T-1/VIM-2。结论成功扩增801 bp的VIM-2基因,该基因与国外同类酶的核苷酸同源性100%。重组质粒pGEX-4T-1/VIM-2构建成功。

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来源
《中国微生态学杂志》 |2006年第3期|174-175|共3页
作者
朱家馨; 陈瑞; 周宇麒; 黄静; 张天托; 江丽芳;
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作者单位

中山大学附属第三医院呼吸内科;

中山大学附属第二医院呼吸内科;

中山大学基础医学院微生物学教研室;

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正文语种 chi
中图分类 R378.991;
关键词
铜绿假单胞菌; 金属β-内酰胺酶; VIM-2; PCR;

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