平菇钙调素的分离纯化和性质的研究

戴洁; 贡岳松

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cqvip:钙调素(Calmodulin,CaM)是广泛存在于一切真核生物中的一种多功能调节蛋白,作为细胞内的主要钙离子受体,人们确信它在动物、植物细胞功能活动中起着重要作用,目前有关真菌CaM的研究较少,对真菌CaM性质的系统研究,国内尚无报道。本文从平菇(Pleurotus ostreatus)中分离纯化得到真菌CaM,并做了有关物理化学特性及其生物活性的研究。一、材料和方法 (一)供试材料平菇购自南京蔬菜研究所;苯基琼脂糖Phenyl-sepharose CL 4B为Pharmacia产品;DEAE-Cellulose 32为Whatman产品;Ampholyte为中国科学院上海生化所产品,其余试剂均为分析纯。 (二)试验方法包括以下五个方面。 1.平菇CaM的分离纯化:平菇加入3倍体积缓冲液A(Buffer A:20mmol/l Tris-HCl,1mmol/l)巯基乙醇,0.5mmol/l PMSF,2retool/l EDAT,pH17.5)匀浆10″×6次,8000g离心30分钟,重复抽提,合并上清,加入30％TCA至终浓度为3％,离心,弃上清,沉淀用缓冲液搅匀透析过夜,再加适量缓冲液A,用1mol/l Tris-base调pH17.5,搅拌30分钟。

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来源
《食用菌》 |1994年第5期|9-10|共2页
作者
戴洁; 贡岳松;
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作者单位

不详;

不详;

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正文语种 CHI
中图分类 S646.110.1;
关键词
平菇; 钙调素; 分离; 提纯;

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