猪表皮生长因子的原核表达及纯化

刘庭; 汤慧; 唐青海; 刘莎; 薛姣雄; 吴广艳; 马洁; 赵婷芳; 唐斯萍

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[目的]:提高重组猪表皮生长因子(pEGF)的表达量和纯化量,为后续研究pEGF对仔猪生长发育的影响奠定基础。[方法]:将人工合成的pEGF基因克隆至pEGF4T-1载体,转化至大肠杆菌Rossetta(DE3)中,得到重组菌株Rossetta(DE3)-pGEX-pEGF,IPTG诱导表达,进行表达条件的优化,用GST-tag亲和层析纯化方法进行纯化。[结果]:pEGF基因大小为159 bp,融合表达蛋白分子量为32k Da,最佳诱导表达条件为IPTG浓度0.01mmol/L、诱导温度15℃和诱导时间24h。流穿液和洗涤液中目的蛋白含量极少,洗脱液得到了高纯度的GST-pEGF融合蛋白,纯化较为成功。[结论]:成功构建了pEGF表达菌株,得到了最优的诱导表达条件和最优的纯化工艺,为pEGF相关产品的开发以及应用奠定了基础。

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来源
《湖南畜牧兽医》 |2022年第2期|45-50|共6页
作者
刘庭; 汤慧; 唐青海; 刘莎; 薛姣雄; 吴广艳; 马洁; 赵婷芳; 唐斯萍;
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作者单位

衡阳师范学院生命科学与环境学院南岳山区生物资源保护与利用湖南省重点实验室动物微生物新型检测技术及生物制剂衡阳市重点实验室;

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正文语种 chi
中图分类饲养管理;
关键词
猪表皮生长因子; 诱导表达; GST标签; 蛋白纯化; 条件优化; 融合表达;

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