绵羊β2-肾上腺素能受体基因(β2-AR)的克隆及其第二细胞外环在大肠杆菌中的表达

张慧玲; 陈小平; 杨祥; 陈勇; 韩冰; 王子荣

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本研究以β2-肾上腺素能受体(β2-adrenergic receptor,β2-AR)基因的保守序列设计了1对PCR引物,通过PCR技术首次获得了萨福克、小尾寒羊和中国美利奴(新疆型)3个绵羊(Ovis aries)品种的β2-AR基因(GenBank登录号分别为EU707939、EU707940和EU707941),该基因含一个1 257 bp的开放阅读框(ORF),编码418个氨基酸残基.核苷酸序列分析显示,绵羊β2-AR基因与牛、猪、大鼠和人的相似性分别为98.4%、88.5%、84.2%和80.5%.通过基因合成技术合成了双拷贝的绵羊β2-AR第二细胞外环编码区DNA,并将其与pET32C(+)重组.重组菌以1 mmol/L IPTG诱导,通过SDS-PAGE和Western blot分析,绵羊β2-AR第二细胞外环融合蛋白在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中成功表达,表达产物分子量约为26 kD,表达水平最高占菌体总蛋白的40.3%.

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来源
《农业生物技术学报》 |2010年第5期|911-916|共6页
作者
张慧玲; 陈小平; 杨祥; 陈勇; 韩冰; 王子荣;
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作者单位

新疆农业大学动物科学学院,乌鲁木齐,830052;

新疆农业大学动物科学学院,乌鲁木齐,830052;

新疆农业大学动物科学学院,乌鲁木齐,830052;

新疆农业大学动物科学学院,乌鲁木齐,830052;

新疆农业大学动物科学学院,乌鲁木齐,830052;

新疆农业大学动物科学学院,乌鲁木齐,830052;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂;
关键词
绵羊; β2-肾上腺素能受体基因(β2-AR); 克隆; 原核表达;

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