重组AS16蛋白抗原检测猪蛔虫抗体间接ELISA方法的建立

何光志; 安永如; 周颖; 简昌友; 张太华; 崔小东

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重组AS16蛋白抗原检测猪蛔虫抗体间接ELISA方法的建立

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[目的]建立检测猪蛔虫抗体的间接ELISA方法.[方法]用猪蛔虫重组AS16蛋白作为包被抗原,通过方阵滴定试验确定ELISA的最佳工作条件,包括抗原最佳包被浓度与血清最佳稀释度、最佳包被液、抗原封闭时间、血清反应时间、酶标二抗工作时间和间接ELISA判定标准,并通过交叉试验现场对1 200份猪血清样本采用该试验建立的ELISA和AGP同时进行蛔虫抗体的检测.[结果]ELISA的最佳工作条件是:抗原包被浓度为10 μg/ ml,37 ℃ 1 h,4 ℃过夜;血清稀释度为1∶ 80; 酶标SPA稀释度为1∶ 10 000,37 ℃孵育45 min.该试验制备的ELISA酶标板的临界值为0.196.交叉试验检测表明,ELISA方法阳性检出率为 45 %,而AGP阳性检出率为30%.该方法具有特异高、快速、敏感等特点.[结论]研究结果证实重组AS16蛋白具有良好的反应原性,可以用来建立ELISA方法诊断猪蛔虫病.

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来源
《安徽农业科学》 |2010年第31期|17710-17712|共3页
作者
何光志; 安永如; 周颖; 简昌友; 张太华; 崔小东;
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作者单位

贵阳中医学院;

贵州贵阳550002;

贵州省安顺市职业技术学院;

贵州安顺;

561002;

贵州省思南县动物疫病预防控制中心;

贵州思南;

565100;

贵州省凤冈县人民医院;

贵州凤冈;

564200;

贵州省思南县动物疫病预防控制中心;

贵州思南;

565100;

贵州省思南县动物疫病预防控制中心;

贵州思南;

565100;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类猪;
关键词
猪蛔虫; 重组AS16蛋白; ELISA;

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