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艳山姜挥发油调控Keap1-Nrf2信号改善高糖诱导的胰岛β细胞凋亡

         

摘要

目的:探讨艳山姜挥发油对高糖诱导胰岛β细胞凋亡的保护作用及其可能的作用机制。方法:将对数生长期的β细胞分为正常对照组、甘露醇组、高糖模型组、维生素E(VE,1×10-7 mmol/L)阳性对照组及艳山姜挥发油低(1μg/L)、高(4μg/L)剂量组。高糖作用72 h后,运用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,Giemsa染色进行形态学观察,Hoechst 33342染色法观察细胞核的形态学变化,免疫印迹法分析Keap1、Nrf2、NQO-1、Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9的蛋白表达。Nrf2抑制剂(ML385)及激动剂(Bardoxolone)作用后,免疫印迹法分析Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9的蛋白表达情况。结果:与正常对照组比较,高糖作用后,β细胞的存活率显著降低,Giemsa染色显示细胞胞体呈现不规则变化,Hoechst 33342染色后荧光下可见细胞核皱缩,碎裂,染色质凝集,Western blot结果显示Keap-1、Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达显著上调,Nrf2、NQO-1及Bcl-2蛋白表达下调。给予艳山姜挥发油及VE预处理后,可明显减轻高糖诱导的细胞损伤,并改善上述蛋白的异常表达。艳山姜挥发油联用Nrf2抑制剂ML385作用细胞后,艳山姜挥发油对上述蛋白异常表达的改善作用可被减弱。与单独艳山姜挥发油组比较,Nrf2的激动剂Bardoxolone与艳山姜挥发油联用后,对Bcl-2蛋白表达的低水平及Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达高水平的改善作用均无明显改变。结论:艳山姜挥发油可改善高糖诱导的β细胞的凋亡,其作用可能与活化Nrf2信号有关。

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