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浒苔中MnSOD和CAT基因克隆和表达分析

         
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实验以大型绿藻浒苔为材料,克隆了其抗氧化系统关键酶锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,MnSOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)基因的部分片段,利用荧光定量PCR技术研究了MnSOD和CAT对温度和水杨酸作用的响应规律.结果获得浒苔318 bp的MnSOD基因,该MnSOD推测的氨基酸序列与裂片石莼MnSOD相似性最高为89％;获得了229 bp的CAT基因,该浒苔CAT编码氨基酸序列与裂片石莼和雨生红球藻CAT序列相似性分别为99％和93％.在利用MnSOD和CAT氨基酸序列构建的系统树中,浒苔均先与裂片石莼聚类,再与其他绿藻聚在一起.不同温度对浒苔MnSOD和CAT基因表达影响表明,35℃高温培养对浒苔MnSOD和CAT基因表达影响最显著,其表达量分别为25℃培养的2.18倍和2.05倍;5℃低温培养次之;而15℃与25℃培养对MnSOD和CAT基因表达影响差异不显著(P＞0.05).在高温35℃下,添加0.1 mmol/L水杨酸后MnSOD和CAT基因表达量分别为各自对照的2.08倍和5.30倍,而0.01 mmol/L水杨酸添加后基因表达与对照差异不显著(P＞0.05).研究表明,MnSOD和CAT基因表达的增强不仅是浒苔对高温胁迫的响应,而且也是水杨酸缓解高温对浒苔不利影响的方式之一.

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