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高效液相色谱法检测食品中17种游离氨基酸

         
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目的 使用异硫氰酸苯酯衍生-高效液相色谱法对食品中17种游离氨基酸进行检测.方法 对17种游离氨基酸及其苯胺硫甲酰基衍生物稳定性的分析,研究游离氨基酸的最佳衍生条件.同时,对盐沉淀法和C18固相萃取(solid phase extraction,SPE)小柱法2种样品除杂方法 的加标回收率进行测定.结果 胱氨酸加热干燥5 h后,回收率为68.46％±4.01％,热稳定性差;其它16种氨基酸加热1～5 h后回收率均在90％～110％之间,热稳定性较好.胱氨酸的苯胺硫甲酰基衍生物,6 h后回收率仅为11.04％±1.65％,稳定性差;其它氨基酸的苯胺硫甲酰基衍生物24 h后回收率均大于90％,比较稳定.另外,前处理中使用C18 SPE除杂时,样品中游离氨基酸的加标回收率均大于70％,而使用水杨酸和三氯乙酸除蛋白后苯胺硫甲酰基衍生物降解严重.结论 除胱氨酸外,其余16种氨基酸的热稳定性均较好,且生成的苯胺硫甲酰基衍生物比较稳定,可以通过异硫氰酸苯酯衍生进行定量分析.相比于水杨酸和三氯乙酸沉淀法,C18 SPE柱是游离氨基酸除杂方法 的首选,而无机盐影响异硫氰酸苯酯与氨基酸衍生,因此此方法 不适用于含盐样品的衍生.

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