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聚苯乙烯培养板表面吸附血浆蛋白对成骨细胞黏附的影响

         
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目的:分析聚苯乙烯培养板表面吸附血浆蛋白对成骨细胞黏附的影响.方法:分离大鼠血浆,将原浓度及分别稀释成2、4、8、16倍的血浆加入96孔聚苯乙烯培养板,以无血清堵养基为对照,于37℃条件下分别放置1、2 h后,用考马斯亮蓝染色培养板表面吸附的蛋白;分离、培养出生24 h的大鼠颅盖骨成骨细胞,用无血清培养基调整细胞密度后加入预先吸附血浆蛋白的96孔聚苯乙烯培养板,以无血清培养基为对照,37℃、5%CO<,2>及饱和湿度下培养1、2 h.倒置相差显微镜下观察细胞黏附情况.结果:①血浆蛋白吸附孔呈现蓝色,随着稀释度的增加颜色逐渐变浅,吸附1 h和2 h的孔均有明显着色;②成骨细胞加入1 h,蛋白吸附组与对照组黏附细胞数少,形态无明显差别,以圆形为主;细胞加入2 h,两组间细胞数量无明显差别,平均每个视野细胞数分别为:实验组(20±7)个,对照组(18±5)个(P>0.05),蛋白吸附组细胞形态无明显变化,对照组细胞形态以三角形、不规则形为主.结论:①考马斯亮蓝可作为吸附蛋白的一种原位检测方法;②聚苯乙烯表面吸附血浆蛋白对成骨细胞黏附无明显促进作用.

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