实时定量PCR评价小鼠胸腺功能方法的建立

张华华; 曾耀英; 何贤辉; 刑飞跃

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实时定量PCR评价小鼠胸腺功能方法的建立

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目的建立实时定量PCR检测小鼠胸腺及脾脏T淋巴细胞中信号结合T细胞受体删除环(sjTRECs)水平的方法,推测其中的初始T细胞的数目,评价胸腺功能,从而为胸腺功能研究及胸腺研究模型的建立提供研究依据和方法.方法提取小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞基因组DNA,PCR扩增目的片段.纯化构建标准质粒的RAG2片段,构建标准重组质粒并鉴定.优化PCR体系后,实时定量PCR反应建立标准曲线,并检测不同品系(BALB/c和C57BL/6)成年小鼠胸腺及脾脏淋巴细胞siTRECs含量.结果成功构建标准质粒.确定最适实时定量PCR反应条件后,在实时定量PCR中建立可信度高的标准曲线.建立的方法分析表明,这两个不同品系的sjTRECs含量统计学差异不显著.结论成功建立定量检测小鼠T淋巴细胞中sjTRECs含量从而推测其中的初始T细胞数目的方法,为胸腺功能研究及胸腺研究模型的建立提供研究依据和方法.

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来源
《南方医科大学学报》 |2006年第1期|62-65|共4页
作者
张华华; 曾耀英; 何贤辉; 刑飞跃;
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作者单位

暨南大学组织移植与免疫实验中心,广东,广州,510632;

暨南大学组织移植与免疫实验中心,广东,广州,510632;

暨南大学组织移植与免疫实验中心,广东,广州,510632;

暨南大学组织移植与免疫实验中心,广东,广州,510632;

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正文语种 chi
中图分类微生物学;
关键词
实时定量PCR; T细胞受体删除环; 幼稚T细胞;

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