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腐烂茎线虫种内群体特异性检测研究

         

摘要

对腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor Thorne)7个不同地理群体rDNA中的ITS区进行PCR-RFLP和序列测定,发现种内群体间无论在序列长度还是酶切图谱均存在一定的变异.根据其序列特征设计出种特异性引物,对所供试的腐烂茎线虫群体及属间不同种群体样品的rDNAITS区相应区段扩增以验证其特异性,同时对分别由1~5条腐烂茎线虫成虫和幼虫提取的DNA进行特异性扩增以验证其灵敏度.结果表明:所有供试的腐烂茎线虫群体均可以特异性扩增一个346bp的片段,而所有供试的属外种均没有扩增片段;由1~5条腐烂茎线虫成虫和4~5条幼虫进行的特异性扩增也获得稳定的目的片段.显示该特异性引物具有较高的稳定性、特异性和灵敏度,能快速、准确地检测出腐烂茎线虫.

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