摘要:目的:对桂郁金SSR-PCR反应体系进行建立与优化,使其适合分析桂郁金遗传多样性等研究内容.方法:通过正交设计法对PCR反应体系的引物,模板,2×Taq PCR MasterMix(包括Tap DNA聚合酶,dNTPs,缓冲液等)以及扩增程序进行建立和优化.结果:桂郁金SSR-PCR反应的最佳体系是在15μL的反应体系中,DNA模板2.5μL(25 ng·μL-1),引物1.0μL(1.0μmol·L-1),2×Taq PCR MasterMix6μL,其中Tap DNA聚合酶0.05 U·μL-1,Mg2+ 3.0 mmol·L-1,dNTPs0.3 mmol·L-1,加ddH2O至15μL.PCR反应程序的最佳参数设定为变性30 s,退火30 s,延伸45 s,循环35次.结论:建立了桂郁金SSR-PCR反应体系,并通过10份桂郁金材料进行验证,结果显示该体系稳定可靠,可以为桂郁金引物开发,良种选育繁育等相关研究提供参考.