SIRT2的亚细胞定位及其对293T细胞增殖的影响

王旋; 仲念念; 赵盼雄; 季少平

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SIRT2的亚细胞定位及其对293T细胞增殖的影响

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目的:构建SIRT2的真核表达载体,并检测其在人胚肾细胞株293T中的亚细胞定位以及对293T细胞增殖的影响.方法:以SIRT2-pIRES质粒为模板PCR扩增获得SIRT2基因目的片段,然后将其克隆到真核表达载体pEGFP-C2中,使目的基因能够和GFP融合表达;采用脂质体法转染293T细胞,在荧光显微镜下观察融合蛋白的亚细胞定位;用核浆分离和Western印迹方法检测融合蛋白的亚细胞定位,加入出核抑制剂细霉素B,进行同样的处理;采用MTT法检测SIRT2对293T细胞增殖的影响.结果:SIRT2主要分布在细胞质中,加入细霉素B后,在细胞质和细胞核中都有明显分布;SIRT2在细胞质中时抑制293T细胞的增殖,当其入核时抑制作用减弱.结论:SIRT2具有核质穿梭功能,它的亚细胞定位是个动态变化过程;SIRT2抑制细胞的增殖,抑制作用的强弱与其亚细胞定位有关.

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来源
《生物技术通讯》 |2015年第5期|640-644|共5页
作者
王旋; 仲念念; 赵盼雄; 季少平;
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作者单位

河南大学医学院,河南开封475004;

河南大学医学院,河南开封475004;

河南大学医学院,河南开封475004;

河南大学医学院,河南开封475004;

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正文语种 chi
中图分类细胞生理学;基因工程（遗传工程）;
关键词
SIRT2; 真核表达载体; 亚细胞定位; 细胞增殖;

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