带myc标签的人造血相关PBX相互作用蛋白真核表达载体的构建及其功能研究

李玲; 闫志风; 蒋昊; 冯滢滢; 冀全博; 黄蓉; 周丽英; 王鹏; 徐小洁

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目的:构建带myc标签的造血相关PBX相互作用蛋白(HPIP)的真核表达载体,获得myc-HPIP融合蛋白,并对其生物学功能进行初步检测.方法:以本实验室保存的pcDNA3.0-HPIP质粒为模板,采用PCR技术扩增HPIP编码序列,将其插入pXJ-40-myc载体,通过Western印迹检测表达情况;将重组质粒与空载体分别转染人肝癌HepG2细胞,通过Western印迹检测其对AKT、ERK信号通路中AKT、ERK磷酸化水平的影响.结果:双酶切和测序结果表明myc-HPIP真核表达质粒构建成功,转染HepG2细胞后表达了myc-HPIP融合蛋白;Western印迹证明myc-HPIP可升高AKT、ERK的磷酸化水平.结论:构建了带myc标签的人HPIP真核表达载体,为进一步研究HPIP在肿瘤发生发展中的功能奠定了基础.

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来源
《生物技术通讯》 |2014年第3期|369-372|共4页
作者
李玲; 闫志风; 蒋昊; 冯滢滢; 冀全博; 黄蓉; 周丽英; 王鹏; 徐小洁;
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作者单位

军事医学科学院生物工程研究所,北京100850;

解放军总医院妇产科,北京100853;

军事医学科学院生物工程研究所,北京100850;

第二炮兵总医院,北京100088;

军事医学科学院生物工程研究所,北京100850;

军事医学科学院生物工程研究所,北京100850;

军事医学科学院生物工程研究所,北京100850;

军事医学科学院生物工程研究所,北京100850;

军事医学科学院生物工程研究所,北京100850;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
造血相关PBX相互作用蛋白; 克隆; 真核表达;

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