重组人表皮生长因子在毕赤酵母X33中的构建、表达和纯化

高云鹏; 赵雨; 王新宇; 白雪媛; 王佳雯

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重组人表皮生长因子在毕赤酵母X33中的构建、表达和纯化

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在毕赤酵母X33中表达人表皮生长因子并纯化,对表皮生长因子(EGF)进行密码子优化,构建pPICZa A-EGF真核表达质粒,转化X33感受态细胞;利用抗性筛选以及PCR鉴定阳性菌株.经过甲醇诱导和镍柱纯化,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白分泌表达情况.成功构建了表达pPICZa A-EGF真核表达质粒,转入X33中获得阳性菌株,成功诱导蛋白分泌表达并纯化.在毕赤酵母X33中成功表达人表皮生长因子,纯化后纯度为80％,收率为5.8 mg/L.

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来源
《科学技术与工程》 |2018年第17期|141-144|共4页
作者
高云鹏; 赵雨; 王新宇; 白雪媛; 王佳雯;
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作者单位

长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心,长春130117;

长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心,长春130117;

长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心,长春130117;

长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心,长春130117;

长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心,长春130117;

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正文语种 chi
中图分类基因的表达;
关键词
表皮生长因子; 毕赤酵母; 蛋白表达; 纯化;

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