摘要:目的:构建人载脂蛋白A-I基因的重组腺病毒载体,探讨人载脂蛋白A-I在小鼠体内的表达,建立人载脂蛋白A-I过表达小鼠模型。rn 方法:采用基因工程技术,从重组质粒pDNR-LIB-ApoA-I-PA获得目的基因人载脂蛋白A-I基因,插入穿梭质粒pshuttle.CMV后,在细菌内与pAdEasy-1进行同源重组,经脂质体转染HEK293细胞,在细胞内包装获得腺病毒颗粒AdV-AI,并进行大量扩增和纯化。纯化的腺病毒经尾静脉注射入BALB/c小鼠体内,通过双向琼脂免疫扩散反应、免疫比浊法及Westem Blot检测人载脂蛋白A-I在小鼠体内的表达。rn 结果:成功构建了重组腺病毒载体,纯化后的病毒滴度达4.0×10~(10)pfu/ml。动物体内实验显示重组腺病毒载体能在小鼠体内高表达人载脂蛋白A-I,且在注射1d后表达高达(740±110)mg/L(n=3)。rn 结论:成功构建了重组腺病毒载体,并能介导外源基因人载脂蛋白A-I在小鼠体内的表达,建立了人载脂蛋白A-I过表达小鼠模型,为进一步研究载脂蛋白A-I的抗内毒素功能奠定了基础。