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DiI荧光标记的骨髓基质干细胞与支架材料复合后观察研究

         

摘要

通过DiI荧光标记后的骨髓基质干细胞(BMSC)与β-磷酸三钙(β-TCP)支架复合后的镜下观察,找到一种大块支架材料上活细胞观察的新方法.为组织工程骨的研究提供新的可行性方法.取犬的第3代BMSC消化后分两组,实验组和对照组,实验组以DiI标记,另一组正常细胞不标记,测定生长曲线.另以相同数量两组细胞同β-TCP材料复合后培养,测定两组细胞贴附率,在第3、7、14天时,测其在β-TCP材料上的增值情况,并在荧光显微镜下连续观察标记后的BMSC的生长状况.结果表明,实验组和对照组的生长曲线基本吻合,两组之间各时间点的细胞计数都没有统计学意义(P>0.05).两组细胞与β-TCP材料复合三维共培养后,第3、7、14天细胞增值率未见显著性差异(P>0.05).荧光显微镜观察染色后的BMSC细胞可见细胞胞膜发出红色荧光呈环状,胞核未着色,显现良好.DiI荧光标记后的BMSC生长增殖,可在荧光显微镜下活体连续观察,在大段不透明支架材料上的细胞观察能作为一种较好的新方法来研究种子细胞与支架材料的相互作用,可以成为组织工程骨研究中的新观察方法推广应用.

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