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survivin和bcl-2双基因敲减对人舌癌裸鼠移植瘤的抑制作用

         

摘要

目的:探讨survivin和bcl‐2单基因与双基因敲减后对舌癌裸鼠移植瘤成瘤性的影响。方法:将筛选含有转染survivinsiRNA‐Tca8113;bcl‐2siRNA‐Tca8113;survivin/bcl‐2siRNA‐Tca8113;Negative‐siRNA‐Tca8113细胞及未转染的Tca8113细胞分组进行培养,细胞数调成1×107细胞/ml接种于裸鼠左后肢股部,以无菌生理盐水做阴性对照,隔日观察裸鼠肿瘤发生情况,并测量肿瘤大小、体积。接种5周后处死并测量肿瘤体积大小、比较抑制结果及肿瘤组织切片HE染色病理分析。结果:肿瘤形成率显示空白对照、Lipofectamine和Negative‐siRNA三组的裸鼠成瘤率100%,生长速度快、瘤体大;单基因敲减组(bcl‐2siRNA、survivinsiRNA)和双基因敲减组(sur‐vivin/bcl‐2siRNA)瘤体较空白对照组小,生长速度慢;双基因敲减组成瘤率低(66.6%),注射生理盐水的阴性对照组接种后未出现肿瘤。肿瘤生长曲线显示空白对照、Lipofectamine、Negative‐siR‐NA三组肿瘤生长速度明显快于单基因敲减和双基因敲减组,而双基因敲减组不仅成瘤延长,而且生长速度明显慢于单基因敲减组。肿瘤抑制率显示双基因敲减(84.5%)明显高于单基因敲减(67.6%和69.8%,P<0.05);肿瘤组织HE染色镜下可见:空白对照、Lipofectamine、Negative‐siRNA组肿瘤呈浸润性生长,有大片坏死区,survivin和bcl‐2基因敲减后的肿瘤组织与周围组织分界较清,未见明显浸润现象,肿瘤组织坏死区较少。结论:survivin和bcl‐2基因敲减能有效抑制裸鼠移植瘤成瘤性,双基因敲减对裸鼠移植瘤抑制作用强于单基因敲减。

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