基因,肿瘤抑制

摘要： 目的 探究微小RNA-21(miR-21)在子痫前期(PE)病人发病中的表达变化及可能作用机制.方法 收集2016年8月至2019年10月郑州市妇幼保健院收治的45例PE病人及45例匹配正常孕妇胎盘组织,采用实时定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-21相对表达水平.体外培养人滋养层细胞系HTR-8/SVneo,转染miR-21模拟物(mimics组),抑制物(inhibitor组)及无意义序列(NC组),另设无任何处理HTR-8/SVneo细胞为空白对照组(BC组).采用Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率,采用Tanswell小室检测细胞侵袭性.生物学分析并进行双荧光素酶报告基因验证miR-21与同源性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)的靶向关系,免疫印迹(WB)法检测胎盘组织及细胞中PTEN、磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)及蛋白激酶B(p-Akt)磷酸化蛋白表达情况.结果 与正常组(0.45±0.06)比较,PE病人胎盘组织中miR-21表达水平(0.41±0.05)显著降低(t=79.157,P<0.05),PTEN mRNA及蛋白表达水平分别为(4.13±0.58)、(0.91±0.08)均显著增加(t=36.201、30.858,P<0.05).PE病人胎盘组织中miR-21与PTEN蛋白表达水平呈负相关(r=?0.542,P<0.05).与BC组、NC组比较,mimics组HTR-8/SVneo细胞侵袭细胞数、p-PI3K、p-Akt蛋白表达水平显著增加,凋亡率、PTEN蛋白表达水平显著降低,inhibitor组呈相反趋势.双荧光素酶报告基因实验结果显示,与转染NC+Wt(1.00±0.00)比较,转染mimics+Wt后HTR-8/SVneo细胞相对荧光活性(0.39±0.04)显著降低(t=37.355,P<0.05).结论 miR-21可通过靶向抑制PTEN表达促进细胞侵袭并抑制其凋亡,可能与促进PI3K/Akt通路激活有关.

摘要： 目的 探讨miR-192-5 p在多发性骨髓瘤中的表达水平及其调控机制.方法 选取骨髓瘤细胞株U266作为研究对象,利用荧光定量PCR检测多发性骨髓瘤细胞中miR-192-5 p的表达水平;使用生物信息学网站预测miR-192-5 p潜在靶基因USP1并利用双荧光素酶报告实验验证其靶向关系;利用细胞转染实验对多发性骨髓瘤细胞株进行miR-192-5 p mimics、miR-192-5 p inhibitor及相关对照组的细胞转染,采用CCK-8法和流式细胞仪分别检测转染后细胞的增殖和凋亡情况;利用Western blot检测转染后细胞中USP1蛋白表达水平.结果 qRT-PCR结果显示,转染后多发性骨髓瘤细胞中miR-192-5p表达水平低于正常骨髓细胞(P<0.01);CCK-8细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell体外侵袭转移实验和流式细胞仪检测实验结果显示,过表达miR-192-5 p抑制骨髓瘤细胞的增殖、迁移、侵袭,促进骨髓瘤细胞的凋亡;靶基因预测及验证实验结果显示USP1是miR-192-5 p的靶基因,miR-192-5 p的表达可以显著降低骨髓瘤细胞中USP1蛋白的表达.结论 miR-192-5 p在多发性骨髓瘤中可能作为抑癌基因发挥作用,通过靶向作用于U S P1抑制多发性骨髓瘤的发展.

摘要： 目的 探讨Linc00891在骨肉瘤(OS)中发挥的作用并初步分析其机制.方法 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qPCR)检测Linc00891在不同OS细胞系U-2 OS、Saos-2、MG-63、SW 1353及人成骨细胞系hFOB 1.19中的表达,选择Saos-2和MG-63 OS细胞系转染过表达Linc00891载体.CCK-8法、平板克隆法和Transwell小室检测过表达Linc00891对人OS细胞系Saos-2和MG-63增殖、克隆形成能力和迁移能力的影响.Western blot法检测上皮间质转化相关蛋白钙黏着蛋白E(E-cad)、钙黏着蛋白N(N-cad)的表达.RNA pulldown实验检测Linc00891和miR-27a-3p在OS细胞中的结合关系.TCF/LEF报告试剂盒检测过表达Linc00891和上调miR-27a-3p对不同OS细胞系中Wnt/β-catenin信号通路的影响.结果 不同OS细胞系U-2 OS、Saos-2、MG-63、SW 1353中Linc00891的表达水平显著低于正常成骨细胞系hFOB 1.19(P<0.05).过表达Linc00891可抑制人OS细胞系Saos-2和MG-63的增殖、克隆形成能力、迁移能力及上皮间质转化(P<0.05).Linc00891和miR-27a-3p在OS细胞中存在结合关系.过表达Linc00891能够逆转miR-27a-3p对Wnt/β-catenin信号通路的激活(P<0.05).结论 Linc00891通过竞争性结合并抑制miR-27a-3p,在OS中发挥抑癌作用.

摘要： 肝细胞癌(HCC)是最常见的恶性癌症之一,发病率和病死率一直居高不下,预后很差.叉头框(FOX)转录因子家族可调控细胞的生长、分化及组织发育,在肿瘤中具有重要的生物学作用.综述了FOX家族分子表达与HCC发生发展及预后的关系,分析了FOX在HCC进展中发挥作用的机制,提出FOX家族分子有望成为HCC治疗的新靶点.

摘要： 目的通过检测子宫内膜癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)-LA16c-313D11.11和突变型p 53的表达以探讨其与子宫内膜癌发生、发展之间的关系。方法收集复旦大学附属妇产科医院2013年9月-2016年9月收治的54例子宫内膜癌患者的临床资料。采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学染色法,分别检测lncRNA-LA16c-313D11.11和突变型p 53的表达。以lncRNA-LA16c-313D11.11相对表达量的中位数(1.168)为标准,将患者分为低表达组(≤1.168)与高表达组(>1.168)。对患者lncRNA-LA16c-313D11.11和突变型p 53的表达情况与临床和病理学特征进行相关性分析。结果lncRNA-LA16c-313D11.11高表达组和低表达组患者在国际妇产科联盟(FIGO)分期Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ或Ⅳ期患者中的占比分别为66.67%和33.33%、4/7和3/7、3/11和8/11,差异有统计学意义(P<0.05)。高表达组和低表达组在发生淋巴结转移患者中的占比分别为3/11和8/11,在未发生淋巴结转移患者中的占比分别为65.12%和34.88%,差异有统计学意义(P<0.05)。突变型p 53阳性患者在子宫内膜样腺癌、浆液性腺癌和透明细胞癌患者中的占比分别为19.51%、7/9、2/4,在无和有淋巴转移患者中的占比分别为23.26%、7/11,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。高表达组和低表达组突变型p 53阳性的患者占比分别为6/7和11/17,差异有统计学意义(P<0.05)。结论lncRNA-LA16c-313D11.11的高表达与子宫内膜癌分期早、无淋巴结转移相关,lncRNA-LA16c-313d11.11可能通过p 53在子宫内膜癌的调控中发挥重要作用。

摘要： 宫颈癌为女性恶性肿瘤之一,对于其发病机制及所涉及的通路分子的研究越来越深入.其中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的研究受到高度关注.Wnt/β-catenin信号通路涉及广泛的生理和病理过程,包括细胞生长、分化、个体发育、迁移、遗传稳定性、凋亡、干细胞自我更新和维持成人组织稳态.稳定的β-catenin在细胞质中积累并转移到细胞核,激活Wnt/β-catenin信号通路,是多种癌症的诱发因素之一.β-catenin的积累在Wnt/β-catenin信号通路占据核心位置.β-catenin通过Wnt/β-catenin信号通路驱动靶基因,参与宫颈癌多步骤的发生及发展.而Dickkopf相关蛋白3(DKK3)可能通过降解β-catenin、阻断β-catenin的核转运,抑制Wnt/β-catenin信号通路,在抑制宫颈癌的发生、发展中发挥潜在作用.因此,深入研究DKK3、Wnt/β-catenin信号通路与宫颈癌的关系,显得尤为重要.

摘要： 目的 探究地西他滨对胃癌AGS细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制.方法 本研究时间为2017年10月至2018年12月,采用地西他滨处理购自于中国科学院细胞库的胃癌AGS细胞,应用MTT法检测细胞增殖率,亚硫酸氢钠转化测序法检测APC基因启动子的甲基化程度,实时荧光定量PCR法检测APC基因mRNA的表达,Western blotting检测APC蛋白表达,细胞锚定非依赖性生长分析法和Transwell细胞侵袭法检测细胞的增殖和侵袭能力.结果 AGS细胞中,APC基因启动子高度甲基化((85.7±5.4)％);地西他滨处理AGS细胞后,细胞活力受到抑制,且呈浓度和时间依赖性.APC基因启动子去甲基化,mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05),5μM升高(2.3±0.1)倍,10μM升高(3.6±0.2)倍,25μM升高(4.1±0.1)倍,50μM升高(3.9±0.2)倍),增殖和侵袭能力均减弱(P<0.05),AGS组(290.3±5.7)个细胞,5μM为(213.2±6.7)个细胞,10μM为(160.4±7.3)个细胞,25μM为(145.8±6.2)个细胞,50μM为(119.2±8.6)个细胞).结论 地西他滨可以抑制AGS细胞的增殖和侵袭,表现出抗肿瘤活性,其相关机制可能为去除AGS细胞中APC基因的甲基化,恢复APC基因的表达.

摘要： 宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,其发病率和死亡率均较高.DKK3(dickkopf-3)是经典Wnt信号传导通路的拮抗因子,也是近年来发现的抑癌基因.DKK3通过调节β-catenin信号传导通路、逆转上皮-间质转化、抑制肿瘤血管生成等多种途径发挥抗肿瘤功能,是肿瘤治疗中的潜在靶点.基因的表观遗传修饰特别是启动子甲基化在多种恶性肿瘤的发生发展中发挥着非常重要的作用.DKK3基因启动子区的高甲基化是DKK3蛋白失活的重要原因,这使Wnt信号通路异常激活,从而导致肿瘤的发生.宫颈癌组织中DKK3表达常下调,且DKK3基因启动子甲基化导致的DKK3表达沉默是宫颈癌中的频发事件.DKK3的甲基化水平及表达水平与宫颈癌患者预后显著相关,有较好的预测作用.因此,深入研究DKK3与宫颈癌间的关系可能为宫颈癌的机制研究、靶向治疗及判断预后提供新的思路.

摘要： 肾母细胞瘤(WT)1基因位于人类染色体11p13,其编码的WT1具有抑制肿瘤生长与激活癌基因转录的双重功能,是一个双向转录因子.WT1基因在各类实体瘤和白血病,尤其急性髓细胞白血病(AML)中高表达.WT1基因高表达是影响AML患者预后的危险因素,通常提示患者难治或者复发风险高.WT1基因表达与白血病的发生、发展及患者预后密切相关.但是,WT1基因表达在白血病中的致癌性尚存在争议.一方面,WTJ基因表达是致癌因素,WTJ基因高表达导致白血病细胞易对化疗耐药,预示患者难治及易耐药、复发;另一方面,WT1基因可能仅在白血病细胞克隆增殖中阶段性表达,而非致癌因素.WT1基因表达在白血病发病、进展及耐药机制中作用的研究,对于探索白血病的新治疗策略具有重要指导意义.因此,笔者拟就目前WTI基因表达在白血病发病、进展及化疗耐药机制中作用的研究进展及争议进行综述.

摘要： 目的 分析微小核糖核酸(mi RNA) let-7c通过靶定细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)抑制肝癌细胞增殖的临床意义,并探讨其对肝癌细胞增殖的影响以及靶基因.方法 选取人低转移肝癌细胞-97L(MHCC-97L)、人高转移肝癌细胞(HCCLM3)、人肝癌组织(HepG2)、人肝癌细胞-7721(SMMC-7721)、人肝细胞L02、小鼠抗人细胞周期蛋白依赖激酶抗体等进行细胞培养,利用Western blot检测转染后小鼠CDK6表达情况,转染48 h后应用细胞裂解液对三组蛋白进行提取,将材料分为观察组、对照组、空白组,观察组转染let-7c,对照组转染阴性对照miRNA,空白组未进行转染处理;应用二喹啉甲酸法对各孔细胞蛋白浓度进行测定.结果 let-7c对肝癌细胞HCCLM3增殖结果显示,于450 nm处观察组、对照组转染后24h吸光度值差异无统计学意义(P＞0.05);转染48 h后观察组、对照组HCCLM3细胞中CDK6蛋白含量发生较大变化,观察组的CDK6蛋白表达量为(0.58±0.05),均低于对照组的(0.81 ±0.08)与空白组(0.85±0.09)(t=10.107、13.876,均P＜0.05);转染后72 h,观察组细胞处于G1期比例为(56.21±3.25)％,明显高于对照组的(45.21±1.56)％与空白组的(46.24±1.98)％,差异均有统计学意义(t=16.146、13.862,均P=0.000).结论 肝癌细胞中let-7c呈低表达,将let-7c上调可有效调控CDK6,从而抑制癌细胞生长,对肝癌细胞增殖具有明显的抑制作用.

摘要： 本发明涉及特别通过靶中肿瘤抑制基因的天然反义多核苷酸从而调节肿瘤抑制基因的表达和/或功能的反义寡核苷酸。本发明还涉及鉴定这些反义寡核苷酸以及它们在治疗与肿瘤抑制基因的表达相关的疾病和障碍中的用途。

摘要： 本发明涉及包含GM‑CSF基因、Flt3L‑TRAIL融合基因、抑制TGF‑β表达的shRNA和抑制HSP表达的shRNA的抗肿瘤组合物。

摘要： 本发明公开了培干扰素和原癌基因产物靶向抑制剂在协同治疗肿瘤中的应用。具体地，本发明提供了一种活性成分组合的用途，所述活性成分组合包括培(PEG)干扰素和原癌基因产物靶向抑制剂，并且所述组合用于制备协同治疗肿瘤的药物组合物。本发明活性成分组合能够有效地协同抑制肿瘤(尤其是肺癌、胃癌、乳腺癌、肝癌)的生长，并且可显著降低毒副作用，因此可在靶向治疗肿瘤中得到广泛应用。

摘要： 本发明属于生物医药领域，公开了特异性抑制肿瘤凋亡抑制基因Bcl2的双链不对称小核酸干扰分子asiRNA及其应用。所述的asiRNA是通过如下方法设计，并经化学合成得到的：从Bcl2基因对称性小核酸干扰分子siRNA出发，通过将siRNA正义链或反义链5’或3’端裁减1-5nt碱基，并于每条链3’端用两个脱氧核糖核酸dTdT突出的核苷酸，形成两条链碱基长度不一致，每条链3’端有两个脱氧核糖核酸dTdT呈单链悬挂，能诱发RNA干扰的双链不对称小核酸干扰分子asiRNA。本发明asiRNA较之常规的siRNA更加稳定，抑制Bcl2表达的活性更强，可在制备抗肿瘤药物中应用。

摘要： 本发明涉及特别通过靶中肿瘤抑制基因的天然反义多核苷酸从而调节肿瘤抑制基因的表达和/或功能的反义寡核苷酸。本发明还涉及鉴定这些反义寡核苷酸以及它们在治疗与肿瘤抑制基因的表达相关的疾病和障碍中的用途。

摘要： 本发明涉及特别通过靶中肿瘤抑制基因的天然反义多核苷酸从而调节肿瘤抑制基因的表达和/或功能的反义寡核苷酸。本发明还涉及鉴定这些反义寡核苷酸以及它们在治疗与肿瘤抑制基因的表达相关的疾病和障碍中的用途。

摘要： 本发明涉及包含GM‑CSF基因、Flt3L‑TRAIL融合基因、抑制TGF‑β表达的shRNA和抑制HSP表达的shRNA的抗肿瘤组合物。

摘要： 本发明公开了一种NY‑ESO‑1基因抑制剂在制备抑制肿瘤转移的药物中的应用，本发明所涉及的NY‑ESO‑1，是一个癌睾抗原，在正常组织里的表达严格限制在生殖系统，而在多种肿瘤中重新表达，是一个相对比较特异的肿瘤相关抗原。靶向抑制该抗原表达可以显著促进肿瘤细胞失巢凋亡、从而抑制肿瘤转移，是一个更安全有效的抗肿瘤转移策略。

摘要： 本发明属于生物医药领域，公开了特异性抑制肿瘤凋亡抑制基因Bcl2的双链不对称小核酸干扰分子asiRNA及其应用。所述的asiRNA是通过如下方法设计，并经化学合成得到的：从Bcl2基因对称性小核酸干扰分子siRNA出发，通过将siRNA正义链或反义链5’或3’端裁减1-5nt碱基，并于每条链3’端用两个脱氧核糖核酸dTdT突出的核苷酸，形成两条链碱基长度不一致，每条链3’端有两个脱氧核糖核酸dTdT呈单链悬挂，能诱发RNA干扰的双链不对称小核酸干扰分子asiRNA。本发明asiRNA较之常规的siRNA更加稳定，抑制Bcl2表达的活性更强，可在制备抗肿瘤药物中应用。

摘要： 本发明属于生物技术领域，提供一种VEGFB基因的应用及VEGFB肿瘤诱导和肿瘤抑制动物模型的构建方法。本发明公开了血管内皮生长因子VEGFB基因可以作为治疗多种癌症的靶基因，VEGFB过表达提供转基因小鼠癌症诱导模型，VEGFB敲除提供转基因小鼠癌症抑制模型，这两种转基因小鼠模型可以用于多种癌症致病机理的研究，也可以用于药物筛选和药效测试，更重要的是根据VEGFB敲除提供转基因小鼠癌症抑制模型对肿瘤的抑制效果和VEGFB脂肪组织过表达提供转基因小鼠癌症诱导模型促进肿瘤生长，开发针对VEGFB的抗癌药物。