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基于核酸适配体及胶体金可视化检测水中孔雀石绿

         
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cqvip:孔雀石绿(MG)是一种有毒的三苯甲烷类物质,由于其价格低廉,抑菌效果好,曾在水产养殖中被作为抑菌剂广泛使用。但是长期大量的使用孔雀石绿将会对人体产生致癌、致畸、致突变的危害。传统检测水中孔雀石绿的方法需要复杂的前处理,花费大量时间,且需要昂贵的仪器设备,技术难度高,因此发展一种快速简便的MG检测方法十分必要。核酸适配体是一种能与靶标分子特异性结合的DNA或RNA片段,它具有高特异性、高亲和力、易于化学合成和修饰、稳定性高等特点,是比抗体更为有潜力的靶标识别元素,目前被广泛应用于传感检测中。胶体金(AuNPs)具有高消光系数和表面等离子体共振现象,可用于可视化检测体系中。研究了一种基于胶体金和RNA适配体的可视化快速检测孔雀石绿的方法。当有盐(NaCl)存在时,AuNPs会受到盐的作用而发生团聚,其吸收光谱峰由520 nm处移到690 nm处,溶液颜色由红色变成蓝色。由于RNA适配体可以通过静电作用吸附在AuNPs表面,对AuNPs起到保护作用,可使AuNPs在盐溶液中不发生聚集而呈红色;而当体系中有MG存在时,由于MG与RNA适配体的特异性结合,使得RNA适配体从AuNPs表面脱离,游离的AuNPs遇盐发生聚集呈蓝色。随着MG浓度的升高,520 nm处吸光度值逐渐降低,690 nm处吸光度值逐渐升高,且溶液颜色逐渐由红色变为蓝色。因此,目标物MG的含量可通过肉眼观察溶液颜色或通过可见吸收光谱来确定,整个检测过程不超过1小时。以有或无MG时AuNPs于520及690 nm处吸光度比值的差值Δ(A690/A520)作为检测信号,发现在NaCl浓度为0.2 mol·L^-1、RNA浓度为10μmol·L^-1及AuNPs的浓度为7 nmol·L^-1时,MG浓度的线性范围为0.6~12.5μmol·L^-1[线性方程为Δ(A690/A520)=0.06c-0.01,R2为0.993],检出限为0.04μmol·L^-1(3α/κ,n=9)。该方法对MG检测具有良好的选择性,将此方法应用于养殖水样中孔雀石绿的检测,加标回收率为92%~108%,说明该方法能够准确、灵敏、快速检测水产养殖中的孔雀石绿。

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