摘要:本文以澳大利亚种源湿加松为试材,对其茎尖离体组织培养技术进行了系统研究,取2年生实生苗茎尖,通过腋芽诱导构建完整植株体系,研究了湿加松外植体消毒方法,基本培养基筛选,细胞分裂素6-BA、生长素NAA、蔗糖、光照强度、光照时间等外界因子对芽的诱导、增殖,伸长以及生根的影响·从2年生实生苗采集嫩枝,选择无木质化带芽茎尖,将其剪成2cm左右,用清水冲洗10min,然后在超净工作台上,放2滴土温-20用无菌水冲洗2次,用70%乙醇消毒10s,0.1%HECl2浸泡6.5min,消毒效果较好,无菌率达到89.2%.以GD+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖2%为基本培养基,在光照时间12h/d,光强40umoL/m2·s条件下培养,诱导率较高,芽的生长速度也较快.继代培养GD为基本培养基,随着继代次数的增加逐渐减少细胞分裂素6-BA浓度。最初继代,6-BA浓度1.0mg/L、0.5mg/L。然后6-BA浓度直接降到0.1mg/L,继代4-5次,芽的增殖系数可以达到3-4,培养期间无玻璃化和褐变现象。培养基、植物生长调节剂(NAA、IBA)对湿加松继代苗的诱导生根均有影响。以GD+蔗糖2%+IBA(0.1-0.3)mg/L为生根培养基,诱导效果较好,生根率可达45%。将诱导生根的组培苗,在自然光照下炼苗1周,然后移栽于草炭土和蛭石混合基质里(2:1,V/V),成活率可达80%,10d后苗高可伸长2cm。