摘要:为建立猪呼吸道病相关几种的病毒PCR/RT-PCR检测方法,本试验根据GenBank登录的猪伪狂犬病毒(PRV,gB,AF257079)、猪圆环2型病毒(PCV2,ORF2,NC 005148)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV,ORF6,NC 001961)、猪瘟病毒(CSFV,C,AY805221)、猪细小病毒(PPV,NS1,NC 001718)和猪流感病毒(SIV,M,GU086140)6种常见病毒的相关保守基因序列分别设计一对特异性引物,通过对其条件的优化,建立了检测以上6种病毒的PCR/RT-PCR诊断方法,扩增的目的片段长度分别为192 bp(PRV)、255bp(PCV2)、364bp (PRRSV)、530bp (CSFV)、759bp (PPV)和981 bp(SIV).通过实验证明该检测方法具有良好的特异性和敏感性,对该6种病毒的核酸检测最低浓度依次为2.5×10-3ng、2.2×10-4ng、3.2×10-3rng、8.3×10-3ng、3.7× 10-3ng和3.7×10-3ng.该方法的建立为检测以上6种病毒提供了有参考价值的方法.