一种富集鲨鱼肝油中烷氧基甘油的方法

技术领域

本发明涉及海洋生物技术领域，尤其涉及一种富集鲨鱼肝油中烷氧基甘 油的方法。

背景技术

烷氧基甘油（Alkoxyglycerols）是存在于人体细胞、体液、母乳以及骨 髓中的一种含醚键的脂质，其种类取决于烷基链的长度和不饱和度，常见的 烷氧基甘油的烷基链主要是C12:0（烷基链中含有12个碳原子并且不含有双 键）、C14:0（烷基链中含有14个碳原子并且不含有双键）、C16:0（烷基链 中含有16个碳原子并且不含有双键）、C16:1（烷基链中含有16个碳原子并 且含有一个双键）、C18:0（烷基链中含有18个碳原子并且不含有双键）和 C18:1（烷基链中含有18个碳原子并且含有一个双键）。烷氧基甘油作为一 种特殊的抗氧化剂，能够穿透细胞膜到达细胞内起到抗氧化的作用，而常规 的抗氧化剂如维生素C和维生素E等只能在细胞外起作用，烷氧基甘油的生 理功能还包括抗肿瘤、提高男性生殖能力和提高机体免疫力等。

天然的烷氧基甘油主要以二酰基烷氧基甘油的形式存在于鲨鱼肝脏脂质 中，也少量存在于其他海产动物如海星组织中，且不同种类的鲨鱼肝脏脂质 所含烷氧基甘油相差很大。天然鲨鱼肝油中烷氧基甘油最高的含量多在20% 左右，最少的则在5%以下。目前商品化的烷氧基甘油产品主要是烷氧基甘 油含量约20%的天然鲨鱼肝油产品，而烷氧基甘油含量低的鲨鱼肝油则没有 得到有效利用。

为了获得高含量的烷氧基甘油，通常的做法是先将鲨鱼肝油完全皂化， 提取其中的不皂化物后再经进一步纯化，所得产物为游离烷氧基甘油、胆固 醇和维生素E等的混合物，该方法通常需要耗费大量烧碱以及有毒、易挥发 的有机溶剂，产生的废水还会污染环境，除此之外，鲨鱼肝油中所含的对人 体有益的其他成分如n-3系列多不饱和脂肪酸（如二十碳五烯酸EPA和二十 二碳六烯酸DHA）也会以皂化物的形式被脱除，造成营养成分的浪费。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种新型的富集鲨鱼肝油中烷氧基甘 油的方法，其通过酶促醇解和分子蒸馏技术的联合使用以富集鲨鱼肝油中烷 氧基甘油，采用该方法无需消耗烧碱和有毒、易挥发的有机溶剂，不产生对 环境有害的废弃物，且能保留鲨鱼肝油中的天然n-3系列多不饱和脂肪酸， 防止营养成分的浪费。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种富集鲨鱼肝油中烷氧基甘油 的方法，其通过将鲨鱼肝油与短链醇、脂肪酶混合反应，去除未反应的原料 和副产物，获得烷氧基甘油的富集产物。

进一步，所述方法包括：

第一步，在反应器中加入鲨鱼肝油、短链醇和脂肪酶，搅拌均匀，加热 至一定的温度下继续搅拌反应；

第二步，将第一步反应后产物过滤，回收脂肪酶固体；

第三步，将第二步过滤后的产物减压蒸馏脱除未反应的短链醇；

第四步，将第三步获得的产物采用分子蒸馏的方法脱除反应过程中生成 的脂肪酸-短链醇酯副产物，获得烷氧基甘油的富集产物。

所述第一步中，反应温度为30～60℃，反应时间为4～72h，所述短链醇 的添加量为鲨鱼肝油质量的5%～100%，所述脂肪酶的添加量为鲨鱼肝油质量 的1%～15%。

所述短链醇为碳原子为1～4个的一元醇，优选甲醇、乙醇、丙醇、正丁 醇，进一步优选乙醇。

在第一步中，所述短链醇的加入方式可以为一次性加入，也可以在搅拌 过程中分批加入。

所述脂肪酶的来源很广，可以通过微生物发酵生产，也可以从动物胰脏 中提取，优选的脂肪酶为来源于酵母菌、霉菌或者动物胰脏的固定化或非固 定化脂肪酶。

本发明还提供了一种富集鲨鱼肝油中烷氧基甘油的方法，其包括：

第一步，在反应器中加入鲨鱼肝油、短链醇和脂肪酶，搅拌均匀，加热 至30～60℃的温度下搅拌反应4～72h，所述短链醇的添加量为鲨鱼肝油质量 的5%～100%，所述脂肪酶的添加量为鲨鱼肝油质量的1%～15%，所述短链醇 的加入方式可以为一次性加入，也可以在搅拌过程中分批加入；

第二步，将第一步反应后产物过滤，回收脂肪酶固体；

第三步，将第二步过滤后的产物减压蒸馏脱除未反应的短链醇；

第四步，将第三步获得的产物采用分子蒸馏的方法脱除反应过程中生成 的脂肪酸-短链醇酯副产物，获得烷氧基甘油的富集产物。

本发明还提供一种烷氧基甘油，其是通过如下方法制备而成的：

第一步，在反应器中加入鲨鱼肝油、短链醇和脂肪酶，搅拌均匀，加热 至一定的温度下继续搅拌反应；

第二步，将第一步反应后产物过滤，回收脂肪酶固体；

第三步，将第二步过滤后的产物减压蒸馏脱除未反应的短链醇；

第四步，将第三步获得的产物采用分子蒸馏的方法脱除反应过程中生成 的脂肪酸-短链醇酯副产物，获得烷氧基甘油的富集产物。

本发明还提供了上述的富集鲨鱼肝油中烷氧基甘油的方法在制备保健产 品中的应用。

本发明还提供了一种保健产品，其包括上述方法制备而成的烷氧基甘油 的富集产物。

有益效果

本发明提供的新型的富集鲨鱼肝油中烷氧基甘油的方法，其通过酶促醇 解和分子蒸馏技术的联合使用以富集鲨鱼肝油中烷氧基甘油，采用该方法无 需消耗烧碱和有毒、易挥发的有机溶剂，不产生对环境有害的废弃物，且能 保留鲨鱼肝油中的天然n-3系列多不饱和脂肪酸，防止营养成分的浪费。

具体实施方式

本发明提供了一种富集鲨鱼肝油中烷氧基甘油的方法，其通过将鲨鱼肝 油与短链醇、脂肪酶混合反应，去除未反应的原料和副产物，获得烷氧基甘 油的富集产物。

进一步，所述方法包括：

第一步，在反应器中加入鲨鱼肝油、短链醇和脂肪酶，搅拌均匀，加热 至一定的温度下继续搅拌反应；

第二步，将第一步反应后产物过滤，回收脂肪酶固体；

第三步，将第二步过滤后的产物减压蒸馏脱除未反应的短链醇；

第四步，将第三步获得的产物采用分子蒸馏的方法脱除反应过程中生成 的脂肪酸-短链醇酯副产物，获得烷氧基甘油的富集产物。

所述第一步中，反应温度为30～60℃，反应时间为4～72h，所述短链醇 的添加量为鲨鱼肝油质量的5%～100%，所述脂肪酶的添加量为鲨鱼肝油质量 的1%～15%。

所述短链醇为碳原子为1～4个的一元醇，优选甲醇、乙醇、丙醇、正丁 醇，进一步优选乙醇。

在第一步中，所述短链醇的加入方式可以为一次性加入，也可以在搅拌 过程中分批加入。

所述脂肪酶优选来源于酵母菌、霉菌或者动物胰脏的固定化或非固定化 脂肪酶。

所述第三步中的减压蒸馏条件为常规技术，其采用常规条件即可，优选 为减压蒸馏温度为40～80℃，真空度为-0.070Mpa～-0.095Mpa。

所述第四步中的分子蒸馏脱除技术为常规技术，采用其常规条件即可， 优选为分子蒸馏的条件为：蒸馏温度130～180℃，蒸馏压力为0.1Pa～100Pa。

本发明还提供了一种富集鲨鱼肝油中烷氧基甘油的方法，其包括：

第一步，在反应器中加入鲨鱼肝油、短链醇和脂肪酶，搅拌均匀，加热 至30～60℃的温度下搅拌反应4～72h，所述短链醇的添加量为鲨鱼肝油质量 的5%～100%，所述脂肪酶的添加量为鲨鱼肝油质量的1%～15%，所述短链醇 的加入方式可以为一次性加入，也可以在搅拌过程中分批加入；

第二步，将第一步反应后产物过滤，回收脂肪酶固体；

第三步，将第二步过滤后的产物减压蒸馏脱除未反应的短链醇；

第四步，将第三步获得的产物采用分子蒸馏的方法脱除反应过程中生成 的脂肪酸-短链醇酯副产物，获得烷氧基甘油的富集产物。

本发明还提供一种烷氧基甘油，其是通过如下方法制备而成的：

第一步，在反应器中加入鲨鱼肝油、短链醇和脂肪酶，搅拌均匀，加热 至一定的温度下继续搅拌反应；

第二步，将第一步反应后产物过滤，回收脂肪酶固体；

第三步，将第二步过滤后的产物减压蒸馏脱除未反应的短链醇；

第四步，将第三步获得的产物采用分子蒸馏的方法脱除反应过程中生成 的脂肪酸-短链醇酯副产物，获得烷氧基甘油的富集产物。

所述第一步中，反应温度为30～60℃，反应时间为4～72h，所述短链醇 的添加量为鲨鱼肝油质量的5%～100%，所述脂肪酶的添加量为鲨鱼肝油质量 的1%～15%。

所述短链醇为碳原子为1～4个的一元醇，优选甲醇、乙醇、丙醇、正丁 醇，进一步优选乙醇。

在第一步中，所述短链醇的加入方式可以为一次性加入，也可以在搅拌 过程中分批加入。

所述脂肪酶的来源很广，可以通过微生物发酵生产，也可以从动物胰脏 中提取，优选的脂肪酶为来源于酵母菌、霉菌或者动物胰脏的固定化或非固 定化脂肪酶。

本发明以生物酶为催化剂，反应条件温和；由于脂肪酶对脂肪酸的选择 性，使得短链的饱和脂肪酸及低不饱和度的脂肪酸优先与短链醇发生反应， 在富集烷氧基甘油的同时起到富集n-3多不饱和脂肪酸的作用，反应过程避 免使用大量的有毒、易挥发溶剂，而未反应的短链可通过减压蒸馏实现回收， 整个工艺过程无固体和液体废弃物的排放。

以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用 技术手段来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实 施。

实施例1

称取含8%烷氧基甘油的天然鲨鱼肝油100g（EPA和DHA含量分别为 4.13%和7.59%）于250mL反应器中，加入40g无水乙醇和固定化南极假丝 酵母脂肪酶Lipozyme435（Novozymes公司提供)3.0g，加热至50℃并搅拌 反应24h。反应结束后将反应混合物过滤，所得油状混合物经减压蒸馏（70℃、 -0.088MPa的条件下）脱除未反应的乙醇，再经分子蒸馏（蒸馏温度150℃、 蒸馏压强0.1Pa的条件下）脱除反应混合物中的脂肪酸乙酯，即得含20.59% 烷氧基甘油的产物40g，产物中的EPA和DHA含量分别为7.72%和22.35%。

实施例2

称取含20%烷氧基甘油的鲨鱼肝油50g（EPA和DHA含量分别为0.93% 和2.59%）与30g无水异丙醇混合搅拌预热至45℃，加入2.5g固定化脂肪酶 Lipozyme TL IM（Novozymes公司提供），搅拌反应12h。反应结束后将反 应混合物过滤，所得油状混合物经减压蒸馏（70℃、-0.088MPa的条件下） 脱除未反应的异丙醇，再经分子蒸馏（蒸馏温度160℃、蒸馏压强0.1Pa的条 件下）脱除反应混合物中的脂肪酸异丙醇酯，即可得到含36.62%烷氧基甘油 的产物，其EPA和DHA的含量分别为1.34%和8.21%。

所有上述的首要实施这一知识产权，并没有设定限制其它形式的实施这 种新产品和/或新方法。本领域技术人员将利用这一重要信息，上述内容修改， 以实现类似的执行情况。但是，所有修改或改造基于本发明新产品属于保留 的权利。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式 的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更 或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依 据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型， 仍属于本发明技术方案的保护范围。