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一种乳腺癌MCF‑7细胞干细胞悬浮球的培养方法

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本发明公开了一种乳腺癌MCF‑7细胞干细胞悬浮球的培养方法,包括以下步骤：1）、收集对数生长期的人乳腺癌MCF‑7细胞，铺满75%～83%培养瓶，用0.25%质量分数的胰酶消化细胞至细胞变圆，倒弃胰酶；2）、加入用DMEM/H‑G完全培养液终止反应，用滴管吹打成为单细胞悬液，1000转/分钟离心，5分钟，弃上清，调整细胞浓度，按 1:3分瓶传代；3）、将传代后的MCF‑7细胞重悬于不含血清的DMEM/F‑12培养基，调整细胞的浓度为0.5×105 /mL，置于青霉素玻璃瓶中，盖紧瓶塞，制造缺氧环境，在37℃、5％CO2条件下培养，不置换培养基，待微球囊形成后，机械吹打为单细胞悬液，常规传代。本发明采用无氧培养法培养乳腺癌MCF‑7细胞干细胞悬浮球，培养的第二天即出现明显的悬浮生长的球形细胞团。

著录项

公开/公告号CN106676073A

专利类型发明专利
公开/公告日2017-05-17

原文格式PDF
申请/专利权人大连医科大学附属第一医院;
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申请/专利号CN201710046574.6
发明设计人张斌;张霞;王艺茜;张伟国;宋蔚;董岩;杜福强;
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申请日2017-01-19
分类号C12N5/095(20100101);C12N5/02(20060101);
代理机构43205 长沙星耀专利事务所;
代理人许伯严
地址 116000 辽宁省大连市沙河口区联合路193号
入库时间 2023-06-19 02:09:24

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2017-06-09

实质审查的生效 IPC(主分类):C12N5/095 申请日:20170119

实质审查的生效
2017-05-17

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