聚合酶链反应技术

摘要： 目的 探讨常规湿片与聚合酶链反应技术(PCR)在阴道毛滴虫检测中的应用价值.方法 选取2018年1月至2019年6月本院收治的疑似阴道毛滴虫感染患者200例作为研究对象,分别应用常规湿片与PCR检测,并采用PCR技术扩增滴虫目的基因,后行琼脂糖凝胶电泳,依据扩增与电泳结果判断PCR诊断阴道毛滴虫感染的有效性.通过于其他常见阴道微生物PCR结果比较,判断设计引物具备的特异性;依据模板DNA的稀释倍数判断引物的敏感性.结果 本研究中,测序检测阳性80例,阴性120例,常规湿片检查检出阳性45例,PCR检查检出阳性79例,漏诊1例.PCR检测毛滴虫阳性率高于常规湿片检查,差异具有统计学意义(χ2=16.854,P<0.05);以阴道常见微生物DNA作为模板扩增结果均呈阴性;滴虫DNA稀释1000倍后仍可见明显扩增.结论 阴道毛滴虫检测中PCR的应用效果较好,具备较高的特异性与敏感度,可作为批量检测的常用方法.

摘要： 聚合酶链反应技术的广泛应用使得基因诊断逐渐成为了医学检验学最常用的技术之一,我国引入PCR技术的时间较短,在初期使用阶段出现了较为严重的问题,以至于一段时间内暂停使用该技术,经历了一段较为曲折的发展历程.本机对PCR技术对医学检验中的应用价值做了介绍,并探究了PCR技术在医学检验中的具体应用.

摘要： 目的:分析聚合酶链反应技术在乙型肝炎诊断和治疗中的作用.方法:筛选80例本院2019年2月-2020年1月收治的乙型肝炎患者进行研究.采用聚合酶链反应技术对患者进行乙肝标志物及HBV-DNA检测.对比分析聚合酶链反应技术在乙肝诊断以及治疗中的应用价值.结果:与小三阳以及HBsAg(+)HBcAb(+)患者HBV-DNA阳性检出率相比,大三阳患者检出率更高(P<0.05).重型肝炎患者血清HBV-DNA平均含量较之其他分型更高(P<0.05).结论:采用聚合酶链反应技术进行乙型肝炎的诊断,可明确区分大三阳、小三阳,并对疾病严重程度进行分析,为临床诊疗提供详实的诊断依据.

摘要： 聚合酶链反应技术实际上是一种基因技术,但和一般我们之前所说的基因技术不同的是,它是一种扩增体外基因技术,又可以被称作是体外扩增DNA技术。聚合酶链反应技术能够通过fg到μg的延伸,在体外快速放大试验所需要的基因或者、DNA片段,为医学实验的顺利性和便利度提供了一定的帮助,而且在紫外灯的照射下还能够帮助实验者清晰地观察到整个DNA片段扩张的过程,实现了实验的可延续性提升。

摘要： 目的 观察解脲支原体感染与盆腔炎的关系,为临床诊断和治疗提供依据.方法 选取2015年3月至2018年3月在潮州市中心医院妇科进行治疗的盆腔炎患者280例,采集患者宫颈分泌物,运用聚合酶链反应技术扩增解脲支原体MB抗原基因,并进行统计分析.结果 280例患者中检测解脲支原体阳性共172例(阳性组),占61.43％,阴性108例(阴性组).其中25～35岁所占比例最高,为50.6％(87/172);阳性组患者合并阴道炎、慢性宫颈炎、不孕症的比例分别为41.86％、49.42％和16.86％,阴性组患者合并阴道炎、慢性宫颈炎、不孕症的比例分别为29.63％、37.04％和8.33％,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 解脲支原体已经成为引起盆腔炎的主要病原体,感染多集中于25～35岁,更容易引起患者出现阴道炎、慢性宫颈炎、不孕症,临床上应引起足够的重视.

摘要： 目的 检测半乳糖凝集素3(Galectin-3)基因在眼部静脉畸形组织中的表达,探讨其与眼部静脉畸形发生和进展的关系.方法 收集12例新鲜眼部静脉畸形组织标本为静脉畸形组,12例单纯性大隐静脉曲张组织近端正常静脉组织标本为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应技术(Real-time PCR)和Western Blot检测Galectin-3的表达.结果 静脉畸形组和对照组Galectin-3mRNA及蛋白的相对表达量分别为5.26×10-3±8.78×10-4、4.89×10-4±5.37×10-5和0.861+0.394、0.223+0.206;眼部静脉畸形组织中Galectin-3 mRNA及蛋白水平上的表达量明显高于对照组(P<0.05),并随着病变侵及深度及范围的加重有递增的趋势.结论 Galectin-3 mRNA及蛋白在眼部静脉畸形组织中呈高表达,可能与静脉畸形局部侵袭发生发展和预后密切相关,可用于判断眼部静脉畸形的局部侵犯程度.眼部静脉畸形的发病机制可能与Galectin-3基因的参与有关,待通过基因芯片等技术进行更深入地研究.%Objective To detect the expression level of Galectin-3 in the ocular Venous Malformation (VM) tissue, and explore its associations with the occurrence and development of ocular VM. Methods 12 fresh ocular VM tissue samples and 12 simplex great saphenous vein varices tissue samples were collected. The mRNA and protein expression levels of Galectin-3 gene were detected by RT-PCR and Western Blot. Results The relative mRNA and protein levels of Galectin-3 in VM and control group were 5. 26 ×10 -3 ±8. 78 ×10 -4 , 4. 89 × 10 -4 ± 5. 37 × 10 -5 and 0. 861 ± 0. 394, 0. 223 ± 0. 206, respectively;Galectin-3 expressions in both mRNA and protein levels in ocular VM tissue were obviously higher than those in control group (P <0. 05), and an increasing trend was accompanied with aggravating pathological changes in both degree and range of ocular VM. Conclusions Galectin-3 is highly expressed in ocular VM tissue in both mRNA and protein levels, which may be closely related to ocular VM development and prognosis, and can be used to determine the degree of local invasion of ocular VM. The pathogenesis of ocular VM may be related to Galectin-3, which can be further investigated through gene chip techniques.

摘要： 目的 分析在乙型肝炎检验中应用聚合酶链反应(PCR)技术的效果.方法 200例乙型肝炎患者,根据随机抽签法分为观察和对照组,各100例.对照组通过化学发光法进行检验,观察组选择PCR技术进行检验,比较两种方法 的诊断准确率.结果 观察组诊断准确率为96%,对照组诊断准确率为81%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 PCR技术对于乙型肝炎具有较高的诊断准确率,能够准确检出乙型肝炎病毒,值得广泛应用.

摘要： 2017年9月14-15日,首届上海市医疗机构数字PCR技术培训班顺利召开.此次培训班由上海市临床检验中心联合中国医师协会检验医师分会分子诊断专家委员会、中华医学会检验分会管理学组共同主办.培训班设置理论知识培训和实验技能培训两部分,共有102名来自上海及周边地区医疗机构及医学检验实验室的学员参加.

摘要： 目的:客观评价几种不同检验方法用于阴道细菌检验的临床效果,寻找提升阴道细菌检验精确性的检验手段。方法:以随机法选择该院2013年07月至2015年07月接收的50例阴道炎患者,在对其阴道内的分泌物进行采集的基础上,选择聚合酶链反应技术检测法、革兰氏染色方法以及细菌培养方法予以检验,观察所有入选患者的检验结果,并对各项数据进行客观比较。结果:上述入选患者中,聚合酶链反应技术检测法(a组)检出率是76.00%,革兰氏染色方法(b组)检出率是38.00%,细菌培养方法(c组)检出率是80.00%,a组与c组之间没有较大差异(P>0.05),b组与c组之间有差距(P<0.05),a组与b组之间同样有差距(P<0.05)。结论:对于阴道炎患者,选择聚合酶链反应技术检测法予以检验不仅敏感性较高,而且有较高特异性,加之操作程序便捷、简单,可推广。

摘要： 采用PCR方法对甘蔗植株不同生长时期(幼苗期、分蘖期、拔节期、成熟期)、同一植株的不同叶片及同一叶片的不同部位分别取样进行宿根矮化病检测,结果表明在不同甘蔗生长时期常规PCR方法都可以检测出宿根矮化病阳性植株;对呈阳性植株的不同叶片及同一叶片的不同部位(叶尖部、叶中部、叶基部)进一步检测均呈阳性,表明被检测甘蔗品种植株不同位置叶片对甘蔗宿根矮化病检测效率影响差异不明显.

摘要： 采用PCR方法对甘蔗植株不同生长时期(幼苗期、分蘖期、拔节期、成熟期)、同一植株的不同叶片及同一叶片的不同部位分别取样进行宿根矮化病检测,结果表明在不同甘蔗生长时期常规PCR方法都可以检测出宿根矮化病阳性植株;对呈阳性植株的不同叶片及同一叶片的不同部位(叶尖部、叶中部、叶基部)进一步检测均呈阳性,表明被检测甘蔗品种植株不同位置叶片对甘蔗宿根矮化病检测效率影响差异不明显.

摘要： 采用PCR方法对甘蔗植株不同生长时期(幼苗期、分蘖期、拔节期、成熟期)、同一植株的不同叶片及同一叶片的不同部位分别取样进行宿根矮化病检测,结果表明在不同甘蔗生长时期常规PCR方法都可以检测出宿根矮化病阳性植株;对呈阳性植株的不同叶片及同一叶片的不同部位(叶尖部、叶中部、叶基部)进一步检测均呈阳性,表明被检测甘蔗品种植株不同位置叶片对甘蔗宿根矮化病检测效率影响差异不明显.

摘要： 采用PCR方法对甘蔗植株不同生长时期(幼苗期、分蘖期、拔节期、成熟期)、同一植株的不同叶片及同一叶片的不同部位分别取样进行宿根矮化病检测,结果表明在不同甘蔗生长时期常规PCR方法都可以检测出宿根矮化病阳性植株;对呈阳性植株的不同叶片及同一叶片的不同部位(叶尖部、叶中部、叶基部)进一步检测均呈阳性,表明被检测甘蔗品种植株不同位置叶片对甘蔗宿根矮化病检测效率影响差异不明显.

摘要： 采用定量PCR技术研究了山羊激活素A型受体在不同山羊品种的心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、卵巢和垂体7个组织中的表达情况.研究发现:ACTRA在不同品种山羊的心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、卵巢和垂体中都有表达.ACTRⅠA和ACTRⅡA在肾脏中含量最高,心、肺中含量最低;各组织中ACTRⅠA与ACTRⅡA呈极显著正相关(P＜0.01).萨能奶山羊ACTRⅠA含量极显著高于南江黄羊及大足黑山羊(P＜0.01),南江黄羊、大足黑山羊与萨能奶山羊各组织中ACTRⅡA含量差异均不显著(P＞0.05).繁殖力较低的萨能奶山羊卵巢ACTRⅡA与ACTRⅠA比值显著低于高繁殖力山羊.

摘要： 采用定量PCR技术研究了山羊激活素A型受体在不同山羊品种的心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、卵巢和垂体7个组织中的表达情况.研究发现:ACTRA在不同品种山羊的心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、卵巢和垂体中都有表达.ACTRⅠA和ACTRⅡA在肾脏中含量最高,心、肺中含量最低;各组织中ACTRⅠA与ACTRⅡA呈极显著正相关(P＜0.01).萨能奶山羊ACTRⅠA含量极显著高于南江黄羊及大足黑山羊(P＜0.01),南江黄羊、大足黑山羊与萨能奶山羊各组织中ACTRⅡA含量差异均不显著(P＞0.05).繁殖力较低的萨能奶山羊卵巢ACTRⅡA与ACTRⅠA比值显著低于高繁殖力山羊.

摘要： 采用定量PCR技术研究了山羊激活素A型受体在不同山羊品种的心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、卵巢和垂体7个组织中的表达情况.研究发现:ACTRA在不同品种山羊的心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、卵巢和垂体中都有表达.ACTRⅠA和ACTRⅡA在肾脏中含量最高,心、肺中含量最低;各组织中ACTRⅠA与ACTRⅡA呈极显著正相关(P＜0.01).萨能奶山羊ACTRⅠA含量极显著高于南江黄羊及大足黑山羊(P＜0.01),南江黄羊、大足黑山羊与萨能奶山羊各组织中ACTRⅡA含量差异均不显著(P＞0.05).繁殖力较低的萨能奶山羊卵巢ACTRⅡA与ACTRⅠA比值显著低于高繁殖力山羊.

摘要： 采用定量PCR技术研究了山羊激活素A型受体在不同山羊品种的心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、卵巢和垂体7个组织中的表达情况.研究发现:ACTRA在不同品种山羊的心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、卵巢和垂体中都有表达.ACTRⅠA和ACTRⅡA在肾脏中含量最高,心、肺中含量最低;各组织中ACTRⅠA与ACTRⅡA呈极显著正相关(P＜0.01).萨能奶山羊ACTRⅠA含量极显著高于南江黄羊及大足黑山羊(P＜0.01),南江黄羊、大足黑山羊与萨能奶山羊各组织中ACTRⅡA含量差异均不显著(P＞0.05).繁殖力较低的萨能奶山羊卵巢ACTRⅡA与ACTRⅠA比值显著低于高繁殖力山羊.

摘要： 聚合酶链反应（PCR)检测技术对样本、实验试剂、器材、环境、操作人员等有着严格要求，为了保证检测结果的准确性和可信性，必须对PCR实验室的常规运作进行全面的质量控制，文章对此从实验室的功能分区、实验室人员的数量及要求、试剂的使用及质控等方面进行了概述。

摘要： 聚合酶链反应（PCR)检测技术对样本、实验试剂、器材、环境、操作人员等有着严格要求，为了保证检测结果的准确性和可信性，必须对PCR实验室的常规运作进行全面的质量控制，文章对此从实验室的功能分区、实验室人员的数量及要求、试剂的使用及质控等方面进行了概述。

摘要： 本发明涉及一种基于纳米粒子的不对称PCR技术，其中所用的非限制性引物是基于纳米粒子的PCR引物，它具有下式结构：Z-(X)n；其中X表示长度为10-100碱基的单链寡核苷酸引物，而Z表示平均粒径为1-100nm的固体粒子，而“-”表示X和Z之间的共价键，n为1-1000的整数。本发明还涉及基于纳米粒子的不对称聚合酶链反应。本发明可极其简单、快速和高效地制备和分离单链DNA扩增产物。

摘要： 本发明涉及一种聚合酶链反应过程非线性混杂系统建模方法，所述方法针对PCR酶促反应体系的变性阶段、退火阶段和延伸阶段进行建模，建立带有参数v的非线性混杂系统P，这个模型是DNA反应液内的各组分相互作用的DNA聚合酶链反应模型P,其以为模板DNA的浓度、引物的浓度、DNA聚合酶的浓度、聚合酶的激活剂Mg2+的浓度等为状态变量的非线性方程，本发明用数理方程描述这个复杂多变的反应动态过程，建立的模型实用性强，满足对DNA扩增过程的研究需求。

摘要： 本发明提供一种利用TaqMan探针以及肽核酸(PNA)探针的在单一荧光通道聚合酶链反应设备(PCR machine)中的多重核酸检测方法。本发明能够在混合使用设计为较低熔解温度(Tm)的肽核酸(PNA)探针以及TaqMan探针时在单一荧光通道聚合酶链反应设备(PCR machine)中同时对2个基因进行检测，因此能够节省购买高价的多通道聚合酶连锁反应设备(PCR machine)所需要的费用支出，从而实现良好的经济性能。

摘要： 本发明涉及在PCR产物的末端上互补结合探针的情况下，利用抑制DNA聚合酶的5'‑瓣状内切核酸酶(FEN)活性的特性来检测单核苷酸多态性(SNP)的方法。更具体地涉及将实时聚合酶链反应(real‑time PCR)中使用的探针与PCR产物末端进行互补结合的情况下，确认抑制针对探针的耐热性DNA聚合酶的5'‑瓣状内切核酸酶活性的特性，并利用其特性来使待检测的单核苷酸多态性(SNP)部位位于探针的5'‑末端部位时，根据等位基因(allele)来诱导5'‑瓣状的形成，从而可有效地检测单核苷酸多态性(SNP)的方法。

摘要： 本发明涉及一种基于纳米粒子的不对称PCR技术，其中所用的非限制性引物是基于纳米粒子的PCR引物，它具有下式结构：Z－(X)n；其中X表示长度为10－100碱基的单链寡核苷酸引物，而Z表示平均粒径为1－100nm的固体粒子，而“－”表示X和Z之间的共价键，n为1－1000的整数。本发明还涉及基于纳米粒子的不对称聚合酶链反应。本发明可极其简单、快速和高效地制备和分离单链DNA扩增产物。

摘要： 提供了用于核酸聚合酶链反应(PCR)的热循环装置。第一浴槽(50)和第二浴槽(51)中的浴槽介质(75)被保持在两种不同的温度。转移装置(85)让反应器(15)在多个热循环中处于两个浴槽(50、51)之中以交替地达到预定的高目标温度THT和预定的低目标温度TLT。荧光成像装置在热循环期间为反应材料(21)进行成像。当至少一个浴槽(50、51)中所使用的浴槽介质(75)是粉末(76)时，粉末清洁装置(20)就以机械方式去除附着在反应器(15)上的粉末(76)颗粒。

摘要： 本发明公开了一种微滴式数字聚合酶链反应芯片，属于数字PCR芯片领域，包括相连的芯片本体和收集管，芯片本体内设置有流向收集管的浊相通道以及汇聚于浊相通道入口的油相通道和水相通道，浊相通道按乳液流经次序分为曲流道和直流道，芯片本体顶面设置有油相通道入口、水相通道入口、经直流道直通收集管的吸出口和与曲流道相贯的热熔柱入口，该芯片既能生成乳液，也能加热加压扩增，油相和水相分别经油相通道和水相通道进入浊相通道中混合，流入收集管中，扩增时能利用热熔柱隔断浊相通道，隔离生成乳液的部分，便于扩增时加热、加压，不会导致溶液向外蒸发，减少热量向外散失，在扩增完成后能直接从吸出口将溶液吸出，有利于后续检测准确。

摘要： 本发明公开了一种一体化聚合酶链反应检测装置，包括平板反应器、进样杆和检测棒，平板反应器包括平板本体和密封膜，平板本体上开设有反应槽，反应槽上分别开设有进样孔和出样孔，密封膜密封反应槽形成反应腔，进样杆包括进样杆本体，进样杆本体一端开设有样本仓，检测棒包括检测棒本体，检测棒本体上开设有试纸槽，进样杆本体和检测棒本体分别与平板本体转动连接，当进样杆本体旋转至连通位置时，样本仓与进样孔连通，当进样杆本体旋转至隔绝位置时，样本仓与进样孔不连通，当检测棒本体旋转至连通位置时，试纸槽与出样孔连通，当检测棒本体旋转至隔离位置时，试纸槽与出样孔不连通。该装置结构简单，整合度高，将聚合酶链反应和检测整合在一起。

摘要： 本发明涉及一种系统，所述系统可以包括水平致动器以使托盘运动，所述托盘可以耦接微孔板和微流体芯片。所述系统可以包括竖直致动器以使支撑臂运动，所述支撑臂可以耦接多个移液器或移液器尖端。所述系统可以包括旋转致动器以使角支架运动，所述角支架可以耦接磁体。所述系统可以包括加热器，移液器可以延伸通过所述加热器。所述系统可以包括泵以控制通过移液器的流体的流动。所公开的方法包括在所述系统内执行PCR。

摘要： 本申请提供了一种聚合酶链反应分析仪无线温度校准装置，属于聚合酶链反应分析仪温度校准技术领域。该聚合酶链反应分析仪无线温度校准装置包括箱体组件和放置组件，当分析仪本体使用完成后，可以转动双向螺杆，第一连接块和第二连接块向着相反的方向进行移动，当第一连接块和第二连接块向着相反的方向进行移动时可以控制交叉升降件交叉的角度，以此可以对底板下降，直至分析仪本体完全进入到壳体内部，随后可以抬起盖板，推动盖板直至将壳体完全盖住，当需要再次使用时，可以打开盖板，向着相反的方向转动双向螺杆，将分析仪本体移出壳体，进而增加了防护装置，不需要来回搬运，省时省力，从而提高了实用性。