摘要:
目的 观察温肾填精方及其拆方对肾阳虚证不孕小鼠生殖功能的影响。方法 采用冰羟基脲灌胃法制备肾阳虚不孕小鼠模型,中药干预15 d后灌胃给予PMSG 5 IU+HCG 5 IU进行超促排卵,合笼观察子代,计算获卵数,检测血清cAMP、cGMP、ATP、NO水平,JC-1荧光染色后用激光共聚焦显微镜观察卵母细胞ΔΨm, HE染色观察卵巢各级卵泡数,RT-qPCR检测卵母细胞Mfn1、OPA1、Drp1、Fis1 mRNA表达。结果 与自然周期组、促排对照组比较,阳虚模型组小鼠无法产出子代,获卵数减少,异常卵增加(P<0.05,P<0.01);血清cAMP、ATP水平降低,cGMP、NO水平升高(P<0.05,P<0.01);卵母细胞ΔΨm降低,卵巢原始卵泡减少,闭锁卵泡增加(P<0.05,P<0.01);卵母细胞Mfn1、OPA1 mRNA表达降低,Drp1、Fis1 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。与阳虚模型组比较,各中药组小鼠受孕结局均有所改善;其中资冲颗粒组NO水平最低,异卵数最少(P<0.05);温肾填精颗粒组ΔΨm,原始卵泡数最高(P<0.05),闭锁卵泡数最少。结论 温肾填精复方及其拆方均可不同程度纠正肾阳虚不孕小鼠生殖功能。与拆方比较,复方在调节小鼠卵母细胞线粒体动力学状态方面更优,可恢复线粒体功能,增强能量代谢,最终提升卵母细胞质量,改善卵巢储备,增加受孕率。