产单核细胞李斯特菌

摘要： 目的报告1例急性B淋巴细胞白血病与淋巴母细胞淋巴瘤合并产单核李斯特菌血流感染及脑膜炎感染经治疗失败的病例,总结经验教训,以提高临床对此类感染的诊治水平。方法曲靖市第二人民医院于2021年5月17日收治1例急性B淋巴细胞白血病/淋巴母细胞淋巴瘤化疗患者,血培养检出产单核细胞李斯特菌,诊断为血源性感染导致细菌性脑膜炎,患者经治疗无效死亡。结果患者为58岁男性,因急性B淋巴细胞白血病/淋巴母细胞淋巴瘤接受VDP方案化疗,2021年4月27日化疗结束后复查骨髓穿刺涂片正常,病情评估为持续完全缓解(CR)出院。5月17日患者因“头痛2 d,发热1 d”再次入院,血培养检出产单核李斯特菌;药敏试验结果显示菌株对复方新诺明、青霉素、美罗培南、氨苄青霉素敏感;脑脊液标本二代基因测序(NGS)检出产单核李斯特菌。诊断为合并产单核细胞李斯特菌血源性感染及李斯特菌脑膜炎,经先后使用青霉素、氨苄青霉素治疗,效果欠佳,患者于5月27日16:33死亡。结论临床针对李斯特菌的治疗首选青霉素、氨苄青霉素,但对李斯特菌脑膜炎患者应考虑到血脑屏障对治疗药物的影响,因此,选择美罗培南联合使用可能会起到更好的治疗效果。

摘要： cqvip:李斯特菌属共有7个亚型,其中产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是唯一能引起人类疾病者,是人畜共患病的病原菌[1]。孕妇及其新生儿感染LM后临床表现为菌血症、脑膜脑炎、颅内脓肿、脑膜炎、流产、死产等,起病急、进展快,尤其新生儿病情重且病死率高[2],但国内新生儿LM病报道较少。因此,提高对LM的认识,将有助于减少LM的漏诊或误诊,以便早期治疗和提高预后。

摘要： 目的:探究妊娠晚期产单核细胞李斯特菌菌血症1例并文献复习.方法:回顾性分析2021年3月收入1例妊娠晚期产单核细胞李斯特菌菌血症患者,分析患者一般资料,总结其临床特点.结果:本例患者妊娠晚期合并产单核细胞李斯特菌菌血症,病情发展初期及时终止妊娠,顺利娩出一男婴,产后经检验确诊予以对症治疗,病情好转,顺利出院.结论:妊娠期李斯特菌起病急,妊娠不良结局发生率高,经验性抗菌药物覆盖率偏低,医师需及时诊断并明确处理,保障母婴健康,减少不良事件发生.

摘要： 目的 分析围产期李斯特菌感染6例的临床及其分子流行特征,为围产期李斯特菌感染的治疗、预防和控制提供参考依据.方法 回顾性分析李斯特菌母婴感染病例的临床信息,对分离的病原菌进行血清学分型、脉冲场凝胶电泳分析、多位点序列分型及毒力基因检测.结果 6例孕妇出现发热、腹痛、胎动异常等症状;2例胎死宫内,4例新生儿出现胃肠炎、血流感染和脑膜炎等感染症状,其中1例新生儿出生2d后死亡.6株产单核细胞李斯特菌有3种血清型(4b、1/2b和1/2a)、4种ST型(ST1、ST2、ST5和ST91)和5种PT型(pulsotype).毒力基因(plcB、actA、hly、iap、prfA、inlA)检测均为阳性.结论 6例围产期李斯特菌感染病例症状较为严重,胎儿/新生儿预后差.分离的产单核细胞李斯特菌以血清型4b型和ST2型为主,携带6个毒力基因,致病力强.

摘要： 本文利用PCR技术从血清型1/2a的产单核细胞李斯特菌Lm-4株中扩增出actA基因,经克隆筛选和测序鉴定后,构建成该基因的原核表达载体pGEX-6P-1-actA及pET-actA,转入终宿主菌E.coli后,IPTG诱导目的蛋白的表达.SDS-PAGE电泳结果表明,actA基因在两种载体中均获得表达,融合蛋白的大小分别约为120KD和97KD.以纯化蛋白为材料进行了ActA单抗的研制,获得四株抗ActA的单克隆抗体杂交瘤细胞株,腹水单抗ELISA效价为1:5×104～1:1×105.选取单抗1A5进行Western-blot分析,结果表明单抗1A5能和表达产物进行特异性反应,且与Lm-4多抗血清的Western-blot结果一致.actA基因的原核表达及单抗的研制为研究ActA蛋白的生物学活性及其致病作用奠定了基础,也为该菌鉴定提供了新试剂.

摘要： 目的:探讨产单核细胞李斯特菌(Lm)的actA基因3,末端核苷酸序列作为其遗传谱系分析的可能性,及中国与美国的Lm分离株遗传进化的关系. 方法:采用特异性引物扩增40株食品、污水及临床分离株actA基因3'末端597bp的核苷酸序列,所获得的DNA序列用于(1)Lm遗传谱系的建立并将其分为不同的actA基因型;(2)比较中国Lm分离株与美国分离株Lm的actA基因型与遗传谱系的差异. 结果:40株Lm中国分离株可分为两个遗传谱系(谱系Ⅰ和谱系Ⅱ),其中谱系Ⅰ包括14株,谱系Ⅱ包括26株.26株谱系Ⅱ的菌株又可被分为两个亚群(ⅡA和ⅡB).与15株已发表的美国分离株序列比较发现中国分离株与美国分离株的谱系相一致,在40株中国分离株中有14个actA基因型,其中有两个与美国分离株的actA基因型相同. 结论:actA基因3'末端核苷酸序列适合于Lm的谱系分析,且中国分离株与美国分离株具有较大的相似性,Lm的克隆组群可能在全球范围内存在.

摘要： 目的 分析临诬蔑档脑膜炎病人脑脊液中分离的两株产单核细胞李斯特菌(1191,1579)和从食品中分离的三株产单核细胞李斯特菌(YZ1,YZ2和YZ3)的actA基因3'末段核苷酸序列变化,并探讨其致病性、溶血活性及其在遗传进化中的地位.方法 采用PCR法扩增actA基因3'末段827bp核苷酸片段,并对该8827bP的PCR扩增产物直接测序,与其它已发表的多株同一区段的DNA序列比较,利用DNAStar软件构建遗传进化树,测定其对鸡胚的致病性和在血平板上的溶血活性.结果 遗传进化树分析结果表明1579属于谱系I,1191,YZ1,YZ2和YZ3属于谱系Ⅱ.在Genebank上未发现与1579和YZ1完全同源的序列.鸡胚毒力实验结果表明临床分离株1191和1579对鸡胚的致死率为100％且致死时间相对较短(2-3.5天),因而毒力较强,而食品分离株YZ1,YZ2和YZ3对鸡胚的致死率分别为50％,40％,20％,致死时间也较长(4-6天),故毒力较弱.毒力较强的1579和毒力较弱的YZ2和YZ3显示溶血活性较强,而毒力较强的1191和毒力较弱的YZ1显示溶血活性相对较弱.结论 发现了两新的actA基因型LM(1579和YZ1),LM中国分离株I和Ⅱ遗传谱系均可引起人类疾病,LM临床分离株的致病力较食品分离株强,溶血活性大小与LM致病力无直接联系,因而不能作为判断LM毒力强弱的可靠标准.

摘要： 本研究的目的是要建立一种能快速鉴定LM的方法,建立一套以DNA序列为基础的分子亚分型体系,以便快速确定食品的污染来源,并为进一步研究LM群体遗传学、流行病学及生态学奠定良好的技术基础.

摘要： 本发明提供一种单核细胞增生李斯特菌和伊氏李斯特菌多重PCR检测试剂盒。试剂盒中包括基因lmo0601检测引物以及基因

摘要： 本发明提供一种同时检测单核细胞增多性李斯特菌、副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门菌的试剂盒及其制备方法，属于试剂盒领域。该试剂盒包括实时检测自吸阀分隔式芯片；所述的实时检测自吸阀分隔式芯片包括：自吸阀分隔式芯片、单核细胞增多性李斯特菌的FAM染料修饰特异性适配体、副溶血性弧菌的FAM染料修饰特异性适配体、鼠伤寒沙门菌的FAM染料修饰特异性适配体、空白对照FAM染料修饰适配体、HNB染料和氧化石墨烯。本发明对单核细胞增多性李斯特菌、副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门菌的最低检测浓度分别为46.8、22.9和32.3CFU/mL，加标回收率达到97.11～10.40％，灵敏度高，稳定性好。

摘要： 本发明提供一种单核细胞增生李斯特菌和伊氏李斯特菌多重PCR检测试剂盒。试剂盒中包括基因lmo0601检测引物以及基因

摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及鉴别单核细胞增生李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和英诺克李斯特氏菌的方法。本发明通过对单核细胞增生李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和英诺克李斯特氏菌的基因组序列进行分析，提供了用于高分辨熔解曲线技术鉴别单核细胞增生李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和英诺克李斯特氏菌的特异性引物对，其序列如SEQ ID NO.1‑2所示。在此基础上，建立了利用高分辨熔解曲线技术鉴别三种李斯特氏菌的方法，具有较高的灵敏度、特异性和准确性，能够高效检出上述三种李斯特氏菌，具有操作简单、成本低、快速、高通量等优点，可用于临床检测、农业生产、食品安全等领域的李斯特氏菌的鉴别。

摘要： 本发明提供一种同时检测单核细胞增多性李斯特菌、副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门菌的试剂盒及其制备方法，属于试剂盒领域。该试剂盒包括实时检测自吸阀分隔式芯片；所述的实时检测自吸阀分隔式芯片包括：自吸阀分隔式芯片、单核细胞增多性李斯特菌的FAM染料修饰特异性适配体、副溶血性弧菌的FAM染料修饰特异性适配体、鼠伤寒沙门菌的FAM染料修饰特异性适配体、空白对照FAM染料修饰适配体、HNB染料和氧化石墨烯。本发明对单核细胞增多性李斯特菌、副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门菌的最低检测浓度分别为46.8、22.9和32.3CFU/mL，加标回收率达到97.11～10.40％，灵敏度高，稳定性好。

摘要： 本发明公开了一种鉴定细菌，特别是鉴定沙门氏菌、产单核细胞李斯特菌的检测方法。先将沙门氏菌和大肠杆菌YZU_DSL1分别采用热裂解法提取各自DNA模板、产单核细胞李斯特菌采用酶解法提取DNA模板，然后进行一次性PCR扩增特定的多个基因，最后以大肠杆菌为指示菌电泳鉴定。本发明通过将样本的DNA，一次性同时对可能存在的沙门氏菌组氨酸转运操纵子基因、产单核细胞溶血素基因扩增和一定存在的大肠杆菌YZU_DSL1质粒进行扩增，形成大量的基因复制片段，比较方便，一次就能鉴定是否为沙门氏菌、产单核细胞李斯特菌，并对阴性结果的反应体系的正确性作出判断。本发明较经典方法的细菌分离、鉴定和血清学分型试验方法快速、准确。

摘要： 本发明公开了一种简单快速同时检测沙门氏菌(Salmonella)、产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes)和大肠杆菌的方法并由此发明了一种检测试剂盒。首先采用热裂解法(沙门菌，大肠杆菌)和酶解法(李斯特菌)提取三种微生物的DNA模板，并分别针对沙门氏菌、产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes)和大肠杆菌设计了特异性的引物，实际扩增片段分别为沙门氏菌320bp、产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes)440bp、大肠杆菌706bp。本发明和经典方法的细菌分离、鉴定和血清学分型试验方法相比更快速、准确。且较一般的多重PCR方法特异性强，灵敏度高，能够同时对以上三种病原菌进行检测和鉴定。

摘要： 本发明公开了一种鉴定细菌，特别是鉴定沙门氏菌(Salmonella)、产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes)的检测方法。先将沙门氏菌和大肠杆菌(YZU_DSL1)分别采用热裂解法提取各自DNA模板、产单核细胞李斯特菌采用酶解法提取DNA模板，然后进行一次性PCR扩增特定的多个基因，最后经电泳鉴定。本发明通过将样本的DNA，一次性同时对可能存在的沙门氏菌组氨酸转运操纵子基因、产单核细胞溶血素基因扩增和一定存在的大肠杆菌(YZU_DSL1)质粒进行扩增，形成大量的基因复制片段，比较方便，一次就能鉴定是否为沙门氏菌、产单核细胞李斯特菌，并对阴性结果的反应体系的正确性作出判断。本发明较经典方法的细菌分离、鉴定和血清学分型试验方法快速、准确。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体是一种产单核细胞李斯特菌灭活疫苗及其制备方法。所说的产单核细胞李斯特菌灭活疫苗制备方法，是将产单核细胞李斯特菌经

摘要： 本发明涉及一种将野生型产单核细胞李斯特菌毒力基因缺失的构建方法。本发明将扩增出待删除基因两翼的同源片段actA、plcB后，利用SOEing PCR方法将其拼接，插入穿梭载体pKSV7中，经电转化导入产单核细胞李斯特菌，得到actA、pclB双基因缺失的产单核细胞李斯特菌减毒突变株(Listeriamonocytogenes yzu LM1－2)，保藏号CCTCC NO：M206107。解决了产单核细胞李斯特菌(Listeria monocytogenes，简称LM)人兽共患病的病原，死亡率高及对食品的污染与危害等。本发明删除了actA和plcB基因，从而实现对野生型菌株yzuLM4的减毒。