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PI3K/mTOR信号通路调控舌鳞状细胞癌上皮间质转化的实验研究

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目的:探讨PI3K/mTOR信号通路参与调控Tb3.1人舌鳞状细胞癌发生上皮间质转化（EMT）的分子机制。方法:实验分5组:①空白对照组;②20ng/ml EGF组;③20ng/ml EGF+200nM/L雷帕霉素组;④20ng/ml EGF+20μM/L LY294002组;⑤20ng/ml EGF+200nM/L雷帕霉素+20μM/L LY294002组。使用倒置显微镜观察加入抑制剂后Tb3.1细胞的形态变化;划痕实验检测加入抑制剂后Tb3.1细胞迁移能力;蛋白质印迹法检测加入抑制剂后Tb3.1细胞的E-钙粘蛋白（E-cadherin）、β-连环蛋白（β-catenin）、波形蛋白（Vimentin）、p-Akt/Akt和p-mTOR/ mTOR蛋白的表达;免疫荧光实验检测加入抑制剂后E-cadherin、β-catenin、Vimentin的表达情况。结果:划痕实验显示EGF处理的细胞迁移能力增强,加入雷帕霉素和（或）LY294002后细胞的迁移能力减弱;蛋白印迹结果显示EGF处理的细胞Vimentin、p-Akt和p-mTOR的表达增加,E-cadherin和β-catenin的表达减少,用雷帕霉素和LY294002处理后,细胞不在受EGF的影响;雷帕霉素和LY294002联合应用时细胞的形态恢复为上皮性;免疫荧光显示EGF能够使E-cadherin几乎不表达,β-catenin进入核内,Vimentin表达增加,而雷帕霉素和LY294002能够不同程度的影响这些蛋白的表达,并且二者的联合作用更明显。结论:雷帕霉素和LY294002能够抑制Tb3.1人舌癌细胞的上皮间质转化,并为探索PI3K/mTOR信号通路调控人舌癌发生上皮间质转化的发生机制提供实验依据。

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来源
《2011国际暨全国第十一届头颈肿瘤学术大会》|2011年|253-261|共9页
会议地点杭州
作者
周旋; 张浏阳; 张伦;
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作者单位

中国抗癌协会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类 R739.8:R730.2;
关键词
舌鳞状细胞癌; 上皮间质转化; PI3K/mTOR信号通路; 病理机制;

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