独行菜法尼基焦磷酸合酶基因的克隆与原核表达

摘要

目的:从独行菜Lepidium apetalum中克隆强心苷合成途径的法尼基焦磷酸合酶(farnesyl pyrophosphate synthase,FPS)基因,并在大肠杆菌中表达. 方法:分析前期获得的独行菜幼苗转录组数据,选择其中注释为FPS且具有完整开放阅读框的序列,从独行菜叶片cDNA中通过PCR克隆该序列,并进行序列分析.将该基因通过pET-32a载体在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达. 结果:克隆得到独行菜FPS基因的cDNA序列,GenBank登录号KY366218,命名为LaFPS.序列含有1161bp的开放阅读框,推测编码386个氨基酸.构建的载体pET-32a-LaFPS在大肠杆菌中成功诱导表达. 结论:成功克隆了独行菜FPS基因,并建立了原核表达体系,为独行菜强心苷合成途径的进一步研究提供了基础.

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