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开菲尔乳杆菌KL22的鉴定及其益生潜力评价

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摘要

Abstract

一、插图清单

二、附表清单

第1章 绪论

1.1 益生菌

1.1.1 益生菌的概念及分类

1.1.2 益生菌的作用及其机制

1.1.3 益生菌产品

1.2 益生菌的筛选

1.3 开菲尔乳杆菌

1.3.1 开菲尔及开菲尔粒

1.3.2 开菲尔粒的菌相组成

1.3.3 开菲尔乳杆菌生理学特性

1.3.4 开菲尔乳杆菌的功能性

1.4 研究目的及意义

1.5 技术路线

第2章 开菲尔乳杆菌KL22的鉴定及抗生素敏感性评价

2.1 材料与设备

2.1.1 样品来源

2.1.2 培养基和试剂

2.1.3 主要仪器设备

2.2 试验方法

2.2.1 菌落形态及理化指标检测

2.2.2 分子生物学鉴定

2.2.3 基于RAPD技术KL22株水平的鉴定

2.2.4 抗生素敏感试验

2.3 结果与分析

2.3.1 菌株KL22的菌落形态及理化指标鉴定结果

2.3.2 基于分子生物学的KL22分类鉴定

2.3.2.1 基于16S rRNA的KL22分类学鉴定

2.3.2.2 基于pheS基因的KL22分类学鉴定

2.3.2.3 基于16S rRNA基因序列的 KL22系统进化树

2.3.2.4 基于pheS基因序列的 KL22系统进化树

2.3.3 菌株KL22的RAPD指纹图谱

2.3.4 抗生素敏感试验

2.4 本章小结

第3章 开菲尔乳杆菌KL22的功能性初步研究

3.1 材料与设备

3.1.1 样品来源

3.1.2 培养基和试剂

3.1.3 主要仪器设备

3.2 试验方法

3.2.1 生长曲线的测定

3.2.2 耐酸耐胆盐试验

3.2.3 疏水性试验

3.2.4 自凝聚力试验

3.2.5 细胞粘附试验

3.2.5.1 细胞的培养

3.2.5.2 粘附观察试验

3.2.5.3 粘附计数试验

3.2.5.4 菌液浓度对粘附作用的影响试验

3.2.6 抗氧化试验

3.2.6.1 羟自由基(OH-)清除能力检测

3.2.6.3 超氧阴离子(O2-)清除能力检测

3.2.7 菌株诱导Caco-2 细胞中基因的表达试验

3.2.8 菌株降胆固醇能力的测定

3.3 结果与分析

3.3.1 生长曲线的测定结果

3.3.2 耐酸耐胆盐试验结果

3.3.3 疏水性试验结果

3.3.4 自凝聚力试验结果

3.3.5 粘附性试验结果

3.3.6 抗氧化试验结果

3.3.6.1 OH-清除能力结果

3.3.6.2 O2-清除能力结果

3.3.6.3 DPPH清除能力结果

3.3.7 菌株KL22诱导Caco-2细胞中基因在mRNA水平上的表达变化

3.3.8 菌株KL22的降胆固醇能力

3.4本章小结

第4章 开菲尔乳杆菌KL22的发酵特性研究

4.1 材料与设备

4.1.1 样品来源

4.1.2 培养基和试剂

4.1.3 主要仪器设备

4.2 试验方法

4.2.1 产酸能力测定

4.2.2 自溶性试验

4.2.3 最适发酵糖类的选择

4.2.4 最适发酵温度的选择

4.2.5 单菌株发酵乳在保存过程中的菌数和pH变化

4.3 结果与分析

4.3.1 菌株在改良MRS中的产酸性能测定结果

4.3.2 自溶性试验结果

4.3.4 开菲尔乳杆菌KL22最适发酵糖的确定

4.3.5 最适发酵温度的确定

4.3.6 菌株在牛乳中的菌数和pH变化

4.4 本章小结

第5章 开菲尔乳杆菌KL22在发酵乳中的应用研究

5.1 材料与设备

5.1.1 样品来源

5.1.2 培养基和试剂

5.1.3 主要仪器设备

5.2 试验方法

5.2.1 凝乳试验

5.2.2 发酵乳保质期内理化指标的检测

5.2.2.1 pH的测定

5.2.2.2 酸度的测定

5.2.2.3 保水力的测定

5.2.2.4 黏度测定

5.2.3 发酵乳保质期内微生物的检测

5.2.4 发酵乳感官鉴评

5.3 结果与讨论

5.3.1 凝乳时间

5.3.2 发酵乳保质期内理化指标的变化

5.3.2.1 酸度和pH变化

5.3.2.2 持水力测定结果

5.3.2.3 黏度测定结果

5.3.3 保质期内微生物数量的变化

5.3.4 感官评价结果

5.4 本章小结

结论

展望

创新点

致谢

参考文献

作者简介

攻读硕士学位期间发表的论文和科研成果

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摘要

乳酸菌是一类革兰氏阳性、无芽孢、厌氧或兼性厌氧的细菌。乳酸菌中的乳杆菌属包含50多个种,大多数具有调节肠道菌群、提高人体免疫力等功能,干酪乳杆菌、植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌等已被应用于乳制品等食品加工行业中。而开菲尔乳杆菌(Lactobacillus kefiri, L. kefiri)至今未列入国家可食用乳酸菌名单。因其具有免疫调节、抑制致病菌、降低血清胆固醇等作用,被广泛关注。本文以分离自波兰开菲尔粒的菌株为研究对象,对其功能性和发酵特性进行研究,以期为其开发利用提供理论依据。主要研究结论如下: (1)从波兰开菲尔粒中分离出一株菌,结合形态学鉴定、生化试验鉴定、分子生物学鉴定,证实该菌株为L. kefiri,命名为KL22。 通过抗生素敏感性试验,确定菌株KL22对环丙沙星、万古霉素、复方新诺明和苯唑西林表现出抗性,对四环素为中度敏感,对其余25种抗生素表现为敏感。 (2)菌株KL22具有较强耐酸性和一定的耐胆盐能力。通过疏水性试验、自凝聚力试验及Caco-2细胞粘附性试验,证明KL22具有较高的粘附能力,且菌液浓度为108 CFU/mL时,其粘附数显著高于其它浓度,为24.59 个/细胞。 另外,KL22对OH-、O2-和DPPH都具有清除能力,其中,灭活组对DPPH的清除能力高达72.02%;对IL-8、TNF-α和hBD-2具有一定的调控作用,间接可调节免疫系统,提高宿主免疫能力。体外降胆固醇试验结果表明,菌株KL22具有一定的降胆固醇能力,其中活菌状态的KL22作用48 h后的胆固醇降解率为52.94%。 (3)通过对菌株KL22的发酵特性研究,发现其有一定的自溶性和产酸能力,其最适发酵糖为麦芽糖,最适发酵温度为37℃;另外,还具有保质期内活菌数较高的特点。最后,选择5种基础发酵剂与菌株KL22共同发酵,结果表明,与基础发酵剂1共同发酵的酸乳,口感较好,pH、酸度、黏度、持水力等指标均较好。

著录项

  • 作者

    赵彤;

  • 作者单位

    河北工程大学;

  • 授予单位 河北工程大学;
  • 学科 食品加工与安全
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 王永霞,王世杰;
  • 年度 2019
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类 食品工业;其他化学工业;
  • 关键词

    开菲尔; 乳杆菌; 鉴定;

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