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静电纺丝PHBV/PLA+COL联合星形胶质细胞移植修复大鼠脊髓损伤的研究

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摘要

中英文缩写词对照

1 引言

2 材料与方法

2.1 材料、仪器及试剂

2.2 实验方法

3 结果

3.1 PHBV/PLA+COL静电纺丝膜的表面形态观察

3.2 PHBV/PLA+COL静电纺丝膜的光谱分析

3.3 原代星形胶质细胞纯度

3.4 星形胶质细胞在PHBV/PLA+COL静电纺丝膜上的生长情况

3.5 AC的形态及排列顺序的改变

3.6 AC基因表达的差异

3.7 运动功能评分

3.8 HE染色

3.9 免疫荧光染色

4 讨论

5 结论

参考文献

综述 生物支架在脊髓损伤研究中的进展

作者简历

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摘要

目的:
  研究静电纺丝PHBV/PLA+COL联合星形胶质细胞(AC)移植对脊髓损伤大鼠神经再生和功能恢复的作用。
  方法:
  扫描电镜及免疫荧光观察AC在静电纺丝PHBV/PLA+COL膜上的生长粘附情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测AC在材料上生长7天,14天后BLBP,GLT-1,CSPG,S100-βmRNA的基因表达变化。建立大鼠左侧T10脊髓半横断模型:32只SD大鼠随机分成4组:G1对照组,仅横切;G2 AC移植组;G3PHBV/PLA+COL移植组;G4 PHBV/PLA+COL联合AC移植组。术后每周采用BBB评分评价大鼠后肢运动功能恢复情况。术后8周处死大鼠,行HE染色,神经丝蛋白-200(neuroflament-200,NF-200)和胶原纤维酸性蛋白(glial fibrillaryacidic protein,GFAP)的免疫荧光染色。
  结果:
  扫描电镜及荧光显微镜可见星形胶质细胞在材料上生长粘附良好;q-PCR显示PHBV/PLA+COL使AC在7天及14天后BLBP、GLT-1、S100-β的表达量明显增高。术后8周,G4组BBB评分最高,G3组BBB评分高于G1,G2。HE染色显示,G4组脊髓仅少量较小的空洞,低于其余各组,且损伤边缘的正常脊髓实质较其余各组完整,G1组可见多个较大的空腔,远大于其余3组;GFAP及NF的免疫荧光染色显示,4组损伤边界均有不同程度的胶质疤痕形成,G1及G2组最严重,G3程度较前两者轻,G4组明显低于其余3组;G4组损伤边界有较多的NF-200阳性的神经纤维发出,G3组其次,而G1及G2组仅可见少量的神经纤维。
  结论:
  静电纺丝PHBV/PLA+COL支架具有良好生物相容性。植入载有AC的静电纺丝PHBV/PLA+COL支架可减轻脊髓半横断大鼠的损伤区域的炎症反应,减少脊髓空洞的形成及减轻损伤边界脊髓实质的二次伤害,减轻胶质疤痕的形成,促进神经元再生,从而促进后肢运动功能恢复。

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