羊肚菌培养条件优化及其多糖生物活性的研究

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本论文通过对羊肚菌(morchella esculenta 5.0381)的优化培养，提取胞外多糖，经纯化检验后，对其生物活性进行研究。首先通过正交实验设计考察了氮源含量、碳源含量、接种量、初始pH对粗多糖得率和生物量的影响，确定最佳培养条件为：麸皮 5％、蔗糖 4％、接种量2％，初始pH6。将发酵液浓缩醇沉得胞外多糖 MEP，其含糖量约为 32.7％，蛋白含量约为39.2％。对所提胞外粗多糖 MEP 进行体内活性实验，研究羊肚菌粗多糖对四氯化碳(CCl<,4>)致小鼠急性肝损伤的保护作用。预防给药16天后，采用CCl<,4>复制小鼠急性肝损伤模型，24 小时后，眼眶取血，测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及血清蛋白的变化，观察羊肚菌粗多糖对急性肝损伤的保护作用。结果表明羊肚菌粗多糖能明显降低模型组的血清转氨酶、肝脂质过氧化物含量抑制蛋白流失及肝脏肿大。羊肚菌粗多糖对小鼠肝脏的化学损伤有显著的保护作用。进一步将 MEP 过 DEAE-Sepharose F.F 色谱柱进行纯化，得到羊肚菌多糖MEP-I。经检测MEP-I多糖含量89.12％，蛋白含量7.64％。对MEP-I进行体内抗S<,180>肿瘤活性试验。通过检测荷瘤鼠的瘤块和免疫器官质量，存活时间等发现羊肚菌多糖具有很好的体内抗肿瘤活性。在200～400mg/kg剂量范围内最高抑瘤率可达64.42％，抑瘤效果接近阳性对照环磷酰氨组(66.35％)且可增强机体的免疫功能。MEP-I还可以明显延长腹水瘤小鼠的存活时间。在体外试验中，发现羊肚菌多糖MEP-I具有直接杀死S<,180>肿瘤细胞的作用，最高抑制率为46.3％。羊肚菌多糖MEP-I再经过快速纯化系统(AKTA Purifier10)收集含糖组分得到MEP-Ⅱ。体外实验表明MEP-Ⅱ仍具有直接杀死S<,180>肿瘤细胞的作用，但抑制率最高抑制仅为 18.4％。

著录项

作者
周丽伟;
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作者单位

安徽大学;

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授予单位安徽大学;
学科生物化学与分子生物学
授予学位硕士
导师姓名陈彦;
年度 2007
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类化学分析与鉴定;菌类;
关键词
羊肚菌; 培养条件优化; 胞外多糖; 抗氧化活性; 抗肿瘤活性;

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