胰岛素样生长因子结合蛋白-6的核定位

韩建军; 黄秉仁; 王欣; 马晓骊; 陈虹

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胰岛素样生长因子结合蛋白-6的核定位

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目的研究胰岛素样生长因子结合蛋白-6(IGFBP-6)在细胞中的定位.方法用重叠PCR法构建IGFBP-6的核定位序列缺失体(pEGFP-C1-BP6ΔNLS)及突变体(pEGFP-C1-BP6-Mut)质粒,与野生型IGFBP-6质粒分别转染PC-3M细胞,激光扫描共聚焦显微镜观察绿色荧光融合蛋白在细胞中的分布,并计算这些转染阳性细胞中绿色荧光强度的核质比(Fn/c).结果激光扫描共聚焦显微镜观察显示,野生型IGFBP-6绿色荧光信号在细胞核内聚集分布,与转染EGFP空载体的对照组相比,Fn/c差异具有显著性(P<0.05).过表达pEGFP-C1-BP6ΔNLS的细胞中,绿色荧光信号在细胞核内聚集的现象消失,在整个细胞呈均匀分布;过表达pEGFP-C1-BP6-Mut的细胞中,细胞核内绿色荧光信号也有所减弱;两者的Fn/c与转染野生型IGFBP-6的细胞相比差异均具有显著性(P<0.05).结论 IGFBP-6可以定位于细胞核内,它在细胞核内的分布与其核定位序列相关,为进一步研究IGFBP-6不依赖于胰岛素样生长因子的生物学活性提供了新的实验依据.

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来源
《中国医学科学院学报》 |2009年第6期|735-739797|共6页
作者
韩建军; 黄秉仁; 王欣; 马晓骊; 陈虹;
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作者单位

中国医学科学院,北京协和医学院,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;

中国医学科学院,北京协和医学院,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;

中国医学科学院,北京协和医学院,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;

中国医学科学院,北京协和医学院,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;

中国医学科学院,北京协和医学院,基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;

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正文语种 chi
中图分类 Q28;
关键词
胰岛素样生长因子结合蛋白-6; 核定位; 核定位顺序; 非胰岛素样生长因子依赖的生物学活性;

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