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O型口蹄疫病毒VP1蛋白的原核表达及功能鉴定

         

摘要

为获得具有免疫原性的FMDV VP1蛋白,以O型FMDV重组质粒PMD18T-VP1为模板,利用PCR技术扩增得到O型FMDV VP1基因片段,将此基因片段与原核表达载体pET32a连接,构建重组表达载体,命名为pET-VP1,经PCR和测序鉴定后,用IPTG诱导表达,收集诱导的菌液进行SDS-PAGE电泳和Western-Blot分析.结果显示,在分子量约为45 ku处有1条明显的蛋白条带,且能被口蹄疫阳性血清识别,表达产物通过包涵体纯化后用透析法复性;ELISA检测结果显示,所复性的蛋白具有较高的活性.结果表明,FMDV VP1蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,为开发诊断制剂和疫苗的研制打下基础.

著录项

  • 来源
    《华北农学报》 |2009年第6期|11-14|共4页
  • 作者单位

    河南省农业科学院;

    河南省动物免疫学重点实验室;

    河南;

    郑州;

    450002;

    河南农业大学;

    牧医工程学院;

    河南;

    郑州;

    450096;

    河南省农业科学院;

    河南省动物免疫学重点实验室;

    河南;

    郑州;

    450002;

    河南省农业科学院;

    河南省动物免疫学重点实验室;

    河南;

    郑州;

    450002;

    河南农业大学;

    牧医工程学院;

    河南;

    郑州;

    450096;

    河南省农业科学院;

    河南省动物免疫学重点实验室;

    河南;

    郑州;

    450002;

    河南农业大学;

    牧医工程学院;

    河南;

    郑州;

    450096;

    河南省农业科学院;

    河南省动物免疫学重点实验室;

    河南;

    郑州;

    450002;

    河南农业大学;

    牧医工程学院;

    河南;

    郑州;

    450096;

    河南省农业科学院;

    河南省动物免疫学重点实验室;

    河南;

    郑州;

    450002;

    河南省农业科学院;

    河南省动物免疫学重点实验室;

    河南;

    郑州;

    450002;

    河南省农业科学院;

    河南省动物免疫学重点实验室;

    河南;

    郑州;

    450002;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因的表达;
  • 关键词

    口蹄疫病毒; VP1基因; 原核表达; 蛋白复性;

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