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肝细胞生长因子激活对肝星状细胞凋亡及Rho表达的调控

         

摘要

目的研究肝细胞生长因子激活物激活肝细胞生长因子后对肝星状细胞(HSC)凋亡的影响及对Rho表达的调控。方法用免疫组织化学方法检测HSC中α-平滑肌肌动蛋白的表达量;四甲基偶氮唑盐法检测Y27632的最佳干预浓度;流式细胞仪检测HSC凋亡情况;免疫荧光法检测肝细胞生长因子-α链的表达水平;PCR法检测HSC中RhoA mRNA的表达;Western blot检测HSC中RhoA蛋白的表达,计量资料采用方差分析,组间比较采用t检验。结果(1)Y-27632以10μmol/L作用于HSC引起细胞受抑制最明显(0.96±0.51),与其他各浓度比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05);(2)肝细胞生长因子-α链表达量均随培养时间的延长而增加,24、48、72h空白对照组(545.25±41.43、585.57±56.87、618.65±55.82)与50 ng/ml外源性HGF干预的实验对照组a(557.34±52.84、589.46±67.21、625.59±54.68)比较,差异无统计学意义(P>0.05),其他各组在各时间段比较,差异均有统计学意义(P值均<0.01);(3)HSC凋亡率随培养时间延长而增加,各组各时间段比较,以实验组最高(38.68±3.44、46.93±4.30、59.03±4.25),差异均有统计学意义(P值均<0.05);(4)实验组RhoA mRNA和蛋白表达量均随时间延长而减少,以实验组表达量最低(0.88±0.01、0.64±0.01、0.51±0.01;0.83±0.04、65±0.06、0.51±0.07)与其他各组在相同时间段比较,差异有统计学意义(P值均<0.01)。结论通过下调Rho通路,激活肝细胞生长因子能促进HSC凋亡。

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