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原代培养大鼠视网膜与视皮质神经元的方法学特点(英文)

         

摘要

背景:神经元的原代培养是进行神经系统结构和功能研究的一种重要手段。如果能建立稳定良好的视网膜、视皮质神经细胞体外培养体系,对深入研究其各种细胞成分的生物学功能、病理改变过程与机制以及药物反应等十分重要。目的:对比观察原代培养新生大鼠视网膜及视皮质神经元的特点,探求最佳分离和培养方法。方法:分别采用机械分离及酶消化法分离新生大鼠视网膜及视皮质神经元,应用含体积分数为10%新生牛血清、10% F-12 Nutrient Mixtures的DMEM培养基进行接种培养,含2% B-27 Serum-Free Supplements的Neuro basal Medium进行维持培养,利用尼氏染色进行神经元鉴定。结果与结论:培养的神经元生长良好,胞体饱满,突起长。尼氏染色示视网膜神经元比例大于90%,视皮质神经元比例大于50%。提示视网膜及视皮质神经元培养方法及生长特点存在不同,需采用不同的方法进行培养以获得高纯度的神经元。

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