醛脱氢酶基因敲除对克氏肺炎杆菌合成1,3-丙二醇的影响

张延平; 杜晨宇; 黄志华; 刘铭; 曹竹安

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醛脱氢酶基因敲除对克氏肺炎杆菌合成1,3-丙二醇的影响

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利用Klebsiella pneumoniae厌氧发酵甘油生产1,3-丙二醇时,一部分甘油通过氧化代谢途径大量合成副产物乙醇,降低了1,3-丙二醇的得率.醛脱氢酶ALDH是乙醇合成途径的关键酶之一,其催化作用不仅消耗了大量甘油,还将还原型辅酶NADH氧化为NAD+,降低了同为NADH依赖型的1,3-PD合成途径的效率.本文以醛脱氢酶ALDH为改造目标,以K.pneumoniae为宿主,通过同源重组技术在K.pneumoniae M5aL的ALDH基因中成功地插入了四环素抗性基因,经抗性筛选和基因水平鉴定,得到两株ALDH基因敲除的重组菌0623-1hb及0623-1hc.本文研究了这两株重组菌的生长代谢特性,结果表明两株重组菌的ALDH酶活基本检测不到,菌体生长受到明显抑制,乙醇合成浓度比出发菌株K.pneumoniae M5aL降低了43%～53%,1,3-PD合成浓度及摩尔得率分别提高了27%～42%和19%～24%.

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来源
《化工学报》 |2006年第11期|2686-2692|共7页
作者
张延平; 杜晨宇; 黄志华; 刘铭; 曹竹安;
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作者单位

清华大学化学工程系生物化工研究所,北京,100084;

清华大学化学工程系生物化工研究所,北京,100084;

清华大学化学工程系生物化工研究所,北京,100084;

三明学院化学与生物工程系,福建,三明,365004;

清华大学化学工程系生物化工研究所,北京,100084;

清华大学化学工程系生物化工研究所,北京,100084;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
醛脱氢酶; 1,3-丙二醇; 乙醇; 克氏肺炎杆菌;

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