白来航鸡IFITM1基因表达规律分析及其对鸡内源性反转录病毒转录的影响

豆春峰; 吴挺; 胡序明; 冯仕章; 陈绪靖; 王丽萍; 耿拓宇; 崔恒宓

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摘要

IFITMs在天然免疫中发挥重要作用,抑制多种病毒复制。试验取5和30日龄白来航鸡心、肝、脾、胸腺和法氏囊,RT-qPCR检测其IFITM1基因的表达差异;用0.5μmol·L^-1 DNA甲基化酶抑制剂DAC处理鸡成纤维细胞CEF和鸡巨噬细胞HD11,RT-qPCR检测处理后IFITM1的表达水平;PCR扩增IFITM1基因CDS区克隆、测序,进而构建pcDNA3.1-IFITM1真核表达载体;将过表达载体转染至CEF和HD11细胞,RT-qPCR检测IFITM1过表达对鸡内源性反转录病毒ALVE1、OVEX1和EAV-HP转录的影响。结果表明:IFITM1基因在胸腺、法氏囊等免疫器官中的表达量高于心、肝和脾等非免疫器官,且随着日龄的增长,在胸腺中的表达量上升,而在法氏囊中的表达量下降;DAC处理后,IFITM1表达极显著上调;测序发现IFITM1基因CDS区大小为342bp;IFITM1过表达后,ALVE1、OVEX1在CEF和HD11细胞中转录均极显著下调,EAV-HP只在CEF细胞中极显著下调,而在HD11细胞中无显著变化。这一研究初步分析了鸡IFITM1基因的表达规律,构建了其真核表达载体,检测了其对鸡内源性反转录病毒转录的影响,为进一步研究其功能奠定了基础。

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来源
《扬州大学学报：农业与生命科学版》 |2019年第3期|34-40|共7页
作者
豆春峰; 吴挺; 胡序明; 冯仕章; 陈绪靖; 王丽萍; 耿拓宇; 崔恒宓;
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作者单位

扬州大学动物科学与技术学院/表观遗传学及表观基因组学研究所;

江苏扬州225009;

扬州大学比较医学研究院;

江苏扬州225009;

扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心/教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室;

江苏扬州225009;

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正文语种 chi
中图分类遗传、育种;
关键词
鸡; IFITM1基因; 内源性反转录病毒; 基因克隆; 真核表达;

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