线虫CPL-1的原核表达和多克隆抗体的制备

赵林; 鲍斌

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文章构建了线虫Cathepsin L相似蛋白酶(Cathepsin L-like proteases-1,CPL-1)原核表达体系成功获得原核表达蛋白,并制备兔源CPL-1多克隆抗体。首先提取线虫RNA运用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)技术获得目的基因cpl-1,构建重组原核表达载pET28a-cpl-1,将其转化到大肠杆菌BL21中诱导表达。CPL-1融合蛋白经Ni亲和层析法纯化后,作为抗原免疫兔子获得CPL-1多克隆抗体。采用ELISA测定抗体效价发现制备的抗血清效价高达1∶256000,用western blot检测发现抗体特异性良好。CPL-1蛋白的表达和抗体的成功制备为研究CPL-1在线虫中的生物学功能奠定了基础。

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来源
《合肥工业大学学报：自然科学版》 |2018年第11期|1552-1557|共6页
作者
赵林; 鲍斌;
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作者单位

合肥工业大学食品科学与工程学院;

合肥工业大学生物与医学工程学院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类抗体蛋白与干扰素蛋白;
关键词
Cathepsin; L相似蛋白酶(CPL-1); 原核表达; 多克隆抗体; 融合蛋白;

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