摘要:目的:乙肝病毒表面抗原(HBsAg)是乙肝疫苗的有效成分,其在纯化过程中损失较大,本论文考察其在层析中究竟发生了哪些结构变化,为提高其在层析中的收率以及保持其免疫原性提供指导。方法:将HBsAg上到DEAESepharose FF柱上,让这种类病毒颗粒吸附一定时间后再洗脱下来,然后通过圆二色谱(CD),凝胶过滤高效液相(HPSEC)以及多角度激光散射检测器(MALLS)检测其二级结构和四级结构的变化。rn 通过将其HPSEC上的峰面积与在DEAE表面上的接触时间作图,得到HBsAg的柱上解聚速率。结果:与微米球相比,纳米球可以被APCs快速的摄取,表现出最大的内吞数量及颗粒表面积。此外,颗粒的胞内运输方式具有显著的粒径依赖性,纳米颗粒有助于提高溶酶体加工、酶解抗原的能力,并且上调了利于抗原提呈,T细胞活化的细胞因子分泌水平。结论:发现HBsAg在DEAE表面中会发生明显的解聚。解聚以后,其二级结构也会发生明显的变化。研究测定了HBsAg的柱上解聚动力学,在5℃时,其解聚速率为5.52×10-4 sec-1,解聚反应活化能为128kJ/mol。