非诺贝特单药及联合化疗药在制备抗肿瘤药物中的应用

技术领域

本发明涉及抗肿瘤药物技术领域，具体公开了非诺贝特单药及联合化疗药在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

胃癌是常见的肿瘤之一，在我国发病人数和死亡人数位居第二。临床中应用的肿瘤治疗主要是通过外科手术，物理治疗，化学治疗和生物治疗。化疗是治疗胃癌的主要手段之一，尤其是对于晚期胃癌的全身性治疗更是起到了主要作用。化疗耐药现象是导致晚期胃癌治疗失败的重要原因，因此找到新的药物治疗方法和提高化疗药物的敏感性，逆转或降低化疗耐药的发生对于胃癌的治疗有着重要意义。寻找安全、低毒、副作用小的药物和化疗增敏是治疗肿瘤和解决化疗耐药的重要手段。

近年来肿瘤细胞异常的能量代谢列为新的肿瘤十大特征之一，肿瘤的代谢异常已成为肿瘤学研究的热点。从最早发现肿瘤细胞存在有氧糖酵解的现象到如今对肿瘤代谢活动的各个方面(糖、脂肪、氨基酸等)的解析和复杂代谢调控网络的发现,肿瘤细胞内异常的代谢途径，以及肿瘤细胞内异常表达的调节因子、代谢酶和代谢产物之间构成的复杂代谢调控网络，研究剖析肿瘤细胞的代谢重编程,对于发现抗肿瘤的潜在靶点和开发抗癌药物都具有重要意义。除了代谢调节药物单药抗肿瘤，针对普通化疗药物耐药的情况，将代谢调节药物与化疗药物联合使用也可能有效地抑制肿瘤化疗耐药的情况。

非诺贝特(fenofibrate)，中文别名为苯酰降脂丙酯；普鲁脂芬；立平脂；2-甲基-2-(4-(4-氯苯甲酰基)苯氧基)丙酸异丙酯，CAS号49562-28-9，为白色或类白色结晶性粉末，无臭，无味，熔点为80-81℃。极易溶于氯仿，易溶于丙酮或乙醚,略溶于乙醇，几乎不溶于水，分子式C20H21ClO4，分子量：360.83100。非诺贝特自1975年起便开始使用，主要用来降低胆固醇和甘油三酯水平，是最常用的贝特类药物之一，并且有着很好的效果和耐受性，长期应用毒性小，无蓄积作用，不与DNA结合，无致基因突变作用。除调脂作用外，非诺贝特还有抗炎、抗血管生成等作用。在大量的实验研究的基础上，发明人发现非诺贝特对于肿瘤具有一定的抑制效果。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，为了克服现有技术中抗肿瘤药物治疗的不足及化疗耐药的问题，提供非诺贝特单药或与化疗药物联合使用在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的技术方案可以通过以下技术措施来实现：

本发明提供了非诺贝特在制备用于抗肿瘤的药物中的应用。

本发明还提供了非诺贝特在制备化疗药增敏药物中的应用。

作为优选，所述化疗药为顺铂或多西他赛。

本发明所述的非诺贝特在用于上述任一用途时，其使用剂量范围为按照受药对象的体重，1～200mg/kg受药对象/1～4天，优选剂量范围为5～150mg/kg受药对象/天，更加优选100mg/kg受药对象/天。

本发明还提供一种用于治疗肿瘤的药物组合，包括化疗药物，以及用于与所述化疗药物联合使用的非诺贝特。

本发明所述的非诺贝特具有式(I)所示结构：

本发明所述非诺贝特为片剂、颗粒剂或粉剂，化疗药物常规剂型为粉剂、针剂等，均由非诺贝特及化疗药物药学上可接受的载体制成。非诺贝特应用方式可采取口服的方式，顺铂及多西他赛化疗药可采用腹腔注射或静脉注射方式。由非诺贝特与化疗药物的同时、分别或依次给药，此两种药物的联用，对肿瘤有显著的协同效应。

非诺贝特单用时，所作用的肿瘤包括：乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、肺癌、肝癌、黑色素瘤、视网膜母细胞瘤、食管癌、大肠癌、结肠癌、白血病、淋巴瘤、脑瘤、宫颈癌、肉瘤、前列腺癌、膀胱癌、网状内皮组织瘤、Wilm氏瘤、星细胞瘤、成胶质细胞瘤、成神经细胞瘤、骨肉瘤、肾癌、或头颈癌。

非诺贝特与顺铂联用可作用的肿瘤包括：卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌、恶性淋巴瘤、头颈部鳞癌、甲状腺癌及成骨肉瘤。

非诺贝特与多西他赛联用可作用的肿瘤包括：乳腺癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、头颈部肿瘤、小细胞肺癌、胃癌、胰腺癌、黑色素瘤。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

(1)本发明发现非诺贝特单用对肿瘤生长有明显抑制作用，瘤体体积缩小，无明显肝肾毒性和全身毒副作用；

(2)非诺贝特与化疗药物联用有显著的协同作用，而且可以增加肿瘤对化疗药物的敏感性；

(3)非诺贝特与化疗药物联用不会增加化疗毒性，而且在达到相同抑瘤效果的情况下采取化疗药物联合非诺贝特使用可以减少化疗药物的用量以减轻化疗的毒副作用。

附图说明

利用附图对本发明作进一步说明，但附图中的实施例不构成对本发明的任何限制。

图1为抑瘤实验的肿瘤瘤体情况；其中A为六个实验组小鼠的肿瘤瘤体重量；B为与对照组相比联合非诺贝特的化疗药组使瘤体减少的重量及化疗药和非诺贝特单药组瘤体减少的重量单纯相加的重量；Fen：非诺贝特，Doc：多西他赛，DDP：顺铂；(*表示与対照组进行比较p<0.05，#表示多西他赛联合非诺贝特组与多西他赛单药组进行比较p<0.05，&表示顺铂联合非诺贝特组与顺铂单药组进行比较p<0.05，p就是当原假设为真时所得到的样本观察结果或更极端结果出现的概率，如果p值很小，说明原假设情况的发生的概率很小，而如果出现了，根据小概率原理，我们就有理由拒绝原假设，p值越小，我们拒绝原假设的理由越充分，通常以0.05为界；

图2为抑瘤实验的六个实验组小鼠的肿瘤生长曲线，图中：A为非诺贝特单药组与对照组的比对曲线；B为多西他赛单药组、多西他赛联合非诺贝特组以及对照组的比对曲线；C为顺铂单药组、顺铂联合非诺贝特组以及对照组的比对曲线；

图3为不同实验组给药期间小鼠体重变化(ns表示p>0.05)；

图4为非诺贝特单药及化疗药联合治疗小鼠肿瘤对小鼠肝肾功能的影响；图中A表示AST(谷草转氨酶)含量；B表示ALT(谷丙转氨酶)含量，C表示Cr(肌酐)含量；

图5为非诺贝特单药及与化疗药联合治疗小鼠肿瘤对小鼠肝脏组织结构的影响，图为小鼠肝脏组织切片苏木素伊红(HE)染色法染色，200X；

图6为非诺贝特单药及与化疗药联合治疗小鼠肿瘤对小鼠肾脏组织结构的影响，图为小鼠肾脏组织切片苏木素伊红(HE)染色法染色，200X。

具体实施方式

为使本发明更加容易理解，下面将进一步阐述本发明的具体实施例。

(1)实验动物及饲养

雄性6-8周龄BALB/C近交系小鼠(体重16-20g)，购自北京华阜康实验动物中心。实验过程中，小鼠饲养于武汉大学医学部ABSL-3动物实验中心。

(2)构建小鼠胃癌移植瘤模型

1)取对数期生长的MGC803细胞，用0.25％胰酶消化细胞，加入10％FBS的完全培养基终止消化，然后用PBS液制成细胞悬液，调整细胞浓度为3×10⁷个/mL。

2)取18只健康BALB/C裸鼠，雄性，6-8周龄，体重约20g，将3×10⁶个(0.1mL)MGC803胃癌细胞皮下注射接种于每只小鼠大腿外侧部位，实验接种肿瘤细胞作为第1天，3-5天全部小鼠可触及皮下结节，1周左右肿瘤长至100mm³位模型成功，从第7天开始抑瘤实验。

(3)小鼠随机分组，实施抑瘤实验

将18只小鼠随机分为六组，每组3只，分别进行如下抑瘤实验：

1)对照组：5％羧甲基纤维素钠溶液0.1ml/天灌胃；生理盐水0.1mL/4天腹腔注射

2)非诺贝特单药组：非诺贝特100mg/kg/天(加入0.1ml的5％羧甲基纤维素钠溶液制成混悬液)灌胃；

3)多西他赛单药组：多西他赛2mg/kg/4天加入0.1ml生理盐水腹腔注射；

4)多西他赛联合非诺贝特组：多西他赛2mg/kg/4天加入0.1ml生理盐水腹腔注射，非诺贝特100mg/kg/天(加入0.1ml的5％羧甲基纤维素钠溶液制成混悬液)灌胃；

5)顺铂单药组：顺铂4mg/kg/4天加入0.1ml生理盐水腹腔注射；

6)顺铂联合非诺贝特组：顺铂4mg/kg/4天加入0.1ml生理盐水腹腔注射，非诺贝特100mg/kg/天(加入0.1ml的5％羧甲基纤维素钠溶液制成混悬液)灌胃。

抑瘤实验开始时，所有动物除实验干预因素外自由饮食、饮水，每天观察并记录动物活动、毛发、体重、其他一般状况及瘤体大小。

(4)实验终点检测指标

1)观察30天后采用过量戊巴比妥(100mg/kg)麻醉处死实验小鼠，完整剥离瘤体，测量瘤重；

2)留取小鼠血液样本检测肝肾功能指标；

3)留取小鼠肝脏及肾脏组织，用4％多聚甲醛溶液固定，制作成组织切片后进行HE染色，观察组织结构变化。

(5)实验结果

随着抑瘤实验的进行，开始小鼠活动状态基本无明显变化，肿瘤多为圆形或椭圆形，大小均一，后期药物干预后肿瘤开始逐渐不规则，且大小不一，其中对照组肿瘤体积增长最为迅速，抑瘤结果如图1所示。如图1A所示，单用非诺贝特组(0.8145±0.03833g)比对照组(1.015±0.05668g)瘤重小(差异有统计学意义，p<0.05)，联合非诺贝特的化疗药组比单用化疗药组瘤重小(Doc组0.7308±0.02996g vs Doc+Fen组0.3045±0.03860g；DDP组0.5132±0.03696g vs DDP+Fen组0.1322±0.01678g)(差异都有统计学意义，p<0.05)。由图1B可知与对照组相比联合非诺贝特的化疗药组使瘤体减少的重量大于化疗药和非诺贝特单药组瘤体减少的重量单纯相加(Doc+Fen联合0.7110±0.03860g vs Doc+Fen相加0.4856±0.06215g；DDP+Fen联合0.8832±0.01678g vs DDP+Fen相加0.7032±0.05104g)(差异有统计学意义，p<0.05)，呈现了显著的协同治疗效果。

由图2可知，单用非诺贝特组比对照组移植瘤生长速度慢(差异有统计学意义，p<0.05)，联合非诺贝特的化疗药组比单用化疗药组移植瘤生长速度慢(差异都有统计学意义，p<0.05)，加用非诺贝特可以显著抑制移植瘤生长速度。

由图3可知，各实验组之间小鼠体重无明显差异(p>0.05)，减少了因组间小鼠个体差异对实验结果产生的影响。

由图4可知，非诺贝特单药对小鼠肝肾功能无明显负面影响，AST、ALT、CREA较对照组升高(差异有统计学意义，p<0.05)，表明单独使用化疗药物会导致肝肾毒性，而联合非诺贝特化疗药物并未增加化疗药物的毒副作用(p>0.05)，在部分数据点还观察到了毒副作用降低的现象。通过观察肝肾组织HE染色结果，与对照组相比非诺贝特单药对小鼠肝肾组织结构无明显影响(图5，6)，多西他赛和顺铂单药组小鼠肝肾组织与对照组相比出现肝肾损伤变化，多西他赛和顺铂分别与非诺贝特联用与单用多西他赛或顺铂相比并未增加肝肾组织的损伤(图5，6)。

最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。