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通过获取自RNA的CRISPR间隔序列进行转录记录

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本发明涉及一种用于记录细胞的转录组的方法，该方法包括以下步骤：提供测试细胞，其包含：编码包含逆转录酶多肽和Cas1多肽的融合蛋白的第一转基因核酸序列和编码Cas2多肽的第二转基因核酸序列，其中该第一转基因核酸序列和该第二转基因核酸序列受诱导型启动子序列的转录控制，和包含CRISPR同向重复(DR)序列的第三转基因核酸序列；其中该CRISPR同向重复序列可由该第一转基因核酸序列和该第二转基因核酸序列的表达产物形成的RT‑Cas1‑Cas2复合物特异性识别，将该测试细胞暴露于诱导该第一转基因核酸序列和该第二转基因核酸序列的表达的条件，其中由该第一转基因核酸序列和该第二转基因核酸序列的表达产物形成的该RT‑Cas1‑Cas2复合物从RNA分子获取原间隔序列，并且将间隔序列整合到该第三转基因核酸序列中，产生经修饰的第三转基因核酸序列，从该测试细胞中分离该经修饰的第三转基因核酸序列，产生分离的第三转基因核酸序列，并对该分离的经修饰的第三转基因核酸序列进行测序。

著录项

公开/公告号CN112703249A

专利类型发明专利
公开/公告日2021-04-23

原文格式PDF
申请/专利权人苏黎世联邦理工学院;
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申请/专利号CN201980059045.7
发明设计人兰德尔·杰弗里·普莱特;佛罗莱恩·施密特;
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申请日2019-09-11
分类号C12N15/10(20060101);C12N15/62(20060101);C12N9/22(20060101);C12Q1/6806(20060101);
代理机构11111 北京市万慧达律师事务所;
代理人周倩羽;赵洁
地址瑞士苏黎世
入库时间 2023-06-19 10:43:23

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