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一种分离提纯小鼠肿瘤组织浸润CD4+CD25+调节性T细胞的方法

摘要

本发明属于细胞分选领域,具体是一种分离提纯小鼠肿瘤组织浸润CD4+CD25+调节性T细胞的分离纯化方法。具体包括以下步骤:(1)肿瘤组织单细胞悬液的制备:称取肿瘤组织0.2g,剪成小块后放入组织研磨器内,加入5mL组织匀浆液0℃匀浆2min,经200目滤网过滤,收集滤液,250g 20℃垂直离心机内离心15min,弃上清留沉淀,用2mL含有80%的胎牛血清样本稀释液重悬沉淀成单细胞悬液,计数使用样本稀释液调节浓度为1×108个/mL;(2)小鼠肿瘤组织浸润淋巴细胞分离;(3)CD4+CD25+调节性T细胞的免疫磁珠分选,收集所得细胞即为CD4+CD25+Treg。本发明方法首次使用肿瘤组织制备单细胞悬液,最终获得的CD4+CD25+Treg纯度达到86.5%。

著录项

  • 公开/公告号CN108165530B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2021-08-27

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 大连大学;

    申请/专利号CN201810034707.2

  • 申请日2018-01-15

  • 分类号C12N5/0783(20100101);

  • 代理机构21235 大连智高专利事务所(特殊普通合伙);

  • 代理人李猛

  • 地址 116622 辽宁省大连市开发区学府大街10号

  • 入库时间 2022-08-23 12:23:15

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