Orexin-A

摘要： 目的 探讨大鼠睡眠剥夺后下丘脑Orexin-A的表达及其对空间学习记忆能力的影响.方法 健康成年雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组(CC)、环境对照组(TC)、睡眠剥夺组(SD).采用间歇性跑步机进行72 h全睡眠剥夺.免疫组化观察各组大鼠下丘脑Orexin-A表达,Morris水迷宫试验测试各组大鼠的空间学习记忆能力.结果 SD组大鼠下丘脑Orexin-A阳性细胞数较TC和CC组显著增加,差异有统计学意义(P0.05);与TC组相比,SD组逃避潜伏期明显延长,穿越平台象限的次数明显减少,差异有统计学意义(P0.05).结论 睡眠剥夺可能通过诱导下丘脑Orexin-A的过度表达损害大鼠的空间学习记忆能力.

摘要： 目的 研究orexin-A对脊髓腹角神经元促离子型γ-氨基丁酸(GABA)受体功能的影响及其机制.方法 选取7～12 d的新生SD大鼠,麻醉后分离出含腰骶膨大的脊髓节段并切片.使用木瓜蛋白酶(Papain,0.18 g/30 mL人工脑脊液)消化切片并孵育40～60 min.显微镜下保留腹角,使用抛光的不同口径的巴斯德吸管急性机械分离单个细胞,待细胞贴壁后,应用膜片钳记录联合药理学方法对状态良好的神经元开展研究.在电压钳模式下记录,结合预处理给药方式,应用GABA受体激动剂γ-氨基丁酸记录在脊髓腹角神经元诱发的电流,给予orexin-A观察其对GABA电流的调制作用,先后给予OX1R选择性拮抗剂SB334867、OX2R选择性拮抗剂TCSOX229、PKC抑制剂Bis-IV、PKC激动剂PMA、PKA抑制剂Rp-cAMP、Ca2+螯合剂BAPTA等药物分析orexin-A对GABA电流调制的作用机制.结果 分离的脊髓腹角神经元形态良好,胞体形状多样,表面光洁,立体感较强且突起较长;给予orexin-A后,GABA诱发的电流幅值被显著制抑(P＜0.001,n=49),抑制率为(67.48±12.50)%;同时给予SB334867和TCSOX229可完全取消orexin-A对GABA电流的抑制作用(P=0.93,n=6);单独应用SB334867(P=0.001,n=8)或TCSOX229 (P=0.02,n=8)均部分解除orexin-A对GABA电流的压抑作用;给予Bis-IV后,orexin-A不再压抑GABA电流(P=0.31,n=5);PMA可模拟orexin-A的作用,显著抑制GABA电流,抑制率为(60.79±10.94)%,在此基础上,orexin-A不能进一步压抑GABA电流(P=0.15,n=6).给予Rp-cAMP后,orexin-A仍可显著压抑GABA电流(P=0.001,n=5).在无Ca2+细胞外液(P=0.004,n=8)或胞内应用BAPTA(P=0.04,n=7)时,orexin-A对GABA电流的压抑作用不受影响.结论 Orexin-A抑制脊髓腹角神经元的GABA电流,该效应可能经由OX1R和OX2R共同介导以及非Ca2+依赖的PKC信号通路的参与.

摘要： 目的 探讨阿尔茨海默病(AD)患者食欲素A(Orexin-A,OXA)水平与精神症状、睡眠质量、嗜睡状况、认知功能的关系.方法 采用病例对照研究的方法,选取60例AD患者(病例组)和相匹配的60名普通志愿老年人(对照组),应用酶联免疫法测定血浆OXA水平,神经精神科问卷知情者中文版(NPI-Q)、匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)、修订版艾普沃斯嗜睡量表(mESS)、简明精神状态检查量表(MMSE)评估其精神症状、睡眠质量、嗜睡状况和认知功能.1年后对病例组复测上述指标.结果 基线时病例组OXA、NPI-Q、PSQI高于对照组,而MMSE低于对照组(P<0.05).病例组治疗1年后OXA、NPI-Q均高于对照组,而MMSE仍低于对照组(P<0.05).病例组治疗1年后OXA、PSQI、MMSE均低于基线时水平(P<0.05).Logistic分析发现OXA水平是AD的危险因素,而MMSE得分则是AD的保护性因素(P<0.05).病例组49例患者完成1年后的随访,发现OXA的变化与NPI-Q、PSQI、mESS的变化及使用抗精神病药均呈正相关(P<0.05),而与使用苯二氮类药、MMSE的变化均呈负相关(P<0.05);Logistic分析发现年龄大是MMSE改善的危险因素,OXA变化大则是其保护因素(P<0.05).结论 OXA是AD形成的危险因素之一,且影响其精神症状、睡眠质量、嗜睡和认知功能.

摘要： 目的:探讨Ghrelin和Orexin-A与多囊卵巢综合征(PCOS)患者性激素的关系及其应用价值.方法:选取2018年3月～2020年1月期间在某院进行治疗的PCOS患者50例作为本次研究对象,将体质指数(BMI)≥25kg/m2作为肥胖组(n=20),<25 kg/m2作为非肥胖组(n=30),另同期选入38例进行治疗的输卵管性不孕(月经周期正常)患者作为对照组.对比3组血清性激素水平、Ghrelin、Orexin-A水平,采用Person探究血清性激素水平与Ghrelin、Orexin-A的关系.结果:3组血清性激素水平差异具有统计学意义(P<0.05),且肥胖组及非肥胖组血清性激素水平明显高于对照组(P<0.05),肥胖组明显高于非肥胖组(P<0.05);3组Gh-relin、Orexin-A水平差异具有统计学意义(P<0.05),且肥胖组及非肥胖组Ghrelin、Orexin-A水平明显高于对照组(P<0.05),肥胖组明显高于非肥胖组(P<0.05);Ghrelin、Orexin-A与血清性激素呈负相关(P<0.05).结论:PCOS患者机体内的Ghrelin和Orex-in-A可反应其血清性激素水平,有临床治疗指导意义.

摘要： 目的 探讨从下丘脑外侧区(LHA)到伏隔核(NAc)的orexin通路对胃动力及奖赏性摄食的调控作用.方法 (1)随机选取48只大鼠,按照随机数字表法分为6组,每组8只,分别为生理盐水组(NS组)、1μg orexin-A组、5μg orexin-A组、10 μg orexin-A组、20 μg orexin受体拮抗剂(SB334867)组、20 μg SB334867+5μg orexin-A组,采用大鼠NAc核团埋置套管注射orexin-A及SB334867的方法,观察大鼠胃收缩的频率和幅度;(2)随机选取32只大鼠,按照随机数字表法分为4组,每组8只,分别为:生理盐水+假刺激组(NS+SS组)、生理盐水+电刺激组(NS+ES组)、SB334867(20 μg)+假刺激组(SB334867+SS组)、SB334867(20μg)+电刺激组(SB334867+ES组),采用电刺激大鼠LHA及大鼠NAc注射SB334867的方法,观察大鼠胃收缩的频率和幅度;(3)随机选取32只大鼠,按照随机数字表法分为4组,每组8只,分别为NS组、orexin-A(5μg)组(orexin-A组)、SB334867(20 μg)组(SB334867组)、orexin-A(5μg)+ SB334867(20 μg)组(orexin-A+ SB334867组),采用大鼠NAc核团埋置套管注射orexin-A及SB334867的方法,观察大鼠与摄食行为有关的条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)或者胃功能(比如胃排空或者胃分泌);(4)随机选取32只大鼠,按照随机数字表法分为4组,每组8只,分为生理盐水+假刺激组(NS+SS组)、生理盐水+电刺激组(NS+ES组)、SB334867(20μg)+假刺激组(SB334867+SS组)、SB334867(20 μg)+电刺激组(SB334867+ES组),采用电刺激大鼠LHA及大鼠NAc注射SB334867的方法,观察大鼠与摄食行为有关的CPP或者胃功能(比如胃排空或者胃分泌).结果 (1)胃收缩活动记录结果显示,NAc微量注射orexin-A和电刺激LHA均显著增加了大鼠胃收缩的幅度和频率,并且这种作用可被NAc预注射SB334867阻断[给予orexin-A后10min:10 μgorexin-A组(60.78±5.67)％,NS组(7.35±1.08)％;t=26.18,P＜0.05].(2)胃排空实验结果显示,NAc微量注射orexin-A以及电刺激LHA均可使胃排空的速度显著升高,SB334867预处理可阻断该作用[电刺激LHA:NS+SS组(71.18±17.78)％,NS+ES组(132.23±31.18)％;t=4.81,P＜0.05].(3)胃分泌实验结果显示,NAc微量注射orexin-A和电刺激LHA均可使胃酸分泌量显著增多,且这种作用可被NAc中预注射SB334867阻断[给予orexin-A后90 min:orexin-A组(100.18±23.23),NS组(39.23±7.69);t=7.05,P＜0.05].(4) CPP实验结果显示,NAc微量注射orexin-A或电刺激LHA后,大鼠在放置巧克力的隔间里时间更久,而这种现象可被NAc中SB334867预处理阻断[电刺激LHA:NS+SS组(36.23±6.23)％,NS+ES组(53.36±6.66)％;t=5.31,P＜0.05].结论 从LHA到NAc存在orexin神经通路,这条通路可能对胃功能和奖赏性摄食具有调节作用.

摘要： 目的:探讨精神分裂症患者血浆肽食欲素-A(Orexin-A)表达水平及其与奥氮平治疗后体重增加的相关性.方法:选取北京回龙观医院2017年8月至2019年1月收治的精神分裂症患者76例(观察组)及同期入院体检的健康志愿者40例(对照组),均取晨空腹静脉血,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)试验检测血浆Orexin-A水平,比较观察组中不同认知功能障碍、不同症状患者的Orexin-A水平;同时,随机选择36例首发精神分裂症患者持续应用奥氮平(20 mg/d)治疗,于治疗前、治疗后10个月测定血浆Orexin-A水平及体重指数(Ibm)、血清甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、简明精神病评定量表(BPRS)总分,分析各指标相关性.结果:观察组未用药时血浆Orexin-A水平高于对照组(P＜0.01);随精神分裂症患者认知功能障碍加重,其Orexin-A水平升高,且焦虑犹豫因子、缺乏活力因子、思维障碍因子得分重度患者中Orexin-A水平较轻度患者高(P＜0.01);36例首发精神分裂症患者经奥氮平治疗后10个月Orexin-A水平低于治疗前,而Ibm、TG、LDL-C明显升高,HDL-C下降(P＜0.01),BPRS总分降低(P＜0.01);相关性分析表明,Orexin-A水平与Ibm、LDL-C呈负相关关系(r=-0.298、-0.263,P＜0.05),Orexin-A水平与BPRS总分呈正相关关系(r=0.414,P＜0.05).结论:血浆Orexin-A在精神分裂症中呈高表达,血浆Orexin-A水平可推测患者认知功能障碍程度,Orexin-A降低可能是奥氮平治疗精神分裂症患者后体重增加的原因.

摘要： 目的:研究orexin-A对脊髓腹角神经元基本电生理参数及烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)的作用.方法:使用7～12 d的新生SD大鼠.麻醉后,将含有腰骶膨大的脊髓分离并切片.用木瓜蛋白酶(papain,0.18 g/30 mL人工脑脊液消化切片并孵育40 min.显微镜下选取腹角,使用抛光的巴斯德吸管进行神经元的急性机械分离.对贴壁的健康神经元进行穿孔膜片钳记录.结果:①急性分离的脊髓腹角神经元状态良好,具有形状多样的胞体和完整的突起;②9个急性分离的脊髓腹角神经元有自发动作电位;③持续灌流orexin-A(OXA)2 min后,在5例细胞记录到4个脊髓腹角神经元的自发动作电位放电频率增加了(63.64±5.25)％,幅度等参数无明显变化;④在15个神经元,有12例细胞给予0.3 mmol/L尼古丁诱导出内向电流,幅度为(142.97±75.02)pA,用100 nmol/L OXA进行2 min的预处理,可显著抑制电流幅度至(69.07±61.07)pA(P<0.001),抑制率为(54.75±22.62)％;⑤在9个神经元中有7例细胞给予尼古丁诱导的电流幅度为(129.31±69.38)pA,将100 nmol/L OXA共同施用于神经元,尼古丁诱导的电流幅度降为(68.61±34.98)pA,在此基础上,通过施用orexin-1受体(OX1R)拮抗剂SB334867(10μmol/L)2 min后可阻断OXA对尼古丁诱导电流的抑制作用,电流幅值为(93.46±56.45)pA.因此,SB334867可完全取消OXA对尼古丁电流的抑制作用.但对于另两例神经元,SB334867并未阻断OXA的抑制作用.结论:Orexin-A可能通过OX1R对脊髓大部分腹角神经元的尼古丁电流具有抑制作用,但不能排除orexin-2受体(OX2R)也参与OXA作用的可能性.