多能性

摘要： 背景:干细胞是机体内具有强大自我更新能力与多向分化潜能的特殊细胞群体.谷胱甘肽作为干细胞内的重要巯基化合物,不仅参与了干细胞的活性氧代谢,同时在干细胞的自我更新与增殖、干细胞的衰老、干细胞多向分化潜能的维持、干细胞分化的调控等方面均发挥着重要作用.目的:探究谷胱甘肽在干细胞中的重要作用.方法:由第一作者在2020年4月以"(glutathione OR gsh)AND stem cell"为英文关键词检索题名/摘要,以"谷胱甘肽,干细胞"为中文关键词检索任意字段,搜索2000至2020期间中国知网全文数据库、维普全文数据库、万方全文数据库和PubMed数据库收录的相关文献,共检索到相关中文文献358篇,英文文献405篇.在删除重复及不符合入选标准的文献后,最终纳入86篇文献进行分析.结果 与结论:通过梳理回顾近些年来谷胱甘肽与干细胞的相关研究,发现谷胱甘肽主要在维持干细胞的干性、调控干细胞的分化等方面发挥着重要作用.同时,谷胱甘肽对肿瘤干细胞的作用已经得到验证,为未来还原型谷胱甘肽治疗肿瘤提供了更多证据支持.

摘要： 背景:干细胞是机体内具有强大自我更新能力与多向分化潜能的特殊细胞群体。谷胱甘肽作为干细胞内的重要巯基化合物,不仅参与了干细胞的活性氧代谢,同时在干细胞的自我更新与增殖、干细胞的衰老、干细胞多向分化潜能的维持、干细胞分化的调控等方面均发挥着重要作用。目的:探究谷胱甘肽在干细胞中的重要作用。方法:由第一作者在2020年4月以"(glutathione OR gsh) AND stem cell"为英文关键词检索题名/摘要,以"谷胱甘肽,干细胞"为中文关键词检索任意字段,搜索2000至2020期间中国知网全文数据库、维普全文数据库、万方全文数据库和PubMed数据库收录的相关文献,共检索到相关中文文献358篇,英文文献405篇。在删除重复及不符合入选标准的文献后,最终纳入86篇文献进行分析。结果与结论:通过梳理回顾近些年来谷胱甘肽与干细胞的相关研究,发现谷胱甘肽主要在维持干细胞的干性、调控干细胞的分化等方面发挥着重要作用。同时,谷胱甘肽对肿瘤干细胞的作用已经得到验证,为未来还原型谷胱甘肽治疗肿瘤提供了更多证据支持。

摘要： 日前,西北农林科技大学动物医学院干细胞与动物疾病团队等成功破译维持干细胞“多能性”的核心,鉴定出三个在胎盘哺乳动物中高度保守的超级增强子(SE-SOX2、SE-PIM1、SE-FGFR1)。相关成果《胎盘动物超级增强子维持干细胞多能性》在《美国科学院院报》(PNAS)在线发表。研究表明,超级增强子在哺乳动物中快速进化,并利用基因编辑技术证实SE-SOX2、SE-PIM1、SE-FGFR1是维持胎盘动物干细胞多能性所必须的三个保守性超级增强子。

摘要： 背景:通过小分子化合物、质粒转染等方法可成功诱导出无病毒载体整合的诱导多能干细胞。与胚胎干细胞相似,诱导多能干细胞可向造血祖细胞进行自由分化,但外源性因子的转入及不同来源人体细胞是否对诱导多能干细胞的分化及诱导造血祖细胞产生影响,目前尚未清楚。目的:比较人不同细胞来源诱导多能干细胞和胚胎干细胞拟胚体的基因表达差异,为诱导多能干细胞的临床转化进行探索。方法:分别选用羊水细胞及尿细胞来源诱导多能干细胞和人胚胎干细胞进行诱导分化。收集分化不同时间点的拟胚体,检测多能性基因Oct4、Sox2、Nanog以及内胚层标记基因GATA4、中胚层标记基因MSX1、外胚层标记基因PAX6、造血干细胞标记基因CD34和CD43的表达。结果与结论:①羊水细胞来源诱导多能干细胞拟胚体在培养第8天检测不到Oct4、Sox2、Nanog表达,尿细胞来源诱导多能干细胞和胚胎干细胞拟胚体可维持表达至第16天;②羊水细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中GATA4、MSX1、PAX6表达量峰值出现在第4天,持续表达到第8-12天,而其他2种细胞拟胚体中GATA4、MSX1、PAX6表达量峰值出现在第4-8天,并且可持续表达至第12-16天;三胚层标记基因在尿细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中的表达量明显高于其他2种细胞拟胚体;③在羊水细胞、尿细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中造血干细胞比率在第12天达峰值,而胚胎干细胞拟胚体中造血干细胞比率在第4天达峰值,尿细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中造血干细胞比率高于其他2种细胞拟胚体;④人不同细胞来源诱导多能干细胞及胚胎干细胞拟胚体分化培养过程中均具有全能性及三胚层分化能力但各具特点。尿细胞来源诱导多能干细胞或许更适合替代胚胎干细胞成为体外研究造血细胞分化的模型。

摘要： 背景:通过小分子化合物、质粒转染等方法可成功诱导出无病毒载体整合的诱导多能干细胞.与胚胎干细胞相似,诱导多能干细胞可向造血祖细胞进行自由分化,但外源性因子的转入及不同来源人体细胞是否对诱导多能干细胞的分化及诱导造血祖细胞产生影响,目前尚未清楚.目的:比较人不同细胞来源诱导多能干细胞和胚胎干细胞拟胚体的基因表达差异,为诱导多能干细胞的临床转化进行探索.方法:分别选用羊水细胞及尿细胞来源诱导多能干细胞和人胚胎干细胞进行诱导分化.收集分化不同时间点的拟胚体,检测多能性基因Oct4、Sox2、Nanog以及内胚层标记基因GATA4、中胚层标记基因MSX1、外胚层标记基因PAX6、造血干细胞标记基因CD34和CD43的表达.结果 与结论:①羊水细胞来源诱导多能干细胞拟胚体在培养第8天检测不到Oct4、Sox2、Nanog表达,尿细胞来源诱导多能干细胞和胚胎干细胞拟胚体可维持表达至第16天;②羊水细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中GATA4、MSX1、PAX6表达量峰值出现在第4天,持续表达到第8-12天,而其他2种细胞拟胚体中GATA4、MSX1、PAX6表达量峰值出现在第4-8天,并且可持续表达至第12-16天;三胚层标记基因在尿细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中的表达量明显高于其他2种细胞拟胚体;③在羊水细胞、尿细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中造血干细胞比率在第12天达峰值,而胚胎干细胞拟胚体中造血干细胞比率在第4天达峰值,尿细胞来源诱导多能干细胞拟胚体中造血干细胞比率高于其他2种细胞拟胚体;④人不同细胞来源诱导多能干细胞及胚胎干细胞拟胚体分化培养过程中均具有全能性及三胚层分化能力但各具特点.尿细胞来源诱导多能干细胞或许更适合替代胚胎干细胞成为体外研究造血细胞分化的模型.

摘要： 目的 在人胚胎干细胞(hESCs)中建立一种可行的CRISPR文库筛选方法,筛选参与维持hESCs多能性的顺式作用元件.方法 将诱导型Cas9蛋白表达元件插入hESC基因组中,构建诱导型Cas9稳定表达株(iCas9-hESC).通过分析已发表的hESCs中的染色质互作信息,确定可能参与多能性基因调控的顺式作用元件,并以此来构建双gRNA CRISPR敲除文库.使用CIRSPR文库在低感染复数情况下感染iCas9-hESC,诱导Cas9蛋白表达,对细胞进行基因编辑.以OCT4的表达水平作为衡量多能性的标准,对基因编辑后的细胞进行OCT4的流式抗体染色与分析,确定顺式元件敲除后是否影响到hESC的多能性.结果 成功构建iCas9-hESC,且该细胞仍保持多能性状态.构建顺式元件的CRISPR敲除文库,成功感染目的细胞.对文库感染后的细胞进行OCT4表达水平的流式分析,发现基因编辑后的细胞确实存在多能性下降的部分群体.结论 建立了在hESC中通过CRISPR文库筛选参与维持多能性顺式作用元件的可行性方案.

摘要： 成年小鼠胸腺中存在上皮祖细胞。Nanog(Homeobox transcription factor)和sex determining region Y-box2(Sox2)作为干细胞转录因子,在维持祖细胞的多能性中至关重要。本实验探究Sox2和Nanog在D-半乳糖急性致衰和自然衰老昆明小鼠胸腺中的表达以及五倍子酸干预对其的影响。免疫组织化学和qRT-PCR分析表明,Sox2和Nanog的表达在自然衰老和急性致衰小鼠胸腺中逐渐下降。

摘要： 目的 基于机器学习的方法整合多组学数据在小鼠胚胎干细胞(mESCs)中鉴定潜在的与干细胞自我更新及多能性相关的基因.方法 收集了mESCs的多组学数据,包括转录组、组蛋白修饰、染色质可及性、转录因子及结构蛋白在染色质上的结合等信息,比较了已知的干细胞自我更新及多能性基因与其他基因的信号差异.整合这些多组学数据,基于包含随机森林在内的多种机器学习分类器构建预测模型并进行了5折的交叉验证.输入的样本中2/3作为训练集用于训练模型,剩余的1/3作为测试集用于独立测试来衡量模型的表现.最终通过基因功能注释和细胞活力测定、克隆形成测定及细胞周期分析等细胞功能实验对模型预测的结果进行了验证.结果 已知的多能性与自我更新基因在多组学数据中有显著区别于随机基因的特征.使用这些数据的算法中随机森林构建的模型具有最好的表现,交叉验证的曲线下面积(AUC)为0.883±0.018,独立测试的AUC为0.880±0.028.该模型鉴定出了893个潜在的自我更新与多能性相关基因,这些基因在基因功能注释上与已知基因类似,而敲低其中新发现的基因Cct6a会导致mESCs的细胞活性显著降低(P<0.0001),形成细胞克隆的数目显著减少(P<0.01),处于G1期的细胞数量显著增加(P<0.01)而处于S期的细胞数量显著减少(P<0.05).另外,敲低Cct6a基因的mESCs无法被碱性磷酸酶染色.结论 基于多组学数据构建的机器学习模型可以预测潜在的自我更新与多能性相关调控因子且具有较好的效果.通过构建的模型发现了潜在的自我更新与多能性调控基因如Cct6a并进行了实验验证.

摘要： 绵羊是我国农牧业生产中的重要家畜,建立绵羊诱导性多能干细胞系(induced pluripotent stem cells,iPSCs)在家畜培育后代及再生领域等方面具有特别重要的作用。本实验通过电转8个转录因子(oct4,sox2,klf4,c-myc,lin28,nanog,SV40大T和hTERT)重编程绵羊成体成纤维细胞获得iPSCs。依赖血清+白血病抑制因子(lif)+Doxycycline共建立雄性绵羊42个iPSCs系,建系效率为41.7%。iPSCs能正常冻存以及解冻。对其多能性进行一系列检测,并且把体内外分化作为重点研究对象,探究其分化能力。

摘要： 021年5月14日,浙江大学纪俊峰教授团队在《自然·通讯》(Nature Communications)发表了题为"PHC1 maintains pluripotency by organizing genome-wide chromatin interactions of the Nanog locus"的研究论文(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8121881),发现多梳家族(polycomb group)蛋白PHC1一方面通过多梳抑制复合物1(polycomb repressive complex 1)依赖的功能沉默发育分化基因.

摘要： 本文介绍了骨髓基质细胞多能性的研究进展，研究了骨髓基质细胞的基本特征、分离与培养，介绍了骨髓基质细胞多能性以及细胞多能性产生的机制，讨论了骨髓基质细胞的应用及其前景展望。

摘要： 目的：基于小鼠Oct4-GFP诱导性多潜能干细胞(iPS细胞)制作嵌合体小鼠以体内验证所建立的Oct4-GFP iPS细胞系的多能性。方法：借助显微操作仪将Oct4-GFP iPS细胞注射入3.5天的ICR小鼠囊胚中，每个囊胚移植10-15个iPS细胞，待小鼠出生后根据毛色嵌合判断是否获得了嵌合体小鼠。结果：从出生的小鼠中共获得3只有毛色嵌合的嵌合体小鼠。结论：基于我们所建立的Oct4-GFP iPS细胞系成功制作了嵌合体小鼠，从而体内验证了所建立的Oct4-GFP iPS细胞系的多能性。

摘要： 体细胞克隆动物和成体干细胞再分化、转分化现象都证明动物体细胞基因组的等同性和分化可逆性,因此建立适宜的培养环境,将可能使在体外实现体细胞重编程而建立多潜能干细胞系.文章概述了相关研究进展情况,并分析了研究策略和可行性.文章认为,胚胎干细胞和成体干细胞的研究进展及其在干细胞形成的细胞学基础上所取得的不断深入的认识,为在实践上探索体细胞的体外重编程提供了许多可供借鉴的研究策略,无论在理论上还是技术方法上,通过体细胞体外重编程建立多能干细胞已具备实践可行性.体细胞体外重编程建立多能干细胞的研究具有重大的潜在应用价值和广阔的科学机遇.

摘要： 体细胞克隆动物和成体干细胞再分化、转分化现象都证明动物体细胞基因组的等同性和分化可逆性,因此建立适宜的培养环境,将可能使在体外实现体细胞重编程而建立多潜能干细胞系.文章概述了相关研究进展情况,并分析了研究策略和可行性.文章认为,胚胎干细胞和成体干细胞的研究进展及其在干细胞形成的细胞学基础上所取得的不断深入的认识,为在实践上探索体细胞的体外重编程提供了许多可供借鉴的研究策略,无论在理论上还是技术方法上,通过体细胞体外重编程建立多能干细胞已具备实践可行性.体细胞体外重编程建立多能干细胞的研究具有重大的潜在应用价值和广阔的科学机遇.

摘要： 体细胞克隆动物和成体干细胞再分化、转分化现象都证明动物体细胞基因组的等同性和分化可逆性,因此建立适宜的培养环境,将可能使在体外实现体细胞重编程而建立多潜能干细胞系.文章概述了相关研究进展情况,并分析了研究策略和可行性.文章认为,胚胎干细胞和成体干细胞的研究进展及其在干细胞形成的细胞学基础上所取得的不断深入的认识,为在实践上探索体细胞的体外重编程提供了许多可供借鉴的研究策略,无论在理论上还是技术方法上,通过体细胞体外重编程建立多能干细胞已具备实践可行性.体细胞体外重编程建立多能干细胞的研究具有重大的潜在应用价值和广阔的科学机遇.

摘要： 体细胞克隆动物和成体干细胞再分化、转分化现象都证明动物体细胞基因组的等同性和分化可逆性,因此建立适宜的培养环境,将可能使在体外实现体细胞重编程而建立多潜能干细胞系.文章概述了相关研究进展情况,并分析了研究策略和可行性.文章认为,胚胎干细胞和成体干细胞的研究进展及其在干细胞形成的细胞学基础上所取得的不断深入的认识,为在实践上探索体细胞的体外重编程提供了许多可供借鉴的研究策略,无论在理论上还是技术方法上,通过体细胞体外重编程建立多能干细胞已具备实践可行性.体细胞体外重编程建立多能干细胞的研究具有重大的潜在应用价值和广阔的科学机遇.

摘要： 体细胞克隆动物和成体干细胞再分化、转分化现象都证明动物体细胞基因组的等同性和分化可逆性,因此建立适宜的培养环境,将可能使在体外实现体细胞重编程而建立多潜能干细胞系.文章概述了相关研究进展情况,并分析了研究策略和可行性.文章认为,胚胎干细胞和成体干细胞的研究进展及其在干细胞形成的细胞学基础上所取得的不断深入的认识,为在实践上探索体细胞的体外重编程提供了许多可供借鉴的研究策略,无论在理论上还是技术方法上,通过体细胞体外重编程建立多能干细胞已具备实践可行性.体细胞体外重编程建立多能干细胞的研究具有重大的潜在应用价值和广阔的科学机遇.

摘要： 人胚胎干细胞(hES细胞)具有其他哺乳动物ES细胞的一般特性,但也有部分差异.本文对hES细胞的研究进展及其应用前景等作一综述.

摘要： 人胚胎干细胞(hES细胞)具有其他哺乳动物ES细胞的一般特性,但也有部分差异.本文对hES细胞的研究进展及其应用前景等作一综述.

摘要： 人胚胎干细胞(hES细胞)具有其他哺乳动物ES细胞的一般特性,但也有部分差异.本文对hES细胞的研究进展及其应用前景等作一综述.

摘要： 提供了一种诱导细胞免疫治疗用T细胞的方法，包括以下步骤：(1)提供具有编码期望抗原特异性T细胞受体的基因并且敲除了Rag1和/或Rag2基因的人类多能干细胞，以及(2)从步骤(1)的所述多能干细胞诱导T细胞。还提供了一种使用细胞免疫用T细胞的细胞免疫治疗方法和一种细胞免疫治用iPS细胞银行。

摘要： 本发明提供利用PDGF‑C促进干细胞多能性的培养方法，包括：1)直接在干细胞培养基中添加PDGF‑CC重组蛋白；2)表达PDGF‑C的质粒或病毒；3)在诱导性过表达PDGF‑C的干细胞中通过加入强力霉素诱导PDGF‑C的表达。PDGF‑C可以通过与PDGFRα受体结合，激活PDGFR通路，促进干细胞里多能性因子的表达，从而达到维持干细胞多能性的效果。

摘要： 本发明提供诱导的多能性干细胞的评价方法，其包括：提供培养的诱导的多能性干细胞的步骤，测定提供的诱导的多能性干细胞中的具有异常核酸结构的细胞器的自发频率的步骤，及识别自发频率为参考值以下的诱导的多能性干细胞、和自发频率超过参考值的诱导的多能性干细胞的步骤，以及诱导的多能性干细胞的选择方法，其进一步包括选择自发频率为参考值以下的诱导的多能性干细胞的步骤。并且，本发明提供诱导的多能性干细胞的制备方法，其包括：提供建立和培养的诱导的多能性干细胞的步骤，测定提供的诱导的多能性干细胞中的具有异常核酸结构的细胞器的自发频率的步骤，识别自发频率为参考值以下的诱导的多能性干细胞、和自发频率超过参考值的诱导的多能性干细胞的步骤，及选择自发频率为参考值以下的诱导的多能性干细胞的步骤。

摘要： 本发明涉及一种鉴定人诱导多能干细胞多能性基因的引物组合物、试剂盒及检测方法，其引物组合物包括A引物组、B引物组和内参引物，所述A引物组包含扩增人诱导多能干细胞内源基因Oct4、Sox2和Nanog的引物对中的一种或多种，所述B引物组为扩增Oct4、Sox2和Nanog总基因的引物对的一种或多种，所述内参引物为扩增GAPDH基因的引物。具体的是从多能干细胞中提取核糖核酸(RNA)，应用实时多聚酶链式反应(Real‑Time PCR)技术对其多能性基因进行定量检测以鉴定内源和外源多能性基因表达差异的检测方法和试剂盒。采用本发明的鉴定方法操作简单、成本低，且准确性和灵敏度高。

摘要： 本发明在由干细胞向皮肤源性多能性前体细胞的分化诱导中，提高皮肤源性多能性前体细胞的收率。一种皮肤源性多能性前体细胞的制作方法，其包括在选自层粘连蛋白及其片段中的至少1种的存在下培养神经嵴干细胞，使其分化为皮肤源性多能性前体细胞的步骤。该层粘连蛋白为选自层粘连蛋白111、层粘连蛋白121、层粘连蛋白332、层粘连蛋白421、层粘连蛋白511和层粘连蛋白521、以及它们的突变体中的至少1种。

摘要： 本发明公开了多能性干细胞的非致瘤性增殖。具体地，本发明提供一种在包含人类脐带间质干细胞(HUCMSCs)的培养基中增殖人类胚胎干(hES)细胞的方法，其中，该培养基作为滋养层。在培养基中，该人类胚胎干(hES)细胞维持胚胎干细胞的特性，如多能性、无限制的未分化增殖及正常的染色体组型。本发明还提供一种该人类胚胎干(hES)细胞的非致瘤性增殖方法，且该方法不会形成畸胎瘤。

摘要： 本发明涉及诱导性表达多能性维持基因的有蹄类动物细胞系及其构建。本发明建立了利用可诱导系统(tet-on)表达维持多能性关键基因oct4的有蹄类动物成纤维细胞系，该细胞系具有病毒拷贝数低，oct4表达上调明显，细胞单细胞来源纯度高的特点。利用该细胞系作为核移植的供体细胞，用药物强力霉素诱导oct4的表达，可帮助核移植后卵细胞的重编程，以最终达到建立有蹄类动物胚胎干细胞的目的，进行各种转基因动物的育种。

摘要： 本发明提供一种在包含人类脐带间质干细胞(HUCMSCs)的培养基中增殖人类胚胎干(hES)细胞的方法，其中，该培养基作为滋养层。在培养基中，该人类胚胎干(hES)细胞维持胚胎干细胞的特性，如多能性、无限制的未分化增殖及正常的染色体组型。本发明还提供一种该人类胚胎干(hES)细胞的非致瘤性增殖方法，且该方法不会形成畸胎瘤。

摘要： 本发明涉及参考品细胞用于检验多能性基因表达水平的用途，其中所述参考品细胞选自所述多能性基因的表达量低且稳定的细胞优选地，所述参考品细胞选自HFF细胞，任选地，所述多能性基因选自OCT4、NANOG。本发明还涉及OCT4、NANOG的引物和探针。本发明还涉及多能性基因表达水平检验方法。本发明进一步涉及所述检验方法在hPSC残留水平检验、hPSC分化过程表征中的用途。本发明的方法具有简便、稳定、灵敏度高、适用范围广、可及性强等优点，因此易于标准化，能够为细胞多能性基因表达水平的检验提供统一标准。

摘要： 本发明公开了一种牛诱导扩展多能性成体干细胞、建系方法及培养液，通过从牛成纤维体细胞中转基因、诱导培养得到，并能够在体外稳定传代培养。该干细胞具有全能性、稳定性和安全性，能在体内外向胚胎和胚胎外组织分化，可用于育种繁育、基因编辑、动物克隆、医学模型、药物开发载体和诱导生产牛生殖配子等多种生命科学以及医学领域的应用。