Nanog

摘要： 背景:miR-7在胃癌等多种肿瘤组织中表达下调,主要发挥抑癌作用.现已证实,miR-7能够影响胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭等多种细胞生物学功能.然而,目前有关miR-7与胃癌细胞干样特性关系的研究较少,机制尚不明确.目的:探讨miR-7-5p对人胃癌SGC-7901细胞干样特性的影响.方法:以胃癌细胞株SGC-7901为模型,用NC、miR-7-5p mimics、inhibitor NC及miR-7-5p inhibitor转染细胞,转染48 h后采用倒置荧光显微镜观察转染效率,RT-qPCR方法检测miR-7-5p、Nanog和Sox2 mRNA表达水平,采用成球实验和软琼脂集落实验检测细胞成球能力和软琼脂集落形成能力,流式细胞术检测CD24+CD44+细胞亚群比例.结果 与结论:①与inhibitor NC或NC组比较,转染miR-7-5p inhibitor或mimics后,胃癌SGC7901细胞中miR-7-5p的表达量显著降低或升高(P<0.01);②与NC组比较,miR-7-5p mimics组成球数量和软琼脂集落形成数量明显减少(P<0.05,P<0.01),而miR-7-5p inhibitor组成球数量和集落形成数量则明显高于miR-7-5p inhibitor NC组(P<0.05,P<0.01);③miR-7-5p mimics组CD24+CD44+细胞比例明显低于NC组(P<0.01),而miR-7-5p inhibitor组CD24+CD44+细胞的比例显著高于inhibitor NC组(P<0.01);④miR-7-5p mimics组Nanog和Sox2 mRNA表达明显低于NC组,miR-7-5p inhibitor组Nanog和Sox2 mRNA表达显著高于inhibitor NC组(P<0.05,P<0.01);⑤结果表明,miR-7-5p可以通过减弱胃癌细胞的成球能力、软琼脂集落形成能力以及降低胃癌细胞中CD24+CD44+细胞亚群比例等方式抑制胃癌细胞的干样特性,其机制可能与调控干性相关基因Nanog和Sox2的表达有关.

摘要： 成年小鼠胸腺中存在上皮祖细胞。Nanog(Homeobox transcription factor)和sex determining region Y-box2(Sox2)作为干细胞转录因子,在维持祖细胞的多能性中至关重要。本实验探究Sox2和Nanog在D-半乳糖急性致衰和自然衰老昆明小鼠胸腺中的表达以及五倍子酸干预对其的影响。免疫组织化学和qRT-PCR分析表明,Sox2和Nanog的表达在自然衰老和急性致衰小鼠胸腺中逐渐下降。

摘要： 目的构建p53-EGFP、Nanog-mcherry双荧光标记细胞系,对小鼠胚胎干细胞内p53、Nanog蛋白表达水平进行实时、定量追踪。在此基础上,初步探讨p53在小鼠胚胎干细胞中的作用。方法利用CRISPR-Cas9基因敲入系统分别将外源荧光蛋白表达基因插入到p53、Nanog基因组终止密码子后方,实现p53-EGFP、Nanog-mcherry融合表达。通过荧光强度分析,克隆形成能力检测等方法探索p53在小鼠胚胎干细胞中的作用。结果本研究成功构建了小鼠胚胎干细胞p53-EGFP、Nanog-mcherry双荧光标记细胞系,进一步发现p53蛋白表达在小鼠胚胎干细胞间具有异质性,且能调控Nanog蛋白表达的异质性。此外,p53蛋白表达量与小鼠胚胎干细胞克隆形成能力有关。结论基于CRISPR-Cas9基因敲入技术构建的双荧光标记细胞系中荧光强度的变化可以在活细胞状态下代表小鼠胚胎干细胞内相应蛋白表达水平,p53可通过其在小鼠胚胎干细胞群体间异质性表达参与小鼠胚胎干细胞转录调控网络中,并一定程度影响其自我更新能力。

摘要： 目的 探讨二甲双胍对宫颈癌干细胞增殖及放化疗敏感性的影响.方法 分离、培养宫颈癌干细胞并进行鉴定.将第3代宫颈癌干细胞随机分为6组,对照组:不做任何处理;二甲双胍组:用20 mmol/L二甲双胍处理72 h;放疗组:用8 Gy的60-钴γ射线照射72 h;二甲双胍+放疗组:用20 mmol/L二甲双胍处理的同时用8 Gy的60-钴γ射线照射,共72 h;化疗组:用20 nmol/L顺铂处理72 h;二甲双胍+化疗组:用20 mmol/L二甲双胍和20 nmol/L顺铂处理72 h.MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western印迹检测细胞中Nanog蛋白的表达.结果 人宫颈鳞癌SiHa细胞表达CD133和Oct4,具有宫颈癌干细胞特性;宫颈癌干细胞的存活率随着二甲双胍作用浓度的升高和时间延长而降低(P0.05).结论 二甲双胍可抑制宫颈癌干细胞的增殖并提高放化疗敏感性,但不影响宫颈癌干细胞的干性.

摘要： 021年5月14日,浙江大学纪俊峰教授团队在《自然·通讯》(Nature Communications)发表了题为"PHC1 maintains pluripotency by organizing genome-wide chromatin interactions of the Nanog locus"的研究论文(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8121881),发现多梳家族(polycomb group)蛋白PHC1一方面通过多梳抑制复合物1(polycomb repressive complex 1)依赖的功能沉默发育分化基因.

摘要： 2021年1月6日,胡新央教授与王本副教授团队在《先进科学》(Advanced Science)在线发表了题为"Surface-anchored nanogel coating endows stem cells with stress resistance and reparative potency via turning down the cytokine-receptorbinding pathways"的研究论文(https://doi.org/10.1002/advs.202003348)。

摘要： 为高效制备可溶性人源Nanog蛋白,降低Nanog蛋白的使用成本.该研究通过分子克隆技术构建重组大肠杆菌(pET32a-Nanog),利用IPTG诱导进行可溶性融合表达.采用镍离子柱亲和层析法纯化产物并将纯化后产物进行肠激酶酶切后得到目的蛋白,Western blot鉴定该蛋白抗体结合的特异性并进一步优化发酵条件.结果 表明,原核表达载体pET32a-Nanog构建成功,可在大肠杆菌中与硫氧还蛋白融合表达,融合蛋白经肠激酶酶切后得到相对分子质量约为38 kDa的蛋白,Western blot鉴定该蛋白可与Nanog抗体特异性结合.在摇瓶培养条件下,得到最优发酵条件是诱导温度37°C、IPTG浓度0.2 mmol/L、甘油为补料碳源;15 L发酵罐上进一步优化溶氧条件及温度控制方式,最终在溶氧设置在30％条件下,37°C(诱导期间30°C维持30 min)发酵12 h后得到最高Nanog产量1 386.4 mg/L,经蛋白纯化后纯度达到90％,为后续Nanog多克隆抗体的制备和基础医学实验研究奠定了基础.

摘要： 本发明涉及调节NANOG的表达和/或功能的反义寡核苷酸，尤其是通过靶向NANOG的天然反义多核苷酸。本发明还涉及这些反义寡核苷酸的鉴定和它们在治疗NANOG表达相关的疾病和病症中的用途。

摘要： 本发明公开了用VP16替代Nanog转录激活域CD2的Nanog基因突变体、携带其的载体、构建方法及其用途。Nanog是一个可以使小鼠胚胎干细胞在不依赖于LIF(白血病抑制因子)的情况下维持自我更新能力的转录因子。将Nanog的转录激活域CD替换成病毒中的一个已知更强有力的转录激活域VP16，可使Nanog失去维持胚胎干细胞自我更新能力的作用，并抑制内源Nanog表达从而促进细胞向各个方向的分化；该突变体还能使Nanog对于其报告基因p5N的激活倍数高出几十倍，使得检测Nanog的活性更加容易。该替换重组突变体的构建途径，对研究其它结构域及其它转录因子提供了借鉴意义。

摘要： 本发明涉及一种源自羊水胎儿的间充质干细胞的培养基，更具体地，涉及一种用于促进毛发生长或预防脱发的组合物，其包含其中重编程因子Nanog过表达的源自羊水胎儿的间充质干细胞的培养基作为活性成分。另外，本发明涉及一种用于制备组合物的方法，其包括以下步骤：在条件培养基中培养其中引入Nanog的源自羊水胎儿的间充质干细胞；以及收集培养基。根据本发明的条件培养基组合物表现出毛发生长的促进效果，因此能够用作用于促进毛发生长的化妆品组合物和药物组合物。

摘要： 本发明涉及调节NANOG的表达和/或功能的反义寡核苷酸，尤其是通过靶向NANOG的天然反义多核苷酸。本发明还涉及这些反义寡核苷酸的鉴定和它们在治疗NANOG表达相关的疾病和病症中的用途。

摘要： 本发明公开了用VP16替代Nanog转录激活域CD2的Nanog基因突变体、携带其的载体、构建方法及其用途。Nanog是一个可以使小鼠胚胎干细胞在不依赖于LIF(白血病抑制因子)的情况下维持自我更新能力的转录因子。将Nanog的转录激活域CD替换成病毒中的一个已知更强有力的转录激活域VP16，可使Nanog失去维持胚胎干细胞自我更新能力的作用，并抑制内源Nanog表达从而促进细胞向各个方向的分化；该突变体还能使Nanog对于其报告基因p5N的激活倍数高出几十倍，使得检测Nanog的活性更加容易。该替换重组突变体的构建途径，对研究其它结构域及其它转录因子提供了借鉴意义。

摘要： 本发明涉及通过将位于Nanog保守结构域Homeobox(序列见SEQ ID NO：2)中的核定位信号1和/或2突变成无关序列，破坏其功能，来得到抑制型Nanog突变体，其中所述突变体仍然具有与野生型Nanog形成异源二聚体的能力，并且抑制了野生型Nanog的转录激活功能，作为抑制型突变体而发挥功能，因此可能作为一个非常有用的抑制型工具来研究小鼠Nanog的功能。

摘要： 本发明涉及一种NANOG Ser68的抗体，以及抑制剂和应用。本发明首次发现了负责NANOG降解的蛋白泛素化酶SPOP，SPOP介导的NANOG降解通过AMPK‑BRAF信号对NANOG Ser68上的磷酸化而受到控制，从而也阻断了SPOP对NANOG的相互作用。针对此特性，本发明首次研发了NANOG Ser68的抗体，可用于制备肿瘤早期筛查和诊断的试剂或用于制备抗肿瘤药物。本发明所提供的磷酸化介导的NANOG稳定性控制癌干细胞干性的调节机制将有助于识别新的药物靶点，改善针对肿瘤发生、复发和转移的治疗策略。

摘要： 本发明涉及用于毛发生长的组合物及其制备方法，是通过从过量表达去分化因子Nanog的胎儿来源间充质干细胞在羊水中的培养物中分离外泌体而进行制备的。

摘要： 本发明涉及一种源自羊水胎儿的间充质干细胞的培养基，更具体地，涉及一种用于促进毛发生长或预防脱发的组合物，其包含其中重编程因子Nanog过表达的源自羊水胎儿的间充质干细胞的培养基作为活性成分。另外，本发明涉及一种用于制备组合物的方法，其包括以下步骤：在条件培养基中培养其中引入Nanog的源自羊水胎儿的间充质干细胞；以及收集培养基。根据本发明的条件培养基组合物表现出毛发生长的促进效果，因此能够用作用于促进毛发生长的化妆品组合物和药物组合物。

摘要： 本发明提供了一种用于检测间充质干细胞体外传代过程中Nanog基因表达量的引物，包括Nanog‑F ATGCCTGGTGAACCCGAC和Nanog‑R AGGACTGGATGTTCTGGGT，以及β‑actin‑F CACGAAACTACCTTCAACTCC和β‑actin‑R CATACTCCTGCTTGCTGATC。检测方法包括以下步骤：(1)提取间充质干细胞，并传代培养；(2)提取各代次间充质干细胞的总RNA，进行RT‑PCR扩增；(3)使用所述引物对扩增基因进行实时荧光定量PCR扩增。该引物特异性好、准确性高、灵敏度高，检测方法简单，可检测出基因表达量的微小变化。