tau蛋白磷酸化

摘要： 目的探讨七氟醚预处理对大鼠海马区Tau蛋白磷酸化及5-羟色胺含量表达的影响。方法将30只24个月龄雄性wister大鼠随机分为3组:S1组大鼠吸入1.5%七氟醚,S2组大鼠吸入3.0%七氟醚,C组吸入纯氧作为对照。麻醉时保留大鼠自主呼吸、体温在(37±1)°C,通过使用气体监护仪监测麻醉箱内O2、CO_(2)及麻醉气体浓度并使其保持稳定。C组在手术后第1天处死,七氟醚S1及S2组各10只大鼠在实验后第2天做断头处死。通过免疫组化染色检测Tau蛋白Thr262和Ser369位点磷酸化的表达水平,同时测定参与调节Tau蛋白磷酸化的PKA,cdk5和GSK-3B激酶活性;并取股动脉血标本检测体内组织中5-羟色胺代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)浓度。结果S1、S2组Tau蛋白Thr262和Ser369位点磷酸化的表达水平、Tau蛋白磷酸化的PKA,cdk5和GSK-3 B激酶活性及鼠血清中5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)表达水平均高于C组,S1、S2之间比较发现吸入七氟醚浓度越高,Tau蛋白磷酸化的表达水平也越高(Ser369位点除外)。S1组、S2组麻醉后潜伏期均较麻醉前及C组麻醉后明显延长(P0.05);S1及S2组大鼠120 s内穿越原平台区域进入次数麻醉后亦显著低于麻醉前及C组,S2组

摘要： 阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是老年人最常见的痴呆形式,具有两个神经病理特征:由淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)肽组成的细胞外老年斑和由异常过度tau蛋白磷酸化(Ptau)组成的神经原纤维缠结[1]。为了明确AD的临床诊断,许多研究集中在神经影像学和脑脊液和外周血中分子的生物标志物。其中正电子发射断层扫描(PET-CT)使用碳-11标记的匹兹堡化合物B(11C-PIB)对Aβ成像表明,Aβ沉积是一个缓慢的病理过程,可在二十年的时间内缓慢发生[2]。脑脊液中的Aβ和Ptau水平是临床诊断AD的生物标志物,具有很高的准确性,但通过腰椎穿刺取样脑脊液是侵入性的,需要熟练的训练,且老年人群接受度差。相比之下,血液取样方便简捷,日常可广泛开展。但其特异性及可靠性目前仍缺乏大量循证医学证据。因此AD的外周特异性标记物的检测,特别是在早期或临床前阶段,仍然是一个巨大的挑战。最近的一些研究报告了来自血液中的各种分子,即潜在的血液的AD生物标志物,如蛋白质、脂质和核酸[3]。

摘要： 目的探讨二苯乙烯苷(2,3,5,4’-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glycoside,TSG)通过调节Aβ_(25-35)致拟痴呆大鼠模型脑组织中糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、蛋白磷酸酯酶-2A(PP2A)、环磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(PKA)的表达干预Tau蛋白磷酸化的机制。方法采用Morris水迷宫定位航行实验对50只24月龄老年雄性SD大鼠进行筛选,剔除天生痴呆大鼠后,筛选出36只,随机分为正常组、假手术组、模型组、TSG低剂量组(0.033g/kg)、TSG中剂量组(0.1g/kg)、TSG高剂量组(0.3g/kg),每组6只。大鼠手术造模14d后,TSG各剂量组大鼠按相应剂量灌胃药物(连续28d);其余3组大鼠每天灌胃等量生理盐水。灌胃结束后,采用避暗箱实验对大鼠学习记忆能力进行检测;免疫荧光法(IF)检测各组大鼠脑组织GSK-3β蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)检测GSK-3β、PP2A、PKA mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Tau、PP2A、PKA蛋白表达情况。结果正常组、假手术组及TSG各剂量组大鼠避暗箱实验的潜伏期及错误次数均无明显变化;脑组织中GSK-3β、PP2A、PKA mRNA表达及GSK-3β、Tau、PP2A、PKA蛋白表达均无明显变化;模型组大鼠避暗箱实验的潜伏期明显下降(P<0.01),错误次数明显增多(P<0.01);模型组大鼠脑组织中GSK-3β、PKA mRNA表达水平明显升高(P<0.05),PP2A mRNA表达水平明显下降(P<0.05);GSK-3β、PKA及Tau蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),PP2A蛋白表达水平明显下降(P<0.01)。与模型组比较,TSG各剂量组大鼠避暗箱实验的潜伏期均出现明显升高(P<0.05或P<0.01),错误次数均明显减少(P<0.01);TSG各剂量组大鼠脑组织中GSK-3β、PKA mRNA表达水平均出现明显下降(P<0.05),PP2A mRNA表达水平均明显升高(P<0.05);TSG中剂量组大鼠脑组织中皮层区GSK-3β蛋白表达水平明显下降(P<0.05),TSG中剂量组及TSG高剂量组大鼠脑组织中海马区GSK-3β蛋白表达水平明显下降(P<0.01);TSG中剂量组及TSG高剂量组大鼠脑组织中PKA蛋白的表达水平明显降低(P<0.05);TSG各剂量组大鼠脑组织中Tau蛋白的表达水平均明显下降(P<0.05或P<0.01),PP2A蛋白的表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论TSG可以通过调节GSK-3β/PP2A活性干预Aβ_(25-35)致拟痴呆大鼠模型Tau蛋白磷酸化进程发挥抗痴呆作用,其机制可能与下调GSK-3β及PKA的表达和上调PP2A的表达有关。

摘要： 阿尔茨海默病(AD)是一种常发生于老年时期的慢性神经系统疾病,是最常见的痴呆类型,严重威胁老年人的健康和生命。多项研究表明,糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)作为细胞内多条重要信号通路的关键分子,与阿尔茨海默病的发生密切相关。近年研究证实,针刺可以改善AD患者的认知水平和学习记忆能力,从而提高AD患者的生活质量,其机制可能是通过调节GSK-3β的表达水平、减少Aβ沉积、抑制Tau蛋白过度增加、修复神经元的损伤以及改善胰岛素抵抗状态等多途径进行对AD的干预。本研究将总结回顾近5~10年来国内外通过针刺调节GSK-3β干预AD的研究进展,以期为进一步研究针刺治疗AD的作用机制扩展新视角。

摘要： 目的:运用闪光视觉诱发电位(FVEP)技术检测外伤性视神经损伤(TON)大鼠视觉通路障碍的变化情况,探究TON大鼠视网膜及视神经中Tau及其磷酸化蛋白的变化.方法:将30只SD大鼠进行FVEP造模,1wk后构建TON模型,左眼进行视神经夹持损伤,右眼进行视神经暴露假手术.TON模型鼠分别于视神经夹持损伤后1、3、7、14、28d进行FVEP检测.FVEP检测完成后处死大鼠,分离左眼视网膜及视神经,并采用Western blot检测其中Tau及其Ser 396/Ser 404位点磷酸化蛋白的表达水平.结果:TON模型大鼠假手术眼出现典型的FVEP波形;相较于假手术眼,手术眼各检测时间点FVEP的N2波发生显著延迟,N2-P2波振幅发生大幅缩减,但视神经夹持损伤后各时间点N2波潜伏期延迟时间和N2-P2振幅缩减差异不明显.TON大鼠手术眼视网膜总Tau含量在夹持损伤1d后急剧下降,7d时短暂恢复后直至28d维持于略低于正常水平;pTau-Ser396/404的变化与总Tau的变化一致,其中Ser 396位点为Tau蛋白主要磷酸化位点.TON大鼠手术眼视神经总Tau含量逐渐增多,夹持损伤14d时达到高峰并维持至28d,pTau-Ser396/404的变化与总Tau的变化类似,7d时出现增长并抵达高峰,其中Ser 404位点为主要磷酸化位点.结论:FVEP的N2及P2相关指标可用于检测TON大鼠视觉功能障碍水平,TON大鼠视网膜与视神经Tau蛋白水平的变化截然不同,不同部位pTau-Ser396/404的变化跟随总Tau含量的变化而变化,但不同部位Tau蛋白主要改变的磷酸化位点不同.

摘要： 目的 观察安神定志方对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马组织miR-103a-3p及其介导的Tau蛋白磷酸化的影响,探讨其相关作用机制.方法 通过GEO数据库筛选AD海马组织差异表达miRNA.50只SD大鼠随机分为空白组、模型组、miR-103a-3p mimic组、安神定志方组和miR-103a-3p mimic+安神定志方组,每组10只,采用Aβ1-42侧脑室注射制备AD大鼠模型.造模后各给药组给予相应药物干预4周.Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,HE染色观察海马组织形态,RT-PCR检测海马组织miR-103a-3p基因的表达,Western blot和免疫组化检测海马组织脑源性神经营养因子(BDNF)及Tau蛋白的表达.结果 通过GEO数据库共筛选出34个差异miRNA,其中17个上调、17个下调.与模型组比较,安神定志方显著增加AD大鼠跨越平台次数和有效停留时间,减少逃避潜伏期,改善海马CA1区组织形态,上调BDNF的表达,抑制miR-103a-3p、p-TauSer396和p-TauThr231的表达,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 安神定志方可能通过抑制海马组织miR-103a-3p的表达进而促进BDNF的表达,调控Tau蛋白的磷酸化水平,从而促进AD大鼠学习记忆能力.

摘要： 目的:探讨利拉鲁肽对脲链佐菌素(STZ)诱导阿尔茨海默病(AD)大鼠认知功能及Tau蛋白磷酸化的影响.方法:Wistar雄性大鼠24只,随机分为空白对照组、假手术组、模型组和治疗组,每组6只,采用单次右侧脑室注射STZ(3 mg/kg)诱导AD大鼠,14 d后连续4周皮下注射利拉鲁肽干预;利用Morris水迷宫实验检测大鼠认知功能改变,利用免疫组织化学法和Western blot法检测Ser396位点磷酸化的Tau蛋白表达.结果:Morris水迷宫实验结果显示,与空白对照组相比,假手术组大鼠的逃逸潜伏期和穿越平台次数差异无统计学意义(P>0.05);与假手术组相比,模型组大鼠逃逸潜伏期和穿越平台次数增加(P<0.05);与模型组相比,利拉鲁肽治疗组大鼠逃逸潜伏期和穿越平台次数减少(P<0.05).免疫组化和Western blot检测结果显示,模型组大鼠海马组织中Ser396位点磷酸化的Tau蛋白表达增加(P<0.05),经利拉鲁肽干预后表达减少(P<0.05).结论:利拉鲁肽能改善STZ诱导的AD大鼠空间学习记忆能力的损伤,降低大鼠海马区Ser396位点磷酸化的Tau蛋白表达.

摘要： 目的 探讨涤痰汤对阿尔茨海默病模型大鼠脑内tau蛋白磷酸化水平及学习记忆能力的影响.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、涤痰汤组和西药组.采用显微注射Aβ1-40制备阿尔茨海默病模型.造模完成后采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆水平;采用免疫荧光和Western blotting检测大鼠海马磷酸化tau蛋白表达;采用Western blot-ting检测各组大鼠脑内蛋白激酶A(PKA)/环腺苷酸反应元件结合蛋白(CREB)信号通路中相关通路蛋白的表达水平.结果 与模型组比较,涤痰汤组大鼠平台潜伏期及游泳总路程下降,跨越平台次数增加.免疫荧光和Western blotting结果显示,涤痰汤组大鼠脑内磷酸化tau蛋白表达水平较模型组降低;通路相关蛋白PKA、CREB磷酸化水平较模型组大鼠均有不同程度的上调.结论 涤痰汤能够通过PKA-CREB通路改善阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力,并降低模型大鼠脑内tau蛋白磷酸化水平.

摘要： 目的:观察电针"足三里"对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰腺及海马中磷酸化tau蛋白水平的影响,探讨电针防治糖尿病痴呆的作用机制.方法:SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组和电针组,每组16只.高脂高糖饮食6周联合腹腔注射链脲佐菌素(35 mg/kg)制备T2DM大鼠模型.造模成功1周后电针组大鼠予电针"足三里",每次30 min,每日1次,每周6次,连续干预4周.记录大鼠生存率,并测定大鼠空腹血糖(FBG),酶联免疫吸附法检测大鼠血清胰岛素水平;H E染色法观察各组大鼠胰岛形态结构;免疫组织化学法检测胰腺和海马中丝氨酸396位点磷酸化的tau蛋白(pS396)、苏氨酸231位点磷酸化的tau蛋白(pT231)的表达;Western blot法检测胰腺和海马中pS396、pT231、总tau蛋白(Tau5)、磷酸化糖原合酶-3β(pGSK-3β)、总糖原合酶-3β(GSK-3β)的表达量.结果:与对照组比较,模型组大鼠在造模成功后4周生存率呈现明显的下降趋势;模型组大鼠的FBG及胰岛素水平均显著升高(P<0.01),胰岛明显缩小,结构紊乱,界限不清;胰腺和海马pS396、pT231表达水平显著增高(P<0.01),pGSK表达水平显著降低(P<0.01).与模型组比较,电针组大鼠在造模成功后的生存率升高;FBG及胰岛素水平均明显降低(P<0.05),胰岛面积增大,细胞排列较规则,边界相对清晰;胰腺和海马pS396、p T 231表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),pGSK-3β水平显著升高(P<0.01).结论:电针"足三里"可能通过调控胰腺及海马内GSK-3β信号分子活性,降低大鼠海马内磷酸化tau蛋白的表达水平,从而有效保护糖尿病大鼠大脑的功能.

摘要： cqvip:阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)是常见神经系统退行性疾病,其重要病理改变有神经元内神经纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs)及神经元大量凋亡[1]。Tau蛋白对维持神经元骨架功能至关重要[2]。糖原合酶激酶3(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)作为重要激酶,其表达增多会导致Tau蛋白过度磷酸化从而产生NFTs,最终发生AD[3]。

摘要： 目的:探讨黄连解毒汤对2型糖尿病(T2DM)大鼠认知功能及脑内Alzheimer病样tau蛋白磷酸化途径的影响.rn 方法:健康雄性Wistar大鼠72只,随机分为6组,分别为空白组、模型组、罗格列j酮组、黄连解毒汤低、中、高剂量组(1.5、3、6g/kg).通过高糖高脂饮食及小剂量链脲佐菌素(STZ)制备T2DM模型.除空白组、模型组给予等容积的蒸馏水,其他治疗组以相应药物治疗.8周后,采用Morris水迷宫观察大鼠学习记忆能力,Western blotting法检测大鼠大脑皮层tau蛋白在不同位点的磷酸化水平.rn 结果:黄连解毒汤可缩短T2DM模型大鼠平均逃避潜伏期(P＜0.01),增加逃逸平台次数(P＜0.05)、延长有效区停留时间及有效区游泳路程(P＜0.05,P＜0.01),有效抑制模型大鼠脑组织tau蛋白在Ser199、Ser202、Thr231、Ser396等多位点的磷酸化程度(P＜0.05,P＜0.01).rn 结论:黄连解毒汤能够有效改善T2DM模型大鼠学习和记忆能力,可在tau蛋白多位点上抑制其过度磷酸化水平.

摘要： 通过观察VPA对APP转基因小鼠脑内APP代谢及tau蛋白磷酸化的影响,探讨VPA对AD小鼠脑组织SP和NFTs形成的作用,为探讨AD的发病机制、寻找治疗AD的有效药物提供理论依据。指出，(1) VPA处理可以减少APP/PS1转基因小鼠脑内SP的形成和β-分泌酶的蛋白表达水平;(2) VPA处理可以抑制APP/PS1转基因小鼠脑内及OA处理的SH-SY5Y细胞的tau蛋白磷酸化;(3) VPA通过抑制CDK5和GSK3的活性减少tau蛋白的磷酸化。

摘要： 抗磷酸化Tau蛋白抗体及其在AD症异常磷酸化Tau蛋白水平测定上的用途。抗体为分别抗Thr181，Thr205，Thr231，Ser262，Ser396，Ser404位点磷酸化修饰Tau蛋白的兔多克隆抗体。Tau蛋白包括来自人、大鼠、小鼠物种中的Tau蛋白。抗磷酸化Tau蛋白抗体在AD症异常磷酸化Tau蛋白水平测定上的用途，步骤是：通过建立AD症大鼠模型制备各组脑组织石蜡切片；采用分别抗各位点磷酸化修饰Tau蛋白的抗体做一抗；检测各组大鼠脑组织神经细胞中磷酸化Tau蛋白，结果检测到各个位点磷酸化Tau蛋白。这六种抗体可开发为试剂盒，用于人类和相关动物模型阿尔茨海默氏疾病诊断和评估。

摘要： 本发明公开了磷酸化蛋白质、基于磷酸化蛋白质的胞内递送体系及制备方法与应用；提供了一种蛋白质磷酸化修饰方法，所述磷酸化蛋白质具有蛋白质结构、通过氨基接于所述蛋白质表面的苯硼酸基团和通过硼酸与邻二醇反应接于所述蛋白质表面的三磷酸腺苷；将阳离子多肽溶液和磷酸化蛋白质在碱液中混合，震荡后静置，得到基于磷酸化蛋白质的胞内递送体系。在肿瘤细胞内低pH值和高浓度的活性氧环境下，苯硼酸和三磷酸腺苷从蛋白质表面脱落，蛋白质与阳离子聚多肽的作用力减弱，从复合物中释放出来，同时恢复活性，杀死肿瘤细胞。

摘要： 本申请公开了一种食品蛋白的磷酸化方法及其磷酸化蛋白，至少包括以下步骤：将含食品蛋白的溶液与含植酸的溶液混合后调pH值为3～7后定容，冷冻干燥所得溶液后在干燥加热条件下进行磷酸化反应，得到磷酸化蛋清蛋白。该方法利用来源广泛的蛋清蛋白作为原料，选择本身可作为食品添加剂或食品中常见成分——植酸作为磷酸化试剂，并采用干燥加热的方式，在完全不使用有机溶剂的条件下，制备磷酸化蛋清蛋白。避免有机溶剂的使用，简化后续纯化步骤，环境友好。

摘要： 抗磷酸化Tau蛋白抗体及其在AD症异常磷酸化Tau蛋白水平测定上的用途。抗体为分别抗Thr181，Thr205，Thr231，Ser262，Ser396，Ser404位点磷酸化修饰Tau蛋白的兔多克隆抗体。Tau蛋白包括来自人、大鼠、小鼠物种中的Tau蛋白。抗磷酸化Tau蛋白抗体在AD症异常磷酸化Tau蛋白水平测定上的用途，步骤是：通过建立AD症大鼠模型制备各组脑组织石蜡切片；采用分别抗各位点磷酸化修饰Tau蛋白的抗体做一抗；检测各组大鼠脑组织神经细胞中磷酸化Tau蛋白，结果检测到各个位点磷酸化Tau蛋白。这六种抗体可开发为试剂盒，用于人类和相关动物模型阿尔茨海默氏疾病诊断和评估。

摘要： 本发明涉及一种制备部分脱磷酸化牛乳酪蛋白以模拟人乳酪蛋白磷酸化水平的方法，其是以乳蛋白浓缩物、酪蛋白酸钠、脱脂乳、全脂乳、β-酪蛋白或α

摘要： 本发明公开了沙棘水溶性提取物在制备抑制Tau蛋白磷酸化制剂中的应用，所述沙棘水溶性提取物在制备抑制Tau蛋白磷酸化制剂中的质量百分含量为20‑45％。与现有技术相比，本发明取得的有益效果为：(1)通过抑制Tau蛋白磷酸化从而防治阿尔兹海默症，而非目前常用的胆碱抑制剂，无副作用；(2)通过各物质的协同作用防治阿尔兹海默症，针对阿尔兹海默症病因病机，各味药材各具其效，互相协调，遵循扶正祛邪，标本兼治的防治原则，诸药合用，共奏温肾健脾，补气固表、活血通络的功效，对阿尔兹海默症具有优异的防治效果，治愈率高。

摘要： 本公开涉及降低患有阿尔茨海默病(AD)的人或动物受试者的靶细胞中tau(τ)蛋白和/或磷酸化tau(τ)蛋白浓度的方法。本公开扩展至用于治疗阿尔茨海默病(AD)的生物药剂的用途，该生物药剂包括(i).37kDa/67kDa层粘连蛋白受体前体/高亲和力层粘连蛋白受体(LRP/LR)和/或其片段，或者(ii).用于表达LRP/LR的转染剂。

摘要： 本发明提供了一种脂代谢激活脂蛋白受体在促进YAP蛋白磷酸化增加中的应用，属于生物医药技术领域。本发明通过实验证明，脂代谢激活脂蛋白受体能促进YAP蛋白磷酸化增加，进而使YAP蛋白滞留于细胞浆中，从而抑制细胞的Hippo通路活化，抑制肝癌细胞的增殖及成瘤大小，发挥预防和/或治疗肝癌的作用。

摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种用于检测人淀粉样蛋白‑β和磷酸化Tau蛋白的胶体金免疫层析试纸及其制备方法，该试纸包括底板、重叠设置在该底板上的吸水垫、层析膜、结合物释放垫和样品垫，结合物释放垫上包被有胶体金标记的单克隆抗体1F12，3G5；层析膜上的第一检测线包被有单克隆抗体1F12，第二检测线包被有单克隆抗体2C6，第三检测线包被有单克隆抗体4B1，质控线包被有羊抗鼠IgG抗体。本发明通过对试纸的细节组成等进行改进，得到能够检测不同形式人淀粉样蛋白‑β，如人淀粉样蛋白‑β单体、寡聚体，和磷酸化Tau蛋白，填补了当前检测领域基于胶体金试纸条实现同时检测人淀粉样蛋白‑β单体，寡聚体蛋白和磷酸化Tau蛋白的空白。

摘要： 本申请公开了一种食品蛋白的磷酸化方法及其磷酸化蛋白，至少包括以下步骤：将含食品蛋白的溶液与含植酸的溶液混合后调pH值为3～7后定容，冷冻干燥所得溶液后在干燥加热条件下进行磷酸化反应，得到磷酸化蛋清蛋白。该方法利用来源广泛的蛋清蛋白作为原料，选择本身可作为食品添加剂或食品中常见成分——植酸作为磷酸化试剂，并采用干燥加热的方式，在完全不使用有机溶剂的条件下，制备磷酸化蛋清蛋白。避免有机溶剂的使用，简化后续纯化步骤，环境友好。