三维培养

摘要： 目的 分析并比较二维(2D)与三维(3D)培养条件下人牙髓间充质细胞(DPSCs)外泌体(Exo)微小RNA(miRNA)的表达谱.方法 2D与3D条件下分别培养DPSCs,提取细胞Exo,采用透射电子显微镜、蛋白质免疫印迹及纳米颗粒追踪分析等方法观察并鉴定;通过高通量测序筛选差异表达miRNA,采用Dr.Tom系统及TargetScan网站进行生物信息学分析及组织再生修复相关靶基因预测.结果 3D培养下收集的DPSC-Exo均呈现"茶托样"双层膜结构,CD63和CD9表达阳性,粒径分布符合外泌体特征,与2D培养的DPSC-Exo一致.高通量测序共计检测外泌体来源miRNA 253个,其中3D组表达222个,特有表达99个;与2D组相比,表达显著差异60个[︱log2(3D/2D)︱≥1,Qvalue≤0.001].差异miRNA主要参与的生物学过程与分子功能分别为细胞过程和结合;京都基因与基因组数据库(KEGG)通路富集分析显示在代谢通路有显著富集.miR-302的候选靶基因有成纤维细胞生长因子(FGF)19和表皮生长因子受体等;miR-24-3p可能靶向神经元分化因子2、神经上皮细胞转化因子1、神经元分化因子1、神经元再生相关蛋白、FGF11、FGF结合蛋白3、FGF受体3、血小板衍生生长因子受体(PDGFR)β多肽、PDGFRα多肽、血管生成素、胰岛素样生长因子结合蛋白5等,以发挥组织再生修复功能.结论 相比2D培养,3D培养能调节DPSC-Exo部分miRNA表达量,上调一些与再生修复相关的miRNA,3D培养可考虑作为调节外泌体应用潜能的一种手段.

摘要： 背景:细胞球三维培养模型在组织工程领域应用前景广泛,但使用商品化超低吸附培养板进行细胞球培养的实验成本较高,因此需探寻一种细胞球成形的替代策略,推动细胞球在相关研究领域的应用.目的:采用琼脂糖和聚丙烯酸模具,并利用层层自组装技术构建细胞球三维培养模型,部分模拟细胞体内生存的微环境.方法:体外培养小鼠前体成骨细胞,依次使用明胶与海藻酸钠对小鼠前体成骨细胞进行层层自组装处理(层层自组装-小鼠前体成骨细胞),同时分别制备明胶包裹与海藻酸钠包裹的小鼠前体成骨细胞.分别制备琼脂糖凝胶涂层培养板与琼脂糖凝胶微孔板,观察上述不同处理的细胞在两种培养板中的成球效果,采用Live/Dead染色法检测细胞球的活性,采用碱性磷酸酶染色法、RT-PCR实验检测细胞球的成骨能力.结果 与结论:①光学显微镜下可见,在琼脂糖凝胶涂层孔板中,未经处理与经3种涂层处理的小鼠前体成骨细胞均未成球;在琼脂糖凝胶微孔板中,未经处理与层层自组装处理的小鼠前体成骨细胞形成了理想的细胞球,其中层层自组装-小鼠前体成骨细胞球的直径大于未经处理小鼠前体成骨细胞球(P＜0.05);②Live/Dead染色显示,层层自组装-小鼠前体成骨细胞球内的细胞活性高于未经处理小鼠前体成骨细胞球(P＜0.05);③层层自组装-小鼠前体成骨细胞球的碱性磷酸酶活性高于未经处理小鼠前体成骨细胞球(P＜0.05),Ⅰ型胶原和Osterix基因表达高于未经处理小鼠前体成骨细胞球(P＜0.05),两组Runx2基因表达比较差异无显著性意义(P＞0.05);④结果表明,采用琼脂糖凝胶结合层层自组装技术成功建立了细胞球三维培养模型,此方法便捷、经济、高效且细胞活性良好,保留了细胞成骨分化能力,在骨组织工程和再生医学领域具有潜在应用价值.

摘要： 背景:水凝胶材料支架是三维培养细胞的理想材料之一,但水凝胶内部密集的网络结构对细胞增殖及舒展有明显抑制作用,水凝胶支架内部的多孔结构对上述问题有明显改善.目的:探讨以甲基丙烯酸酐化明胶为支架材料、聚环氧乙烷溶液为造孔剂构建三维载细胞多孔水凝胶支架的方法,以及多孔水凝胶支架对细胞行为的影响.方法:制备甲基丙烯酸酐化明胶水凝胶溶液与聚环氧乙烷溶液,将二者分别以4:1、3:1、2:1、1:1的体积比混合,加入骨髓间充质干细胞,设计构建可载细胞的三维多孔水凝胶支架,表征支架的微观形貌与力学性能,利用活死染色观察细胞相容性、细胞骨架染色观察细胞形态.结果 与结论:①扫描电镜下可见,各组支架截面呈均匀分布的多孔结构,各孔隙之间相互连通,孔隙呈类椭圆形或类圆形,随着聚环氧乙烷溶液比例的增加,支架的孔径及孔隙率增加;②多频应变曲线显示,各组支架的应变均可达到40％以上,其中体积比1:1支架的应变可达到60％;随着聚环氧乙烷溶液比例的增加,支架的储能模量下降,其中体积比1:1支架的力学强度较差,仅能勉强维持支架的形态;③体外培养14 d的活死染色显示,各组支架内的细胞存活率均>85％;④体外培养14 d的细胞骨架染色显示,体积比3:1支架中大部分细胞呈短梭形,体积比2:1、1:1支架中的细胞呈星形或长梭形,细胞间建立了广泛的连接;⑤结果表明,三维载细胞多孔水凝胶支架有利于骨髓间充质干细胞的舒展和增殖,其中体积比为2:1的支架兼顾了力学强度及生物学性能,是较为理想的三维细胞培养平台.

摘要： 背景:水凝胶材料支架是三维培养细胞的理想材料之一,但水凝胶内部密集的网络结构对细胞增殖及舒展有明显抑制作用,水凝胶支架内部的多孔结构对上述问题有明显改善。目的:探讨以甲基丙烯酸酐化明胶为支架材料、聚环氧乙烷溶液为造孔剂构建三维载细胞多孔水凝胶支架的方法,以及多孔水凝胶支架对细胞行为的影响。方法:制备甲基丙烯酸酐化明胶水凝胶溶液与聚环氧乙烷溶液,将二者分别以4∶1、3∶1、2∶1、1∶1的体积比混合,加入骨髓间充质干细胞,设计构建可载细胞的三维多孔水凝胶支架,表征支架的微观形貌与力学性能,利用活死染色观察细胞相容性、细胞骨架染色观察细胞形态。结果与结论:(1)扫描电镜下可见,各组支架截面呈均匀分布的多孔结构,各孔隙之间相互连通,孔隙呈类椭圆形或类圆形,随着聚环氧乙烷溶液比例的增加,支架的孔径及孔隙率增加;(2)多频应变曲线显示,各组支架的应变均可达到40%以上,其中体积比1∶1支架的应变可达到60%;随着聚环氧乙烷溶液比例的增加,支架的储能模量下降,其中体积比1∶1支架的力学强度较差,仅能勉强维持支架的形态;(3)体外培养14 d的活死染色显示,各组支架内的细胞存活率均>85%;(4)体外培养14 d的细胞骨架染色显示,体积比3∶1支架中大部分细胞呈短梭形,体积比2∶1、1∶1支架中的细胞呈星形或长梭形,细胞间建立了广泛的连接;(5)结果表明,三维载细胞多孔水凝胶支架有利于骨髓间充质干细胞的舒展和增殖,其中体积比为2∶1的支架兼顾了力学强度及生物学性能,是较为理想的三维细胞培养平台。

摘要： 背景:细胞球三维培养模型在组织工程领域应用前景广泛,但使用商品化超低吸附培养板进行细胞球培养的实验成本较高,因此需探寻一种细胞球成形的替代策略,推动细胞球在相关研究领域的应用。目的:采用琼脂糖和聚丙烯酸模具,并利用层层自组装技术构建细胞球三维培养模型,部分模拟细胞体内生存的微环境。方法:体外培养小鼠前体成骨细胞,依次使用明胶与海藻酸钠对小鼠前体成骨细胞进行层层自组装处理(层层自组装-小鼠前体成骨细胞),同时分别制备明胶包裹与海藻酸钠包裹的小鼠前体成骨细胞。分别制备琼脂糖凝胶涂层培养板与琼脂糖凝胶微孔板,观察上述不同处理的细胞在两种培养板中的成球效果,采用Live/Dead染色法检测细胞球的活性,采用碱性磷酸酶染色法、RT-PCR实验检测细胞球的成骨能力。结果与结论:①光学显微镜下可见,在琼脂糖凝胶涂层孔板中,未经处理与经3种涂层处理的小鼠前体成骨细胞均未成球;在琼脂糖凝胶微孔板中,未经处理与层层自组装处理的小鼠前体成骨细胞形成了理想的细胞球,其中层层自组装-小鼠前体成骨细胞球的直径大于未经处理小鼠前体成骨细胞球(P0.05);④结果表明,采用琼脂糖凝胶结合层层自组装技术成功建立了细胞球三维培养模型,此方法便捷、经济、高效且细胞活性良好,保留了细胞成骨分化能力,在骨组织工程和再生医学领域具有潜在应用价值。

摘要： 背景:人脐带间充质干细胞提取方法主要有酶消化法和组织块贴壁法,明确两种方法提取的细胞在二维、三维培养下的生物学特性,对组织工程中种子细胞提取方法及培养方式的选择具有重要意义.目的:比较酶消化法和组织块贴壁法提取的人脐带间充质干细胞在二维、三维培养下的生物学特性.方法:酶消化法和组织块贴壁法分离人脐带间充质干细胞,扩增培养至第3代进行二维、三维培养;扫描电镜观察细胞球表征;死活染色观察细胞球存活情况;Alamar Blue检测细胞增殖能力;流式细胞术检测免疫表型CD34、CD44、CD45、CD90、CD105的表达;免疫荧光、免疫印迹检测多能性转录因子Sox2、Nanog、Oct4表达.结果 与结论:①酶消化法比组织块贴壁法获取细胞时间更短,二维培养下组织块贴壁法的细胞增殖能力优于酶消化法,但在三维培养条件下细胞增殖缓慢且无差异.三维培养3 d后细胞成紧密球体,存活良好.②两种方法提取的细胞在二维、三维培养条件下均表达CD44、CD90、CD105,不表达CD34、CD45.二维培养下,酶消化法提取细胞的CD105表达高于组织块贴壁法;三维培养下,酶消化法提取细胞的CD90、CD105表达也高于组织块贴壁法.③二维和三维培养下两种方法提取细胞均表达多能性转录因子Sox2、Nanog、Oct4.二维培养下,酶消化法提取细胞3个转录因子表达均高于组织块贴壁法;但三维培养下,组织块贴壁法提取细胞Sox2的表达高于酶消化法,Nanog、Oct4的表达两组间无差异.

摘要： 目的:制备不同浓度的三维琼脂糖凝胶以进行星形胶质细胞的体外培养,从而寻找适合细胞生长的理想环境。方法:分别制备1%、2%、3%的琼脂糖凝胶,利用纳米压痕仪测量其弹性模量。星形胶质细胞在凝胶中培养1、3、5、7 d,观察细胞活性以及细胞骨架的变化。结果:随着凝胶浓度的增加,琼脂糖凝胶弹性模量逐渐增加。2%的琼脂糖凝胶的弹性模量最接近筛板组织的弹性模量;在2%、3%琼脂糖凝胶环境下,细胞活性具有较高水平。随着细胞在凝胶中培养的时间增加,星形胶质细胞的突起逐渐伸出,细胞从球形向梭形或星形转变,更接近细胞真实的生长状态。结论:2%琼脂糖凝胶最接近星形胶质细胞在体内的生长环境,细胞成活率较高,是细胞体外三维培养的理想环境。

摘要： 背景:近年来脱细胞支架已被广泛用于各种肿瘤的研究,支架的空间排列、生物力学性质和生物相容性等特性均有助于还原肿瘤细胞生长的微环境。目的:探讨猪结肠脱细胞支架作为结肠癌体外模型的特点与优势。方法:将新鲜猪结肠以2%SDS、1%Triton X-100及0.5%EDTA浸泡结合反复振荡的方法进行脱细胞处理,制备猪结肠脱细胞支架。将人结肠癌HCT116细胞接种于猪结肠脱细胞支架黏膜面,活-死染色观察支架上的细胞生长情况,鬼笔环肽染色观察支架上的细胞形态,苏木精-伊红染色与免疫荧光染色观察细胞在支架上的纵向生长情况。结果与结论:①活-死染色显示,培养第1天,HCT116细胞能很好地聚集在支架黏膜层的孔隙内,少见死细胞;第3天时,细胞逐渐向孔隙外蔓延生长,小部分细胞已生长连接成片,无死细胞;第7天时,细胞生长密度进一步增大,在黏膜层表面生长成片,无死细胞与脱落细胞;②培养第7天苏木精-伊红染色及免疫荧光染色显示,部分HCT116细胞可在孔隙内生长成团,并有部分细胞沿着孔隙继续向黏膜下层生长,表现出原位肠癌浸润性生长的特点;③培养第7天鬼笔环肽染色显示,HCT116细胞与支架黏膜层在超微结构水平上有紧密的接触,并且具有分化良好的上皮形态特征;④结果表明,猪结肠脱细胞支架可作为结肠癌细胞三维培养的载体。

摘要： 背景:由于脐带间充质干细胞作为种子细胞具有来源广泛、取材方便、免疫原性低、成骨分化潜能及较强的增殖和自我更新能力等诸多优点,近年来关于其在骨组织工程中的应用研究越来越多。目的:对脐带间充质干细胞在分离培养、成骨诱导及其支架等方面进行综述。方法:由第一作者检索CNKI数据库和PubMed数据库的相关文章,检索词为“人脐带间充质干细胞,分离,培养,成骨分化,支架,骨组织工程”“human umbilical cord stem cell,culture,isolation,osteogenic differentiation,scaffold,bone tissue engineering”,查阅2004至2020年来有关的文献,最终纳入104篇文献。结果与结论:脐带间充质干细胞的分离、培养方法不一;无血清或动物血清替代物培养体系及细胞共培养技术取得了很大进展;3D培养系统将是未来发展的方向。脐带间充质干细胞成骨诱导分化机制仍不明确,需深入研究阐明。至今,开发取长补短、性能更优的复合支架仍是研究的焦点;生物打印技术突破了微米级精确调控支架内部复杂结构打造个体化支架的难题,为骨组织工程带来巨大希望;设计和制造出具有多方面理想组成(包括生物相容性、微观及宏观高孔隙率、机械性能和相关生物可吸收性等)及减少临床治疗不良反应的支架仍是骨组织工程中的重要挑战之一。

摘要： 背景:近年来脱细胞支架己被广泛用于各种肿瘤的研究,支架的空间排列、生物力学性质和生物相容性等特性均有助于还原肿瘤细胞生长的微环境.目的:探讨猪结肠脱细胞支架作为结肠癌体外模型的特点与优势.方法:将新鲜猪结肠以2％SDS、1％Triton X-100及0.5％EDTA浸泡结合反复振荡的方法进行脱细胞处理,制备猪结肠脱细胞支架.将人结肠癌HCT116细胞接种于猪结肠脱细胞支架黏膜面,活-死染色观察支架上的细胞生长情况,鬼笔环肽染色观察支架上的细胞形态,苏木精-伊红染色与免疫荧光染色观察细胞在支架上的纵向生长情况.结果 与结论:①活-死染色显示,培养第1天,HCT116细胞能很好地聚集在支架黏膜层的孔隙内,少见死细胞;第3天时,细胞逐渐向孔隙外蔓延生长,小部分细胞已生长连接成片,无死细胞;第7天时,细胞生长密度进一步增大,在黏膜层表面生长成片,无死细胞与脱落细胞;②培养第7天苏木精-伊红染色及免疫荧光染色显示,部分HCT116细胞可在孔隙内生长成团,并有部分细胞沿着孔隙继续向黏膜下层生长,表现出原位肠癌浸润性生长的特点;③培养第7天鬼笔环肽染色显示,HCT116细胞与支架黏膜层在超微结构水平上有紧密的接触,并且具有分化良好的上皮形态特征;④结果表明,猪结肠脱细胞支架可作为结肠癌细胞三维培养的载体.

摘要： 越来越多的证据表明,癌干细胞作为卵巢癌复发不可忽视的一个原因,成为癌症治疗的新靶点.随着对肿瘤微环境重要性的认识以及三维培养技术的发展,趋向于利用一些天然或合成的高分子材料来进行肿瘤干细胞的富集.聚(甲基乙烯基醚-alt-马来酸）是FDA批准的,具有良好的生物相容性和非免疫原性的高分子材料.利用不同弹性模量的P(MVE-alt-MA)/Alginate凝胶来富集卵巢癌干细胞,以期探讨基质的硬度对癌干细胞―干性表达的影响.

摘要： 目的：从中西医结合方面讨论中医药对体外培养软骨细胞的作用.将SD大鼠关节软骨细胞接种于外消旋聚乳酸(PDLLA)支架中并在体外培养,用含人参皂苷Rg1(G-Rg1)培养基培养,探讨G-Rg1对三维培养中软骨细胞表型的稳定及增殖作用.方法：①SD大鼠关节软骨细胞体外培养.②收集第三代软骨细胞计数并种植于PDLLA中每日倒置显微镜下观察细胞形态、生长情况.③倒置显微镜,电镜下观察G-Rg1作用下软骨细胞形态学改变.④免疫组化法观察G-Rg1对支架内软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响.⑤应用SPSS17.0统计软件分析处理,数据以均数±标准差表示,采用t检验和方差分析进行组间比较.结果：①单层培养至第5代、6代大多数细胞成纤维样变,三维组连续培养6周HE染色显示软骨细胞形态始终保持圆形,胞质内紫红色异染,胞核大且圆,有些区域出现细胞重叠生长.②单层培养6周细胞Ⅱ型胶原免疫组化检测细胞无棕黄色着色,呈阴性.③单层培养软骨细胞短期内的增殖速率明显高于三维培养组(P＜0.05),1周内增殖倍数约为7倍,第7天后,细胞增长缓慢并呈现下降趋势.三维培养组增殖一直呈上升趋势,且在第4～8天含40μmol/LG-Rg1的三维培养组增殖速率明显高于不含G-Rg1的三维培养组(P＜0.05).结论：G-Rg1对三维培养SD大鼠关节软骨细胞具有维持细胞表型稳定,并可明显促进SD大鼠关节软骨的增殖和基质的合成.

摘要： 组织工程是有望从根本上解决组织，器官缺失或失能的医学难题的一门新兴加缘学科。组织、器官发充的细胞和分子机制的进一步揭示和体外构建工程组织、器官的细胞培养技术的进步将使组织工程在新的知年成为广泛应用的新的治疗模式。细胞三维培养要成为提外构建工程组织、器官的成熟技术体需要先解决以下问题，(1)生物材料；(2)培养基；(3)培养装置；(4)异型细胞的工培养；(5)细胞三维培养物血管化。

摘要： 肝细胞是一种对周围微环境依赖很强的细胞,离体后便很快失去了功能,但如果将其聚集形成细胞聚球体,便可以继续维持其活性和功能,与传统的贴壁培养相比,肝细胞聚球体能维持较长时间的活性和较高的细胞功能,这主要得益于细胞间彼此的紧密联系,以及趋于类组织化,其功能更接近于在体肝脏。近些年来,微胶囊作为一种细胞聚球体的培养方式在肝细胞组织工程的研究中效果显著,在微胶囊的三维微环境中,细胞聚集成团,并呈三维模式生长。那么,在微胶囊内的微环境究竟会如何影响细胞聚球体呢？本文旨在考察微胶囊内海藻酸钠对细胞聚集成团及生长的影响。rn 目的:在液化核心的海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微胶囊内,以肝癌细胞系hepG2为模型,考察微囊内海藻酸钠对肝细胞聚球体的形成及生长的影响。rn 方法与结论:通过显微观察,考察细胞在微囊内的聚集及生长过程,通过MTT 试验考察微囊内细胞的活性变化。微囊内,海藻酸钠阻碍了细胞聚集成团的过程,也阻碍了细胞的生长增殖,随着其黏度和浓度的增大,限制作用越明显。

摘要： 本文以海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(alginate-polylysine-alginate,APA)微胶囊构建三维培养体系,在静置状态下培养人肝癌细胞SMMC-7721,构建一种简单易行的人肝癌细胞三维培养模型.运用光学显微镜,激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)和透射电子显微镜等技术手段,研究微胶囊对肝癌细胞的生长、活性及肝癌细胞极性的影响.

摘要： @@骨髓作为造血器官为造血干细胞的生长提供了由基质细胞和细胞外基质构成的三维微环境，即造血干细胞完(Niche)。造血干细胞盒的三维结构利于细胞与细胞、细胞与基质间的交流。造血干细胞增殖与分化的调控正是通过微环境与造血干细胞间的信号传递，使细胞表现出相应的生物学行为。骨髓基质细胞中成骨细胞除了成骨的作用外，还是造血干细胞兔的重要组成部分，对造血干细胞的维持、增殖、成熟起了重要的作用。我们的前期研究以天然生物衍生骨复合人骨髓间充质干细胞并向成骨细胞诱导，构建了一个模拟骨髓造血干细胞完的三维(3D)拟生态造血干细胞培养体系，在这种3D培养体系中培养的脐带血造血干/祖细胞，显示出该培养体系对造血干/祖细胞具有维持与扩增效应。

摘要： @@骨髓作为造血器官为造血干细胞的生长提供了由基质细胞和细胞外基质构成的三维微环境，即造血干细胞完(Niche)。造血干细胞盒的三维结构利于细胞与细胞、细胞与基质间的交流。造血干细胞增殖与分化的调控正是通过微环境与造血干细胞间的信号传递，使细胞表现出相应的生物学行为。骨髓基质细胞中成骨细胞除了成骨的作用外，还是造血干细胞兔的重要组成部分，对造血干细胞的维持、增殖、成熟起了重要的作用。我们的前期研究以天然生物衍生骨复合人骨髓间充质干细胞并向成骨细胞诱导，构建了一个模拟骨髓造血干细胞完的三维(3D)拟生态造血干细胞培养体系，在这种3D培养体系中培养的脐带血造血干/祖细胞，显示出该培养体系对造血干/祖细胞具有维持与扩增效应。

摘要： @@骨髓作为造血器官为造血干细胞的生长提供了由基质细胞和细胞外基质构成的三维微环境，即造血干细胞完(Niche)。造血干细胞盒的三维结构利于细胞与细胞、细胞与基质间的交流。造血干细胞增殖与分化的调控正是通过微环境与造血干细胞间的信号传递，使细胞表现出相应的生物学行为。骨髓基质细胞中成骨细胞除了成骨的作用外，还是造血干细胞兔的重要组成部分，对造血干细胞的维持、增殖、成熟起了重要的作用。我们的前期研究以天然生物衍生骨复合人骨髓间充质干细胞并向成骨细胞诱导，构建了一个模拟骨髓造血干细胞完的三维(3D)拟生态造血干细胞培养体系，在这种3D培养体系中培养的脐带血造血干/祖细胞，显示出该培养体系对造血干/祖细胞具有维持与扩增效应。

摘要： @@骨髓作为造血器官为造血干细胞的生长提供了由基质细胞和细胞外基质构成的三维微环境，即造血干细胞完(Niche)。造血干细胞盒的三维结构利于细胞与细胞、细胞与基质间的交流。造血干细胞增殖与分化的调控正是通过微环境与造血干细胞间的信号传递，使细胞表现出相应的生物学行为。骨髓基质细胞中成骨细胞除了成骨的作用外，还是造血干细胞兔的重要组成部分，对造血干细胞的维持、增殖、成熟起了重要的作用。我们的前期研究以天然生物衍生骨复合人骨髓间充质干细胞并向成骨细胞诱导，构建了一个模拟骨髓造血干细胞完的三维(3D)拟生态造血干细胞培养体系，在这种3D培养体系中培养的脐带血造血干/祖细胞，显示出该培养体系对造血干/祖细胞具有维持与扩增效应。

摘要： 本发明提供一种三维细胞培养支架的制备方法，包括如下步骤：a.称取1~10g的聚合物溶于的有机溶剂中，配成聚合物溶液；b.称取0~500mg增塑剂加到上述聚合物溶液中，混合均匀；c.称取羟基磷灰石胶纳米颗粒；银纳米颗粒；氧化锌纳米颗粒；壳聚糖纳米颗粒，加入到步骤b处理的溶液中，混合均匀，获得纺丝原液；d.将纺丝原液注入到静电纺丝设备中，在静电纺丝设备的接收装置上获得纺丝；e.将纺丝烘干，制得三维细胞培养支架。本发明还提供一种基于所述三维细胞培养支架制备方法所获得的三维细胞培养装置。所述培养装置可为培养的细胞提供无毒的具有生物相容性的生长环境，同时可适用于多种不同的种类细胞的培养。

摘要： 本发明揭示了三维指示方法。在本发明的三维指示方法中，根据在预定的检测面上使用输入笔的笔尖进行了指示时的指示位置的二维坐标、以及对前述输入笔的笔尖施加的压力即笔压或者进行了持续指示的时间或前述输入笔具有的操作单元的操作，指示表现在显示装置上的三维空间内的期望点。并且，在本发明的三维指示方法中，根据前述输入笔的笔尖或者进行了持续指示的时间或前述输入笔具有的操作单元的操作，使显示在前述三维空间内的三维指针的深度方向的坐标变化来显示在显示装置上。

摘要： 本发明提供了一种三维肿瘤球培养基添加剂、培养基以及三维肿瘤球培养方法。所述添加剂由增稠剂和凝胶剂组成，增稠剂选自甲基纤维素、乙基纤维素、基底膜基质、胶原蛋白中的一种或多种的组合，凝胶剂选自结冷脚、海藻酸或琼脂糖凝胶中的一种或多种的组合。所述三维肿瘤球的培养基，包括肿瘤细胞培养基和前述的三维肿瘤球培养基添加剂。多种细胞系结果显示本发明培养基可在高密度培养中，明显降低肿瘤球聚集、融合。

摘要： 向粉末床照射波束来进行层叠造型的三维层叠造型装置的施工异常检测系统，基于粉末床的表面形状的测定结果，在满足粉末床的相对于基准位置的平均高度从第一规定范围脱离的第一条件、以及粉末床的高度的偏差从第二规定范围脱离的第二条件中的至少一者的情况下，判定为发生了粉末床的铺设异常。

摘要： 本发明提供一种三维细胞培养支架的制备方法，该方法包括如下步骤：a.称取1~10g的聚合物溶于10~100ml的有机溶剂中，配成聚合物溶液；b.称取0~500mg增塑剂，加到上述聚合物溶液中，混合均匀；c.称取羟基磷灰石胶纳米颗粒、银纳米颗粒、氧化锌纳米颗粒、壳聚糖纳米颗粒各0~2g，加入到步骤b处理的溶液中，混合均匀，获得纺丝原液；d.将所述纺丝原液注入到静电纺丝设备中，在静电纺丝设备的接收装置上获得纺丝；e.将所获得的纺丝进行烘干处理，即制得三维细胞培养支架。本发明还提供一种基于所述三维细胞培养支架制备方法所获得的三维细胞培养装置。所述培养装置可为培养的细胞提供无毒的具有生物相容性的生长环境，同时可适用于多种不同的种类细胞的培养。

摘要： 三维数据编码方法对分别位于多个区域中的某一个区域的多个三维点按每个区域进行编码(S9401)，生成连接信息，该连接信息是基于多个区域中的规定的区域与多个区域中的规定的区域以外的多个其他区域的关系而生成的，且包含(i)表示固有地分配给多个区域的每一个的值的瓦片信息、以及(ii)通过瓦片信息表示规定的区域与其他区域具有关联性的关联信息(S9402)，生成包含所生成的连接信息和被编码的多个三维点的比特流(S9403)。

摘要： 三维数据编码方法决定将表示三维点群的点群数据分割为多个时的分割数据单位、和分割前的点群数据单位中的至少一方的编码后的编码数据的第1最大比特数(S9681)，通过以满足所决定的第1最大比特数的方式对分割点群数据而成的多个分割数据或分割前的点群数据进行编码，从而生成比特流(S9682)，比特流包含表示第1最大比特数的第1比特数信息。

摘要： 一种对具有层级结构的多个三维点进行编码的三维数据编码方法，使用第1三维点的周围的1个以上的第2三维点的第2位置信息，设定用于计算第1三维点的第1位置信息的预测值的2个以上的预测模式中的1个预测模式(S9781)；计算被设定的预测模式的预测值(S9782)；计算作为第1位置信息与计算出的预测值的差分的预测残差(S9783)；生成包含被设定的预测模式和预测残差的第1比特流(S9784)；在设定中，基于第1三维点的层级结构的深度，设定预测模式。

摘要： 使用参数对多个三维点的多个属性信息进行编码(S9241)，生成包含被编码的多个属性信息以及参数的比特流(S9242)，多个属性信息分别属于1个以上的阶层中的某一个且属于1个以上的区域中的某一个，参数根据成为编码的对象的属性信息所属的阶层以及区域来确定，比特流中包含的参数包含规定的基准值、按每个阶层确定的第1差分值、以及按每个区域确定的第2差分值。

摘要： 本发明提供具有厚度的三维培养皮肤片。本发明提供至少包含表皮细胞，并在基底部的至少一部分具有凹凸的三维培养皮肤片。此外，本发明提供在培养表面的至少一部分具有多孔性膜，并用于制造三维培养皮肤片的细胞培养容器，上述多孔性膜具备用于在三维培养皮肤片的基底部形成凹凸的凸部。进一步，本发明提供使用该细胞培养容器制造三维培养皮肤片的制造方法。