摘要：
目的:观察补肾化痰祛瘀汤对外源性神经毒性物质丙烯醛所诱导的SD大鼠神经毒性模型及HT22海马神经元毒性模型的神经保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法:(1)体内实验。将SD大鼠随机分为空白对照组、中药对照组、丙烯醛模型组、中药治疗组、多奈哌齐治疗组,并给予相应药物灌胃。采用Morris水迷宫观察各组大鼠学习记忆功能,HE染色法观察大鼠海马CA1区神经元病理改变,Western blotting法检测各组大鼠海马组织中BDNF、TrkB、APP、ADAM10蛋白表达水平。(2)体外实验。体外培养HT22细胞,将HT22细胞随机分为空白对照组、模型组、2%中药组、3%中药组、5%中药组、10%中药组、多奈哌齐组,空白对照组和模型组加入空白血清,给药组加入含药血清1 h后,加入25μmol/L丙烯醛,24 h后采用MTT法检测各组细胞相对存活率。采用Western blotting法检测HT22细胞中BDNF、TrkB、APP、ADAM10蛋白表达水平。结果:(1)体内实验。与空白对照组比较,丙烯醛模型组大鼠穿越平台次数明显减少(P<0.01),航行时间明显延长(P<0.01);海马CA1区神经元损害更为严重;同时海马组织中BDNF、TrkB、ADAM10蛋白相对表达量均明显降低(P<0.01),APP蛋白相对表达量明显升高(P<0.01)。与丙烯醛模型组比较,中药治疗组大鼠的平台穿越次数均明显增加(P<0.05),航行时间明显缩短(P<0.01);海马CA1区神经元形态明显改善;同时海马组织中BDNF、TrkB、ADAM10蛋白相对表达量均明显升高(P<0.05),APP蛋白相对表达量明显降低(P<0.05)。(2)体外实验。与空白对照组比较,除10%中药组细胞存活率明显降低(P<0.01)外,2%、3%、5%中药及10μmol/L多奈哌齐均可促进细胞增殖;与模型组比较,5%中药组和多奈哌齐组均可明显改善HT22细胞活力(P<0.01),同时提高细胞中BDNF、TrkB、ADAM10蛋白相对表达量(P<0.01),降低APP蛋白相对表达量(P<0.05)。体外实验结果与和体内实验结果类似。结论:补肾化痰祛瘀汤可以改善丙烯醛诱导的SD大鼠学习记忆能力损害和海马CA1区神经元的病理改变,提高丙烯醛诱导的HT22神经元毒性模型的细胞存活率,提示其可对抗丙烯醛的神经毒性,具有神经保护作用,且其机制可能与激活BDNF/TrkB通路、增加ADAM10、减少APP水平有关。
