海豚链球菌

摘要： 海豚链球菌是鱼类主要病原菌之一,给鱼类健康养殖带来极大风险。为探索海豚链球菌灭活疫苗对鲟鱼免疫效果,本文利用前期从杂交鲟鱼分离得到海豚链球菌菌株LY160816K制备了灭活疫苗,并通过腹腔注射和浸泡两种方式免疫杂交鲟,免疫第28d后用半数致死量浓度(LD50)攻毒以评价海豚链球菌灭活疫苗对杂交鲟的免疫保护效果。结果显示,本研究所制备的海豚链球菌灭活疫苗对杂交鲟具有较好的免疫效果,有较好的推广应用潜力。

摘要： 为探究浙江舟山地区网箱养殖小黄鱼暴发的以眼球突出、眼周充血、内脏出血等为特征症状的疾病病因,本研究采集发病小黄鱼的脑及内脏病变组织制作病理切片,观察结果显示,病鱼的脑、肝、脾、肾组织损伤严重,主要表现为淤血、细胞空泡变性、散在坏死,炎性细胞浸润等病理变化。将组织碎片于常规细菌培养基(TSA)和血琼脂培养基上划线培养,进行病原分离,结果显示,从患病鱼的脑和头肾组织中均分离到同一优势菌株DB2009001。经形态学观察、生理生化鉴定、16S rRNA 基因扩增及序列分析,并结合随机扩增多态性 DNA(RAPD)分型试验及海豚链球菌 lctO 基因的检测,确定菌株 DB2009001 为 Ⅰ 型海豚链球菌。毒力基因的 PCR 检测结果显示,DB2009001 同时携带海豚链球菌的 7 种毒力基因(pgmA、scpI、simA、cpsD、sagA、pdi、cfi)。药敏试验结果显示,菌株 DB2009001 对四环素类、喹诺酮类、β 内酰胺类、氯霉素类等药物敏感,对氨基糖苷类药物不同程度耐药。动物回归试验结果显示,菌株DB2009001可感染健康小黄鱼并引起死亡,对其半数致死剂量(LD)为1.66×10^(3)cfu/g,感染小黄鱼表现出与自然发病类似的症状,并从濒死的鱼体内再次分离到相同的菌株,表明菌株DB2009001为该养殖场小黄鱼暴发性疾病的致病菌。本研究首次报道了海豚链球菌能够感染小黄鱼,为小黄鱼链球菌病的防治提供了依据。

摘要： 为了给卵形鲳鲹的病害防控提供科学的依据,本研究对2020年7月海南临高县桥头镇网箱养殖的发病卵形鲳鲹(Trachinotusovatus)进行了病原的分离、纯化、鉴定和药敏试验.结果显示:从脑心浸液培养基分离获得了 1株优势菌,其对卵形鲳鲹的14 d半数致死浓度(LC50)为6.863x105CFU/mL,经鉴定该优势菌为海豚链球菌(Streptococcus iniae),其对庆大霉素等25种抗生素高度敏感;但对青霉素耐药.该结果可为卵形鲳鲹链球菌病的防治提供科学的依据.

摘要： 为提高罗非鱼链球菌病发前的早期预警,根据海豚链球菌的16S rRNA基因的部分序列和无乳链球菌的Sip基因特异性序列,分别合成特异性检测引物,经过对反应体系和反应条件的优化,建立检测较低含量的无乳链球菌和海豚链球菌的分子技术.试验结果显示,所建立的双重PCR可扩增出870 bp无乳链球菌和614 bp海豚链球菌的特异性片段,而迟钝爱德华氏菌、维氏气单胞菌、创伤弧菌、温和气单胞菌、溶藻弧菌、大肠杆菌均为阴性;无乳链球菌和海豚链球菌基因组DNA最低检测量分别为9.84×10-5 ng/μL和9.30×10-5 ng/μL,菌液最低检测量分别为2.76×103 cfu/mL和2.51×103 cf u/m L,远低于其半致死密度107 cf u/m L;对无乳链球菌和海豚链球菌混合感染的模拟临床样品的检出率为100％.研究结果表明,该分子技术的特异性较强、灵敏度较高、检出率较高,可用于较低含量的无乳链球菌和海豚链球菌的快速鉴别,为罗非鱼链球菌的早期预警分子检测提供技术支持.

摘要： 对罗非鱼肠道来源真菌Alternaria tenuissima SCSIO41701大米培养基发酵产物中抑制罗非鱼无乳链球菌和海豚链球菌生长的活性化合物进行研究.结合抗菌活性追踪,采用硅胶柱层析和HPLC等色谱技术对其抗菌活性组分进行分离纯化,并通过1H NMR和13C NMR波谱技术,以及与文献报道的NMR数据相比较鉴定化合物结构.共分离鉴定了9个化合物,分别是aternariol(1)、aternariol methyl ether (2)、3-hydroxyalternariol 5-O-methylether(3)、(-)-alt-enuene(4)、(+)-isoaltenuene(5)、altenusin derivative (6)、alternariphent(7)、talaroflavonene(8)、alternarienonic acid B(9).其中含量最高的化合物1抗菌活性最强,在25 μg/disc的浓度下对罗非鱼病原菌无乳链球菌和海豚链球菌均有显著抑制作用,抑菌圈直径均为10 mm,且其MIC值均为12.5μg/mL.这是首次报道化合物1抗罗非鱼链球病病原菌活性.

摘要： [目的]明确四川鲟源海豚链球菌Streptococcus iniae的毒力谱及分子流行病学特点,为鲟海豚链球菌病的防控提供参考.[方法]对四川地区17株鲟源海豚链球菌以及海豚链球菌ATCC29178进行毒力基因多重PCR检测,并通过随机扩增多态性DNA(RAPD)和重复序列PCR(REP-PCR)分析进行分子分型.[结果]所有菌株的7个主要毒力基因pgm、scpI、simA、cpsD、sagA、pdi和cfi均为阳性,部分菌株的simA基因发生了变异.基于RAPD分析,18株菌分为Ⅰ、Ⅱ2个基因型;基于REP-PCR分析,18株菌分为A、B、C、D 4个基因型.[结论]四川地区17株鲟源海豚链球菌分离株均为强毒株,毒力谱为pgm/scpI/simA/cpsD/sagA/pdi/cfi,并且同时存在多种基因型的菌株,其中D型为优势流行型.

摘要： 2018年8月,四川彭州与邛崃的养殖西伯利亚鲟发生一种以出血为临床特征,高死亡率的传染病,为明确其病因,本研究对发病鲟的肝脏、肾脏进行病原菌分离、鉴定和鲟疱疹病毒Ⅱ型(AciHV-2)的PCR检测.从患病鲟体内分离到2株G+链状球菌,其16S rRNA序列(MN416231、MN416230)与GenBank中海豚链球菌16S rRNA序列同源性达99％,在以16S rRNA序列构建的系统发育树上,分离菌与海豚链球菌聚为一支;同时基于海豚链球菌lctO基因的特异性PCR检测为阳性,鉴定2株分离菌为海豚链球菌.提取患病鲟肝脏、肾脏组织DNA进行AciHV-2特异性PCR检测,扩增出501 bp的特异性条带,在以AciHV-2 polymerase基因序列构建的系统发育树上,检测样本与AciHV-2聚为一支.病理组织学上,患病鲟的多组织器官发生明显损伤,尤其是肝脏、肾脏、鳃、脾脏和肠的损伤较为严重,表现为明显的变性、坏死、出血以及炎症细胞浸润;电镜下,观察到肝脏、肾脏组织内大量直径200～220 nm的疱疹病毒样颗粒与0.7～0.8μm的链球菌入侵细胞,并导致细胞损伤.综上,诊断患病西伯利亚鲟的病因是海豚链球菌与AciHV-2混合感染.

摘要： [目的]探明甘肃刘家峡养殖杂交鲟暴发疑似海豚链球菌病的病原情况.[方法]利用BHI琼脂对自然发病死亡鱼和濒死鱼的肝、肾和心进行细菌的分离纯化,对疑似海豚链球菌进行生化特性、分子生物学分析、致病性及药物敏感性试验;运用随机扩增多态性DNA标记技术(RAPD)鉴定疑似海豚链球菌的血清型,对疑似海豚链球菌主要毒力基因特异性进行PCR检测.[结果]分离得到的5株革兰氏阳性链球菌,其生化特性均与标准海豚链球菌ATCC29178基本一致,5株分离菌株16 S rRNA基因序列一致,16 S rRNA基因序列以及基于海豚链球菌lctO基因的特异性扩增结果均与海豚链球菌同源性达99％,系统发育树显示与海豚链球菌聚为一支,随机扩增多态性DNA显示海豚链球菌为血清Ⅱ型;分离菌株均含有海豚链球菌scpI,pdi,cpsD,pgmA和cfi 5种毒力基因,人工感染试验显示分离株对鲟鱼的LD50为3.15×106CFU/mL.药敏试验结果显示,分离株对卡那霉素、强力霉素、依诺沙星、红霉素、四环素、阿奇霉素、环丙沙星、阿莫西林敏感;对链霉素、大观霉素、阿米卡星、庆大霉素、诺氟沙星、氨曲南耐药.[结论]此次刘家峡养殖杂交鲟在自然情况下大规模发病是由毒力较强的血清Ⅱ型海豚链球菌引起的.

摘要： 一种辅助鉴定猪链球菌2型、猪链球菌7型和猪链球菌9型的引物组及其应用，该引物组由如下引物对组成：由如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列和如SEQIDNO.2所示的核苷酸序列组成的用于辅助鉴定猪链球菌2型的引物对；由如SEQIDNO.3所示的核苷酸序列和如SEQIDNO.4所示的核苷酸序列组成的用于辅助鉴定猪链球菌7型的引物对；由如SEQIDNO.5所示的核苷酸序列和如SEQIDNO.6所示的核苷酸序列组成的用于辅助鉴定猪链球菌9型的引物对。本发明将引物组制备成试剂盒，建立了猪链球菌2、7、9型PCR定型方法，实现了1次PCR同时检测3个血清型，大大缩短了工作内容。

摘要： 本发明涉及一种以具备专门杀灭海豚链球菌的能力并具有用序列号1标记的基因组为特征从自然界分离的长尾噬菌体Str‑INP‑1（保藏号：KCTC 12687BP）及利用以所述噬菌体为有效成分的组合物预防及处置海豚链球菌感染的方法。

摘要： 本发明公开一种双重PCR早期快速检测无乳链球菌和海豚链球菌的引物及其应用。利用本发明的引物对样品进行检测，可实现一次性同时特异性检测样本中的无乳链球菌和海豚链球菌。本发明建立的检测方法可检测到基因组含量分别为9.84×10‑5ng/μL的无乳链球菌和9.30×10‑5ng/μL的海豚链球菌，以及菌液浓度为2.76×102cfu/mL的无乳链球菌和2.51×102cfu/mL的海豚链球菌。本方法在罗非鱼样品检测过程中快速准确具有较高的特异性、灵敏度、重复性和稳定性，可实现罗非鱼链球菌病的早期分子预警，应用前景广阔，为罗非鱼链球菌病的快速诊断、流行病学调查等提供了准确而有效的手段。

摘要： 本发明公开一对同时快速检测无乳链球菌和海豚链球菌的引物及其应用。利用本发明的引物对样品进行检测，可实现一次性同时特异性检测样本中的无乳链球菌和海豚链球菌。本发明建立的分子检测方法对无乳链球菌和海豚链球菌的检测下限均为1.5pg/μL和5.8CFU/μL；在人工分别感染无乳链球菌和海豚链球菌的混合罗非鱼组织样中，其对两种菌的灵敏度均为10

摘要： 本发明提供一种牙鲆海豚链球菌GAPDH串联多表位多肽及其应用，所提供的串联多表位多肽，是用多肽接头连接的四个抗原表位肽；其中四个抗原表位肽的氨基酸序列分别为SEQ ID NO:1‑4。所提供的串联多表位多肽，其一种具体的氨基酸序列为SEQ ID NO:8。本发明另一个方面还提供一种海豚链球菌GAPDH多表位疫苗，是将上述的串联多表位多肽作为抗原与疫苗佐剂制备的。本发明所制备的多表位疫苗能够为牙鲆抗S.iniae感染提供较强的免疫保护，且效果明显高于GAPDH重组蛋白亚单位疫苗以及S.iniae灭活疫苗。

摘要： 本发明提供一种牙鲆海豚链球菌PDHA1多表位多肽，包含有四个由多肽接头进行连接的海豚链球菌PDHA1蛋白表位肽，所述的海豚链球菌PDHA1蛋白表位肽的氨基酸序列分别为SEQ ID NO:1‑4。本发明再一个方面提供一种海豚链球菌PDHA1多表位疫苗，其中抗原为上述的多表位多肽。本发明所制备的PDHA1多表位疫苗能够为牙鲆抗S.iniae感染提供较强的免疫保护，且保护效果明显好于PDHA1重组亚单位疫苗以及S.iniae全菌灭活疫苗。

摘要： 本发明涉及一种以具备专门杀灭海豚链球菌的能力并具有用序列号1标记的基因组为特征从自然界分离的长尾噬菌体Str‑INP‑1（保藏号：KCTC 12687BP）及利用以所述噬菌体为有效成分的组合物预防及处置海豚链球菌感染的方法。

摘要： 本发明公开一种双重PCR早期快速检测无乳链球菌和海豚链球菌的引物及其应用。利用本发明的引物对样品进行检测，可实现一次性同时特异性检测样本中的无乳链球菌和海豚链球菌。本发明建立的检测方法可检测到基因组含量分别为9.84×10

摘要： 本发明公开一对同时快速检测无乳链球菌和海豚链球菌的引物及其应用。利用本发明的引物对样品进行检测，可实现一次性同时特异性检测样本中的无乳链球菌和海豚链球菌。本发明建立的分子检测方法对无乳链球菌和海豚链球菌的检测下限均为1.5pg/μL和5.8CFU/μL；在人工分别感染无乳链球菌和海豚链球菌的混合罗非鱼组织样中，其对两种菌的灵敏度均为10

摘要： 本发明公开了一种防治罗非鱼海豚链球菌病的饲料加工方法，包括以下步骤：S1：分别将大豆粕、棉籽粕、菜籽粕晒干并粉碎，过筛后混合均匀，制得均匀混合物；S2：向均匀混合物中添加纯虫浆蛋白粉、木薯淀粉、玉米粉、维生素、2‑氨基‑4‑氨甲酰基丁酸、非淀粉多糖酶、微生物制剂、中药诱食剂、海豚链球菌病生物制剂、添加剂Ⅰ、添加剂Ⅱ、添加剂Ⅲ、水，再次混合均匀，制得湿饲料；S3：把步骤S2制得的湿饲料制成颗粒并烘干，最后冷却至25‑30°C，制得罗非鱼饲料。本发明的饲料可以起到抗菌消炎、增强机体免疫功能等作用，能有效降低罗非鱼患海豚链球菌病的死亡率和提高治愈率。